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目的 探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)在异烟肼致人肝细胞损伤中的作用。方法 培养人正常
肝细胞HL-7702,实验分为6 组:空白对照组、异烟肼组、异烟肼+SIRT1 激动剂组、SIRT1 激动剂对照组、
异烟肼+SIRT1 抑制剂组、SIRT1 抑制剂对照组。取各组细胞上清液测定丙氨酸转氨酶(ALT)、天门冬氨
酸转氨酶(AST)含量;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测肝细胞SIRT1、NF-kB p65 mRNA
表达水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测SIRT1、核转录因子kB(NF-kB p65)、白细胞介素6(IL-6)、
肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达水平。结果 与空白对照组比较,异烟肼组细胞SIRT1 的mRNA 和
蛋白表达下降(P <0.05),其下游靶基因NF-kB p65 的mRNA 和蛋白表达升高(P <0.05),炎症因子IL-6、
TNF-α 蛋白表达水平升高(P <0.05)。加入SIRT1 激动剂可减轻异烟肼引起的炎症反应,加入SIRT1 抑制
剂可使NF-kB p65、IL-6、TNF-α 表达水平进一步升高从而加重细胞的炎症损伤。结论 异烟肼诱导肝细
胞损伤过程中,降低SIRT1 水平,增加炎症因子的表达。SIRT1 的激活可以通过降低NF-kB p65 表达进而减
轻肝细胞损伤的发生。 相似文献
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目的 探讨异烟肼(INH)诱导的人正常肝细胞中组蛋白乙酰化水平变化对CYP2E1、GSTP1表达的影响.方法 将人正常肝细胞HL-7702分为对照组、INH组、INH+Garcinol组、Garcinol组、INH+TSA组、TSA组;培养3h后收获细胞和上清液.采用比色法检测细胞培养液中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测CYP2E1、GSTP1及下游凋亡指标JNK、Bax及抗凋亡指标Bcl2的mRNA水平;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肝细胞HAT和去乙酰化酶HDAC活性及CYP2E1、GSTP1蛋白含量.结果 与对照组相比,INH组HAT活性降低,HDAC活性增加,CYP2E1mRNA及蛋白表达增加,GSTP1 mRNA及蛋白表达降低,凋亡指标JNK、Bax mRNA增加,抗凋亡指标Bcl2mRNA降低,差异均有统计学意义(P<0.05).与INH组比较,加入Garcinol后,HAT活性降低,CYP2E1、GSTP1 mRNA及蛋白表达亦降低;加入TSA后则相反,HDAC活性降低,CYP2E1、GSTP1 mRNA及蛋白表达均增加;同时,2个抑制剂组的JNK、Bax mRNA表达减少,Bcl2 mRNA表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 INH能诱导人正常肝细胞乙酰化水平改变进而影响CYP2E1、GSTP1表达. 相似文献
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