阿魏酸钠对甘油致小鼠肾脏氧化性损伤的拮抗效应阿魏酸钠对甘油致小鼠肾脏氧化性损伤的拮抗效应

目的从氧化应激角度,探讨阿魏酸钠对实验动物中毒性肾损害的防治作用。方法建立甘油所致小鼠急性肾小管损伤模型,观察不同剂量的阿魏酸钠对肾损伤小鼠肾功能指标、抗氧化指标和组织学的影响。结果在甘油注射后6和72 h,阿魏酸钠100～200 mg·kg^-1 ip能剂量依赖性的降低甘油所致血清尿素氮、肌酐和N-乙酰-β-葡糖苷酶的升高。阿魏酸钠200 mg·kg^-1减少肾组织丙二醛生成,提高肾脏谷胱甘肽含量及谷胱甘肽过氧化物酶、谷胱甘肽S-转移酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性,且可明显减轻肾组织病理改变。结论阿魏酸钠对甘油致肾损伤有防治作用,其机制与增强肾脏抗氧化功能有关。     

肝星状细胞激活的分子机制与抗肝纤维化治疗

肝星状细胞(HSC)激活是肝纤维化发生的中心环节,其激活过程可分为始动阶段(旁分泌刺激和转录调控因素启动级联瀑布式的细胞反应)和持续阶段(旁分泌或自分泌刺激和细胞外基质重建共同维持HSC活化的表型反应)。肝脏中多种细胞和细胞因子参与调节了HSC的激活过程。活化型HSC的表型变化主要包括细胞增殖、收缩和纤维形成等。抗肝纤维化治疗策略主要包括调控HSC活化增殖或促其凋亡、抑制胶原合成或促其降解、细胞因子治疗和间充质干细胞治疗等。     

罗汉果甜苷对体外人肝星状细胞活化和凋亡的影响

目的研究罗汉果甜苷对体外培养人肝星状细胞LX-2活化及凋亡的影响。方法体外培养LX-2,将其分为空白对照组、不同质量浓度的罗汉果甜苷干预组(80、160、240、320μg/mL),每组8瓶细胞,药物与细胞共同孵育24 h后,采用CCK-8试剂检测细胞增殖状态,用酶联免疫吸附法测定转化生长因子-β1(TGF-β1)和Ⅰ型胶原的蛋白分泌,用RT-PCR法检测TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA的表达。用流式细胞仪双染法检测细胞凋亡。结果 CCK8结果显示罗汉果甜苷各剂量组作用LX-2细胞24 h后,细胞增殖均明显降低(P<0.05);ELISA和RT-PCR结果表明,与空白对照组比较,罗汉果甜苷各剂量组可抑制LX-2中TGF-β1和Ⅰ型胶原的蛋白分泌;并能抑制TGF-β1和α-SMA的mRNA表达(P<0.05)。流式细胞检测结果显示罗汉果甜苷各剂量组亦可剂量依赖性显著增加LX-2凋亡率。结论罗汉果甜苷可通过抑制TGF-β1和I型胶原的蛋白及TGF-β1和α-SMA的mRNA的表达来抑制肝星状细胞活化,还能促进肝星状细胞凋亡,从而发挥抗肝纤维化的作用。     

罗汉果皂苷对乙醇所致肝损伤的拮抗作用

目的 探讨罗汉果皂苷对实验小鼠急性酒精肝损伤的防治作用.方法 建立乙醇所致小鼠急性肝损伤模型,观察罗汉果皂苷对肝损伤小鼠肝功能指标、抗氧化指标、血糖和组织学的影响.结果 罗汉果皂苷0.5 g·kg-1·d-1连续灌胃给药7 d能降低乙醇所致血清谷丙转氨酶的升高.结果 进一步表明,罗汉果皂苷可提高肝脏过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性,且可明显减轻肝组织病理改变.结论 罗汉果皂苷对乙醇肝损伤有防治作用,其机制与增强肝脏抗氧化功能有关.     

罗汉果甜苷对复合因素所致大鼠肝纤维化的保护作用

目的 研究罗汉果甜苷对复合因素所致大鼠肝纤维化的影响.方法 通过给予大鼠高脂、乙醇和四氯化碳三种因素建立复合因素诱导肝纤维化模型,观察罗汉果甜苷对肝纤维化大鼠的肝功能指标、脂质过氧化产物和胶原蛋白的影响.结果 与正常对照组相比,复合因素所致肝纤维化模型组血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、总胆固醇（TC）和甘油三酯（TG）含量明显增加（P＜0.01）,肝组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）和胶原标志物羟脯氨酸（Hyp）含量也显著增加（P＜0.01）.与模型对照组相比,不同剂量罗汉果甜苷可剂量依赖性地降低大鼠血清中ALT活性及TC和TG含量（P＜0.05或＜0.01）;并可降低肝组织中MDA和Hyp的含量（P＜0.05或＜0.01）.结论 罗汉果甜苷对复合因素所致肝纤维化大鼠有一定的保护作用.     

人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光PCR法检测GSTP1基因多态性

目的 建立人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光PCR法检测GSTP1第105个密码子基因多态性的方法,并利用该法研究GSTP1 第105个密码子在广西百色市人群遗传特征,为进一步研究GSTP1基因多态性与疾病的发生易感性研究奠定基础.方法 采用人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光PCR法技术对211例广西百色市健康成人进行GSTP1 Ile105Val基因分型,并分析是否存在性别差异及与国内外其他人群分布频率差异.结果 人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光PCR法GSTP1基因型检测结果与PCR产物测序结果一致,用此法检测出广西百色市女性和男性人群GSTP1 Ile105Val均以A等位基因为主,分别为79.7%和84.5%;AA野生纯合子型、AG杂合子型和GG突变纯合型在女性人群中分别为62.2%、35.1%和2.7%,男性人群则为71.0%、27.0%和2.0%.经统计学分析,广西GSTP1Ile105Val等位基因和基因型分布频率无性别差异,与辽宁、回族、印度、俄罗斯族等人群相应位点基因型分布频率无差异,但与国内维族、朝鲜族、蒙古族、高加索女性相比差异有统计学意义(P<0.01).结论 人工修饰双等位基因特异性引物结合SYBR Green I荧光PCR法是一种快捷、准确的基因多态性检测方法.广西人群GSTP1基因 Ile105Val呈多态性分布,基因型分布频率无性别差异,与其他部分种族存在差异.     

地胆草提取物对肝癌血管生成拟态的作用研究

目的 研究地胆草提取物对肝癌HepG2细胞增殖、迁移、血管生成拟态的作用和机制.方法 取对数生长期HepG2肝癌细胞,分为对照组(0.1％DMSO)和不同浓度实验组(地胆草提取物质量浓度分别为25,50,75,100,125,150μg·mL-1).以噻唑蓝(MTT)比色法测定地胆草提取物对HepG2细胞增殖的影响;根...     

广西壮族人群CYP1B1基因Arg48Gly和Ala119Ser多态性研究

目的研究CYP1B1密码子48和119在广西壮族人群遗传特征。方法用聚合酶链反应-限制性片断长度多态性技术对278例广西壮族正常成人进行CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因分型,并分析两位点基因型是否存在连锁不平衡、性别差异及与国内外其他人群分布频率差异。结果 CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因分型无性别差异,且存在连锁不平衡(D’为0.81,r2为0.59),与国内四川和上海人群相应位点基因型分布频率无差异;但与日本、印度、波兰、美国黑人和白人等人群相应位点基因型分布频率差异有统计学意义(P<0.01)。结论广西壮族人群CYP1B1 Arg48Gly和Ala119Ser基因型分布频率无性别差异,且存在连锁不平衡,与其他部分种族存在明显差异。     

大鼠肝星状细胞体外分离纯化方法的建立及多种CYP450亚型的表达

目的研究和比较肝脏星状细胞和肝实质细胞内多种细胞色素P450（CYP）亚型——CYP1A1、CYP1B1、CYP282、CYP2E1、CYP3A1 mRNA的表达及其水平，初步阐明肝星状细胞中与外源物活化相关的CYP酶系的基础表达和代谢特征。方法采用链霉蛋白酶胶原酶序贯灌流和Nycodenz密度梯度离心建立大鼠肝星状细胞体外分离和纯化方法；运用desmin免疫细胞化学技术和自发荧光共聚焦显微镜技术鉴定肝星状细胞纯度；并用糖原染色和过氧化物酶法分别测定肝实质细胞和枯否细胞的污染率；     

肝损伤大鼠肝脏异物代谢功能的改变

目的　研究不同肝损伤状态下肝脏药物代谢和抗氧化功能的变化及规律 ,为肝纤维化患者的临床合理用药提供依据。方法　建立大鼠四氯化碳急性肝损伤和复合因素肝纤维化、肝硬化模型 ,差速离心法制备肝亚细胞组分 ,测定药物代谢酶和抗氧化酶活性。结果　不同肝损伤状态下大鼠肝微粒体药物代谢Ⅰ相酶———细胞色素P4 5 0 (CYP)总量、CYP1A1、3A活性和Ⅱ相酶—谷胱甘肽S 转移酶 (GST)活性均明显降低 ,随损伤时间递减 ,在肝硬化时达最低 ;而CYP2E1活性在急性肝损伤时即达最低 ,随染毒时间的延长而有所恢复。肝纤维化状态下CYP1A、CYP2E1、CYP3A和GST活性分别为正常对照组的 6 8%、5 6 %、81%和 5 9%。肝纤维化状态下胞浆抗氧化酶 GST、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性也呈不同程度降低 ,为正常对照组的 85 %、76 %和 5 4 %。结论　肝纤维化时 ,肝脏异物代谢酶功能降低 ,其降低程度多与肝损伤轻重和时间长短有关。