基于自噬探讨左归降糖通脉方对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制

目的 从自噬角度探讨左归降糖通脉方(熟地黄、枸杞子、山茱萸、黄芪、黄连等)对糖尿病合并脑梗死大鼠的神经保护作用机制。方法 将96只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、左归降糖通脉方组(24 g·kg^-1)及二甲双胍+阿司匹林组(150 mg·kg^-1+15 mg·kg^-1),每组24只。除假手术组大鼠外,其余大鼠采用高糖高脂饲料喂养4周后腹腔注射链脲佐菌素建立2型糖尿病大鼠模型,模型复制成功后开始灌胃给药,每日1次,连续5 d。末次灌胃后采用线栓法制备大脑中动脉栓塞大鼠模型。术后进行神经功能评分;采用TTC染色法测定脑梗死率;检测大鼠血糖值及糖化血清蛋白含量;HE染色观察缺血半脑皮质区组织损伤;ELISA法检测缺血侧大脑皮质组织中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;Western Blot法检测皮质组织中微管相关蛋白轻链3(LC3)、p62蛋白表达情况;免疫荧光法检测皮质组织中LC3蛋白表达。结果 与假手术组比较,模型组大鼠的神经功能损伤评分、脑梗死率、血糖水平、治疗前后的体质量...     

基于AMPK/mTOR/ULK1自噬相关通路探讨左归降糖通脉方对AGEs合并缺糖缺氧星形胶质细胞炎性损伤的影响

目的 探讨左归降糖通脉方对糖基化终末产物（AGEs）合并缺糖缺氧（OGD）损伤后星形胶质细胞（AS）的影响及干预机制。方法 使用细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）确定AGEs作用浓度及OGD时间，选择左归降糖通脉方（ZGJTTMP）含药血浆的作用浓度；将星形胶质细胞随机分为空白组、模型（AGEs+OGD）组、ZGJTTMP组、腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制剂（Compound C）组、AMPK激动剂（AICAR）组、ZGJTTMP+AICAR组，倒置显微镜下观察各组细胞形态结构，CCK-8法检测各组细胞存活率，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞中白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量；电镜下观察各组细胞内自噬小体的数目，免疫荧光染色法观察各组细胞中微管相关蛋白1轻链3（LC3）的表达情况，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞LC3、p62、磷酸化（p）-AMPK、AMPK、磷酸化（p）-哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、mTOR、磷酸化（p）-UNC-51样激酶1（ULK1）、ULK1蛋白的表达情况。结果 选择AGEs 200 mg·L^-1合并OGD 6 h作为最适造模条件，5%作为ZGJTTMP含药血浆的最佳作用体积分数。倒置显微镜下见造模后细胞受损严重，ZGJTTMP组与Compound C组细胞损伤得到明显改善；ELISA结果示模型组IL-1β、IL-6、TNF-α的含量显著增加（P<0.01），ZGJTTMP组与Compound C组炎症因子含量显著下降（P<0.01）；电镜下可见模型组细胞内自噬小体数目明显增多，免疫荧光结果示LC3荧光表达面积显著增加（P<0.01），ZGJTTMP组与Compound C组细胞内自噬小体数目明显减少，LC3表达面积显著减少（P<0.01）；Western blot结果显示，与空白组比较，模型组细胞LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著升高（P<0.01），p62、p-mTOR/mTOR、p-ULK1/ULK1显著下降（P<0.01），与模型组比较，ZGJTTMP组与Compound C组细胞内LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、p-AMPK/AMPK蛋白表达显著下降（P<0.01），p62、p-mTOR/mTOR、p-ULK1/ULK1显著升高（P<0.01）。结论 ZGJTTMP对AGEs合并OGD炎性损伤的星形胶质细胞具有保护作用，这一作用是通过抑制了AMPK/mTOR/ULK1自噬相关通路的激活，从而抑制了自噬的过度表达实现的。     

浅谈“象思维”及其在中医基础理论教学中的应用

"象思维"是一种源于中国古代哲学和传统文化的思维方式,是中医的核心思维方式,培养此思维方式对刚接触中医学的学生十分重要。在中医基础理论教学中,教学者需带领学生理解和准确把握"象思维"的特点、思维方式,从多角度将其与中医基础理论知识紧密结合,潜移默化地影响学生形成"象思维"。从汉字中的"象思维"在中医基本概念教学中的运用和天人合一中的"象思维"在中医基本理论教学中的运用两方面探讨如何在课堂引导学生发掘"象思维"。     

基于取象比类探讨中医理论构建的思维方法

取象比类是中医学认识人体生命活动、构建医学理论的基本思维方法,也是中医学素养的重要体现。中医理论是古人将临床经验通过取象比类思维方法的推理总结上升的综合认识。取象比类的理论内涵包括了现代科学逻辑中的综合与类比等思维方法。基于取象比类的思维方法以汉字、自然环境、人文环境3个方面为例探讨中医理论构建的思维方法,既能了解中华传统文化赋予中医学的鲜明特征,又能为中医学的现代科学研究提供新的研究思路和借鉴。     

线粒体溶质载体蛋白SLC25A26诱导肝癌细胞衰老作用及分子机制

目的探究线粒体溶质载体蛋白SLC25A26通过蛋氨酸循环代谢诱导肝癌细胞衰老的调控作用。方法体外培养HepG2细胞系,用阳性药Etoposide(2μmol·L-1)诱导HepG2细胞衰老后,蛋氨酸循环代谢物SAM (0.1 mmol·L-1)处理,Western blot、Real-time PCR检测细胞衰老指标(p16、p21、HMGA1),流式细胞仪检测细胞周期;转染SLC25A26过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测过表达SLC25A26对HepG2细胞衰老指标的影响;HPLC法检测过表达SLC25A26对蛋氨酸循环代谢指标SAM、SAH的影响,Real-time PCR检测过表达SLC25A26对SAM处理后HepG 2细胞衰老指标的影响。结果 Western blot和Real-time PCR检测表明,蛋氨酸循环代谢可以削弱Etoposide诱导的HepG 2细胞衰老水平,流式检测表明细胞周期阻滞在G1期;过表达SLC25A26降低了胞质中蛋氨酸循环代谢物SAM、SAH水平,补充外源性SAM部分抵消了过表达SLC25A26诱导的HepG 2细胞衰老作用。结论促进蛋氨酸循环代谢可以抑制肝癌细胞衰老,过表达SLC25A26可以诱导肝癌细胞衰老,SLC25A26通过调控蛋氨酸循环代谢诱导肝癌细胞衰老。     

李定祥基于"血不利则为水"论治宫颈癌术后双下肢水肿经验

介绍李定祥教授基于"血不利则为水"的思想运用中医药治疗下肢水肿水瘀互结证的经验。李教授认为医圣张仲景曾提出"血不利则为水"思想,为水肿病的治疗提供了一条重要的思路,临床自拟活血利水汤从血、气、水论治,随症加减,取得良效,并附典型案例1则,以期对下肢难治性水液代谢障碍疾病的临床治疗有所启发。     

基于凝血酶诱导自噬探讨化瘀解毒法对缺血性中风（瘀毒互结证）大鼠的影响

目的：观察化瘀解毒法对缺血性中风瘀毒互结证（IS-YD）大鼠不同缺血时相、不同脑区凝血酶表达以及自噬指标LC3Ⅱ/Ⅰ的影响，分析其发挥抗缺血性脑损伤作用的可能机制。方法：于缺血后12、24 h，将116只SD大鼠，随机分为假手术组（SHAM组）、模型组（IS-YD组）、化瘀解毒方组（HJF组）和阿加曲班组（ARG组），其中假手术组8只，其余每组36只，再分为12、24 h两个时间点，每组18只。除假手术组外，其余大鼠制备缺血性中风瘀毒互结证模型。化瘀解毒方组给予11.33 g/（kg·d）剂量灌胃，阿加曲班组予以11.16 mg/（kg·d）剂量腹腔注射，假手术组、模型组给予0.9%生理盐水灌胃。Western blot法检测大脑皮质、海马区的凝血酶、LC3Ⅱ/Ⅰ比值的表达；TTC染色法计算脑梗死体积；透射电镜观察法观察脑区自噬超微结构；HE染色法观察神经元形态学改变。结果：与假手术组比较，模型组大鼠12、24 h两个时间点的神经功能评分升高（P <0.01），脑梗死体积占比增加（P <0.05），大脑皮质、海马区凝血酶、LC3Ⅱ/Ⅰ比值表达均明显升高（P <0.01...