Tat-LK15运载siRNA沉默RGC-5神经细胞nNOS基因的实验研究

目的探讨离体条件下细胞穿透肽Tat-LK15运载小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)沉默RGC-5视神经节细胞(retinal ganglion cell line,RGC-5)神经元型一氧化氮合酶(neuronal nitric oxide synthase,n NOS)基因的可行性,为在体条件下研究Tat-LK15运载siRNA沉默n NOS表达治疗神经病理性疼痛提供理论依据。方法 1通过凝胶阻滞分析测定Tat-LK15与siRNA的最佳交联比。流式细胞术检测Tat-LK15/FAM-siRNA以最佳交联比转染RGC-5细胞的转染效率;不同剂量Tat-LK15(1、2.5、5、10和20μg)孵育RGC-5细胞24 h,流式细胞术检测细胞凋亡率。2制备n NOS高表达的RGC-5细胞模型。3将RGC-5细胞随机分为5组:对照组、模型组、Tat-S组(Tat-LK15运载n NOS/siRNA转染模型细胞)、Lipo-S组(LipofectamineTMRNAi MAX运载n NOS/siRNA转染模型细胞)及Tat-N组(Tat-LK15运载NCsiRNA转染模型细胞),通过Q-PCR及Western blot检测各组nN OS表达水平。结果 Tat-LK15与siRNA质量比为2∶1时可完全包裹siRNA,达到最佳交联,此时其转染效率为(84.4±3.9)%。当Tat-LK15剂量为20μg(6.1μmol·L-1)时才出现一定细胞毒性,细胞凋亡率高于对照组[(10.3±1.1)%vs(7.4±0.9)%,P<0.05]。造模后RGC-5细胞nN OS表达水平明显升高(P<0.05)。与模型组相比,Tat-S组nN OS mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05),Tat-S组与Lipo-S组相比无差异(P>0.05)。结论Tat-LK15能高效转染siRNA,细胞毒性低,离体条件下可有效运载siRNA沉默nN OS的基因表达。     

肌酐清除率、Cockcroft-Gault公式及MDRD方程评估肾小球滤过率的差异性研究

目的寻找一种准确估算肾小球滤过率（GFR）的方法。方法以99M锝-二乙三胺五乙酸（^99mTc—DTPA）同位素法测定的GFR为参考标准，采用肌酐清除率、Cockcroft—Gault公式及肾病膳食改良实验（MDRD）方程评估GFR，比较几种不同方法估算的GFR与参考GFR的相关性。结果Cockcrofl—Gauh公式估算的GFR结果与参考GFR间存在良好的相关性（r=0．839，P〈0．01）。结论通过血肌酐结合相应的公式可准确、快速估算GFR。     

浅谈职业教育的地位及作用

国家的发展、进步离不开高素质的劳动者,离不开适应社会主义现代化建设需要的高素质建设者和专门人才,而保持和提高劳动者的整体素质,教育是根本保证,其中职业教育为大多数群体提供了接受教育保障乃至就业保障,为国力增强、国家强大提供了更多、更丰富的人才,做出了应有的贡献.     

右美托咪定在神经刺激仪下的下肢神经阻滞中的镇静作用

目的 观察右美托咪定用于辅助神经刺激仪下的下肢手术神经阻滞麻醉的镇静效果.方法 40例膝关节置换手术患者随机分为2组(每组20例),于神经刺激仪下行神经阻滞麻醉.在操作前10 min,试验组静脉泵注右美托咪定1 μg· kg-1,后以0.5 μg·kg-1 ·h-1维持;对照组,则静脉注射咪达唑仑2.5 mg和芬太尼0.05 mg.用神经刺激仪进行定位,用腰丛联合坐骨神经阻滞.记录不同时间点患者的心率、血压及血氧饱和度(SpO2),并进行Ramsay镇静评分.结果 试验组的Ramsay评分明显高于对照组(P＜0.05);对照组SpO2明显低于试验组(P＜0.05).试验组患者用药后心率明显减慢(P＜0.05),对照组则无明显变化.结论 用右美托咪定麻醉,对清醒患者具有镇静时易唤醒、无呼吸抑制等特点.     

Tat-LK15运载NR2B siRNA治疗慢性炎性疼痛的效果

目的 探讨大鼠鞘内注射细胞穿透肽Tat-LK15介导NR2B siRNA治疗大鼠慢性炎性疼痛的可行性.方法 健康雄性SD大鼠72只,6周龄,体质量180~200 g,采用随机数字表法分为4组(n=18):空白对照组(C组)、慢性炎性痛模型组(CFA组)、Tat-LK15/NR2B siRNA组(siTat-LK15组)和Tat-LK15/阴性对照siRNA组(ncTat-LK15组).除C组不给予任何处理外,其余大鼠右后趾皮下注射完全弗氏佐剂(CFA)制作慢性炎性痛模型.CFA组、siTat-LK15组及ncTat-LK15组于模型制备后第1、3、5天分别鞘内注射生理盐水、Tat-LK15/NR2B siRNA及Tat-LK15/阴性对照siRNA 10μL.每组取12只大鼠于造模前1 d及鞘内注射后3、7、14、21 d时测定机械缩足反应阈(PWMT)和热缩足反应潜伏期(PWTL).每组取6只大鼠于鞘内注射后7 d处死后取脊髓,检测鞘内注射对大鼠脊髓NR2B蛋白表达的影响.结果 鞘内注射后7 d,siTat-LK15组大鼠脊髓NR2B蛋白表达下调.鞘内注射后3、7、14及21 d,siTat-LK15组PWMT与PWTL与CFA组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),而ncTat-LK15组PWMT与PWTL较CFA组相比差异无统计学意义(P>0.05).结论 鞘内注射Tat-LK15/NR2B siRNA可有效减轻CFA所致大鼠慢性炎性疼痛.     

依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制

目的 探讨依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及其机制.方法 将120只♂ SD大鼠随机均分为假手术组、模型组和依托咪酯高、低剂量组,ip给予各组大鼠相应药物后,采用线栓法制备大脑中动脉栓塞再灌注模型,评价依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注的保护作用.参照Bederson评分标准评价大鼠的神经功能损伤,采用TTC染色法观察大鼠的脑梗死体积,采用免疫组化法分析大鼠海马CA1区NAIP、caspase-3及caspase-7蛋白的表达,采用HE染色法观察大鼠脑组织的病理变化.结果 与模型组比较,依托咪酯组大鼠的神经功能损伤和脑梗死容积明显减轻,大鼠海马CA1区NAIP蛋白的表达明显增强,caspase-3蛋白的表达明显减少;依托咪酯高、低剂量组间比较无明显差异;各组大鼠海马CA1区caspase-7蛋白的表达无显著差异.结论 依托咪酯对大鼠脑缺血再灌注造成的脑损伤具神经细胞保护作用,其机制可能与上调NAIP蛋白的表达、抑制caspase-3蛋白的活化有关.     

基于定量指标的医疗质量评价体系对比分析

通过文献检索、政策查询等方法收集我国目前用于医疗质量评价的指标体系,并对比分析公立医院绩效考核、公立医院高质量发展、等级医院评审和DRG等涵盖的医疗质量评价指标。不同评价指标体系依其评价作用与意义在指标选取、权重、评价方法等均存在差异,提出加强信息支撑、做好数据质量控制、合理设置指标权重和评价方式、完善医疗质量管理与控制体系、加强各级质控中心建设与管理等对策,为将来定量质量指标评价工作的有效推进提供参考。     

双侧竖脊肌平面阻滞在老年患者腰椎后路手术中的应用效果

目的：随着人口老龄化迅速发展,接受腰椎后路手术的老年患者持续增多。腰椎手术可引发中重度术后疼痛,以阿片类药物为主的常规镇痛方法不良反应较多,不利于老年患者快速康复。近期研究表明,竖脊肌平面阻滞(erector spinae plane block,ESPB)在脊柱手术中的镇痛效果良好,但对老年腰椎手术的镇痛效果及对康复的影响尚未完全明确。本研究旨在观察双侧ESPB在老年腰椎后路手术中的应用效果,以期为改进麻醉方式提供参考。方法：选取2020年5月至2021年11月行腰椎后路手术的老年患者70例,性别不限,年龄60～79岁,美国麻醉医师协会(American Society of Anesthesiologists,ASA)II～III级,采用随机数字表法将患者分为ESPB组(行双侧ECPB)和对照(C)组,每组35例。麻醉诱导前,ESPB组于L₃或L₄双侧横突各注射0.4%罗哌卡因20 mL,C组仅注射等量生理盐水。比较2组术后48 h内静息及活动时疼痛数字评分量表(Numerical Rating Scale,NRS)评分;术后首次自控镇痛...     

妊娠期血栓弹力图参数的影响因素

目的：孕产妇数量逐年上升,与凝血功能异常相关的不良妊娠事件增多。对孕妇进行凝血功能评估并及时干预至关重要。本研究旨在分析妊娠期女性血栓弹力图(thrombelastography,TEG)参数的影响因素,探讨TEG指标对孕妇凝血状态的评估作用。方法：回顾性分析2018年至2020年在中南大学湘雅医院产科住院的449例孕妇的临床资料,对比不同年龄、受孕方式、妊娠阶段的健康孕妇间TEG参数的差异,分析妊娠期高血压疾病(hypertensive disorders in pregnancy,HDP)、妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)及同时合并两种疾病对孕妇TEG各参数的影响。结果：与中孕组相比,晚孕组孕妇TEG中的R值、K值增加,α角减小,CI值、LY30值减少(均P<0.05)。HDP组与健康组孕妇相比,TEG中R值、CI值的差异均有统计学意义(均P<0.05)。GDM组、同时合并HDP及GDM组与健康组孕妇相比,TEG各项参数的差异均无统计学意义(均P>0.05)。多元线性回归分析显示：TEG中R值的影响因素为妊娠周数(...     

胃癌患者血清S100P、ILF3和PARP1水平与肿瘤病理特征的相关性分析

目的 探讨胃癌患者血清S100钙结合蛋白(S100P)、白细胞介素增强结合因子3(ILF3)、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)水平与肿瘤病理特征的相关性.方法 选取2017年10月至2019年1月该院确诊胃癌患者93例为研究组,选择同期93例胃部良性肿瘤患者为对照组.比较两组患者血清S100P、ILF3和PAR...