库尔特STKS全自动血球分析仪测定血小板性能评价

评价库尔特STKS全自动血球分析仪测定血小板的性能.通过不精密度、不准确度、线性范围的实验观察,库尔特STKS全自动血球分析仪血小板测定的性能可以满足临床实验室的要求.     

库尔特STKS全自动血球分析仪测定血小板性能评价

评价库尔特STKS全自动血球分析仪测定血小板的性能。通过不精密度、不准确度、线性范围的实验观察,库尔特STKS全自动血球分析仪血小板测定的性能可以满足临床实验室的要求。     

惰性分离胶管采集和保存样品在血糖检测中的应用

目的研究惰性分离胶管采集和保存血糖标本的可行性。方法随机选择患者标本40例,采用惰性分离胶管和干燥管(无抗凝)采集同一患者血液标本,待血液凝固后立即离心,各取出60μL血清到Eppendorf管(简称Ep管)冷冻保存;再分别于2、4、6、8、24 h后从惰性分离胶管中取出60μL血清到Ep管中冷冻保存,检测并比较上述血清的葡萄糖浓度。结果惰性分离胶管0、2、4、6、8、24 h血糖的检测结果与干燥管0小时血糖检测结果差异无统计学意义(P0.05),惰性分离胶管的2、4、6、8、24小时血糖检测结果与0小时惰性分离胶管血糖检测结果差异无统计学意义(P0.05)。结论使用惰性分离胶管不会影响血糖检测结果且可以防止糖酵解。     

MALDI-TOF MS对醋酸钙鲍曼不动杆菌复合群菌种鉴定效果的分析

目的评估基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术对醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合群内菌种的鉴定能力。方法收集2018年1月至2020年3月经Vitek 2全自动微生物鉴定仪鉴定为醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合群的菌株280株,用Vitek MALDI-TOF MS(V3.2)鉴定并用gyr B基因测序验证,比较复合群内不同种间的耐药性差异。结果 280株醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合群经Vitek MALDI-TOF MS鉴定,结果为鲍曼不动杆菌251株、医院不动杆菌15株和皮特不动杆菌14株。质谱鉴定结果与基因测序结果符合率为100%。鲍曼不动杆菌对多种抗菌药物均表现为高度耐药,耐药率多在60%以上,医院不动杆菌和皮特不动杆菌对多种抗菌药物呈现高度敏感。除了对阿米卡星、米诺环素、复方磺胺甲噁唑外,鲍曼不动杆菌对各种检测药物的耐药性显著高于医院不动杆菌和皮特不动杆菌,差异有统计学意义(P0.05);医院不动杆菌和皮特不动杆菌在各种检测药物耐药率上差异无统计学意义(P 0.05)。结论 Vitek MALDI-TOF MS3.2版本可实现醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合群不同种的鉴定;醋酸钙不动杆菌-鲍曼不动杆菌复合群不同种的药敏结果存在差异性。     

一株黏液型沙门菌的鉴定与分析

目的对住院患者血液分离的一株黏液型沙门菌进行多种方法的鉴定及血清凝集试验,以期将该菌准确鉴定到种。方法采用多种鉴定方法,如西门子Micro Scan Walk Away 96 plus全自动细菌鉴定/药敏分析仪,API 20E,VI-TEK MS,16S r RNA测序法对该菌进行鉴定。结果多种鉴定方法结果均为沙门菌属,但血清凝集试验一直为阴性。结合本菌菌落呈黏液型可能凝集反应不典型的特点,采用多次传代恢复到非黏液型菌落后出现凝集反应,最后鉴定为猪霍乱沙门菌。结论黏液型沙门菌表面黏液状的物质会极大的干扰血清凝集试验,可能会导致临床鉴定错误,有条件实验室最好用16S r RNA进行更加准确的菌株鉴定。     

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的基因型及同源性分析

目的探讨耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药性、基因型和同源性。方法收集临床采集的碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌23株,检测其药物敏感性和ESBLs表型,改良Hodge试验确证碳青霉烯酶表型,PCR、DNA测序和BLAST证实基因型,脉冲场电泳(PFGE)分析产酶菌株同源性。结果 23株肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素完全耐药,其中47.8%来源于痰液标本,主要分布在神经外科重症监护室(NCU)。23株菌ESBLs和改良Hodge试验阳性率分别为21.7%、82.6%,检出SHV-11(22株)、KPC-2(14株)、NDM-1(6株)、VEB(2株)、IMP(1株)、OXA-1(2株)和OXA-10(2株)耐药基因。PFGE将23株菌基因分成A~G 7个带型,其中以A型为主(69.6%,16/23)。结论碳青霉烯酶基因型以KPC-2型及NDM-1型为主,院内存在克隆株流行。     

6株枝孢霉的鉴定与分析

目的 利用ITS基因序列分析对临床分离的6株枝孢霉进行分子生物学鉴定与分析,以提高对枝孢霉的鉴定能力.方法 从皮肤病患者中分离6株枝孢霉,通过观察培养后菌落的形态及其显微镜下特征,并利用ITS序列对其进行PCR分子生物学分析,并将PCR产物送公司进行测序.结果 6株枝孢霉由显微镜下的形态和培养的菌落特征鉴定,提取其DNA进行PCR扩增,产物进行1%琼脂糖凝胶电泳分析,再由Tanon-3500凝胶成像系统确定扩增所得电泳带的大小在500~750 bp之间,测序结果经Blast比对,其中4株鉴定为球孢枝孢霉100%,1株鉴定为枝孢样枝孢霉100%,1株鉴定为枝孢霉属97%.结论 通过ITS基因序列分析技术,能更有效准确地提高对枝孢霉的鉴定能力,为临床的准确治疗方案提供有力的依据.     

结核分枝杆菌自身淬灭探针荧光定量PCR检测方法的建立

目的利用自身淬灭探针技术建立敏感、特异、快速、价廉且能广泛应用的结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法。方法构建重组质粒PET-32a（＋）-16srRNA作为标准品,自行设计自身淬灭探针,建立、优化定量PCR体系。并进行方法学评价及临床应用。结果所建立方法的线性检测范围为102～109copies／μL,灵敏度为lcopy／μL,特异性为100％。高拷贝样品的天问CV为2．65％、批内CV为1．86％,低拷贝样品的天间CV为2．12％、批内CV为0．78％。该方法比培养方法更快速、灵敏。结论以自身淬灭探针技术为平台的结核分枝杆菌荧光定量PCR方法灵敏度高、特异性好,对结核病的早期快速诊断有较高价值。     

基于ITS基因序列鉴定阿萨希毛孢子菌及体外药敏分析

目的探讨使用ITS基因序列鉴定临床分离的阿萨希毛孢子菌及对常见抗真菌药物的体外敏感性,为临床治疗提供依据。方法对8株临床分离的阿萨希毛孢子菌通过形态学及核糖体r DNA ITS序列分析鉴定到种;使用法国梅里埃ATB FUNGUS 3真菌药敏试剂条测定氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑、两性霉素B及5氟胞嘧啶对8株阿萨希毛孢子菌的最低抑菌浓度。结果阿萨希毛孢子菌在沙氏培养基上形成表面有干燥粉状物,奶油色酵母样菌落;转种科玛嘉念珠菌显色培养基背面明显呈蓝色,正面呈浅蓝色;转种米粉培养基后,镜下可见大量的关节孢子。核糖体r DNAITS序列分析结合形态学特点可以将阿萨希毛孢子菌鉴定到种,药敏结果显示8例患者中,有3例对5-氟胞嘧啶耐药,其余均中介;有3例对两性霉素B敏感,其余均耐药;有3例对伊曲康唑敏感,其余均中介;8例均对氟康唑和伏立康唑敏感。结论 ITS序列分析准确快速,可以辅助临床区分难鉴定毛孢子菌。阿萨希毛孢子菌药敏谱不同于临床常见其他酵母菌,5-氟胞嘧啶、两性霉素B和伊曲康唑对其活性差,氟康唑和伏立康唑具有良好的体外抗菌活性。     

21株快速生长分枝杆菌的鉴定与特征

目的 对临床分离的21株快速生长分枝杆菌进行种型鉴定和特征分析。方法 对广东省中医院2010～2015年收集的21株快速生长分枝杆菌进行传统的表型形态学鉴定,16S rRNA基因和ropB基因测序鉴定和微量肉汤稀释法的药敏试验,结合光滑/粗糙型变异分析其菌型特征和耐药性。结果 21株分离株均为血平板上7天内生长良好的抗酸阳性菌,经16S rRNA基因和ropB基因测序鉴定均为分枝杆菌。根据生长的菌落特性,12株为光滑型,7株为粗糙型,2株为中间型。涂制湿片显示,12株光滑型分枝杆菌和2株中间型分枝杆菌均能在生理盐水表面形成一层漂浮的油脂(可能为分枝菌酸)。药敏试验显示,快速生长分枝杆菌对阿米卡星、头孢西丁、克拉霉素的敏感性较好。统计学分析显示,粗糙型具有比光滑型菌株更高的耐药性。结论 快速生长分枝杆菌可分为光滑型、粗糙型和中间型3种菌落表型,其中油脂飘浮现象能用于中间型和光滑型分枝杆菌的快速鉴定。