人酪氨酸羟化酶基因真核表达载体的构建及在哺乳动物细胞中的表达

用限制性内切酶EcoRI从pKS(-)HTH_1切下全长为1.9 kb的人酪氨酸羟化酶基因,在T_4DNA连接酶的作用下连接在真核表达载体pCDNA_3的EcoR Ⅰ位点,构建成重组质粒pcD-NA_3HTH_1,该质粒转染COS-7细胞,免疫荧光组织化学染色证实酪氨酸羟化酶在其中的表达。     

基因修饰细胞在脑内移植研究中的应用

用外源正常基因修饰细胞,使之获得合成和分泌神经营养因子或特异性神经递质的功能,然后把这种细胞植入脑内以治疗中枢神经系统疾患。这种新的脑内移植治疗模式,有其独特的优越性,可望在临床中得到应用。     

冷冻保存胎脑组织移植治疗帕金森病的临床应用（附1例报告）

冷冻保存胎脑组织移植治疗帕金森病的临床应用（附１例报告）上海医科大学神经病学研究所仝海波，应其龙，江澄川，唐镇生帕金森病（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓｄｉｓｅａｓｅ，ＰＤ）是由于黑质中合成、分泌多巴胺的神经元变性、坏死而引起的。正常人脑黑质约含６万多个多巴...     

脑内移植GFP基因修饰细胞的研究

目的为确定外源GFP基因能否作为标记基因来追踪细胞在植入脑内后的生长情况。方法构建GFP基因真核表达质粒,导入PA317细胞,筛选出GFP高表达的PA317细胞克隆,移植入SD大鼠纹状体,作相应部位的组织冰冻切片,用荧光显微镜观察GFP在脑内的表达。结果GFP高表达的PA317细胞克隆,发出强绿色荧光,被移植入SD大鼠纹状体后．仍发出绿色荧光。结论GFP基因可以作为标记基因追踪细胞在植入脑内后的生长情况。     

脑内移植重组基因治疗帕金森病的实验研究

本研究把Ⅰ型人酪氨酸羟化酶（ｈｕｍａｎｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅｔｙｐｅⅠ；ＨＴＨ１）ｃＤＮＡ连接到逆转录病毒载体ＬＮＳＸ上，构建成真核表达载体ＬＮＳＨＴＨ１，然后通过ｉｎｖｉｖｏ途径转染帕金森病模型鼠的纹状体细胞。外源的ＨＴＨ１基因在宿主脑内得到了表达，并使其病理行为改善约７０％。这种新的基因治疗帕金森病的方式，有其独特的优越性。     

GFP,TH双基因在NIH-3T3细胞及帕金森病大鼠脑内的表达

目的以绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）作为一个标记,观察ＧＦＰ标记的ＨＴＨ１基因修饰的ＮＩＨ－３Ｔ３细胞在体外及植入脑内后的生长情况,判断ＧＦＰ基因能否作为一种新的筛选标记基因。方法构建同时表达ＧＦＰ和ＨＴＨ１双基因的多基因表达载体ＧＣ－ＧＦＰ－Ｐ－ＨＴＨ１－ＳＮ。并转染ＮＩＨ－３Ｔ３细胞,且移植入Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ病模型大鼠纹状体内。结果用荧光显微镜、流式细胞仪、免疫组化、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ等方法均检测到ＧＦＰ、ＨＴＨ１在体外和脑内的表达。结论ＧＦＰ可作为一个筛选标记基因,可对目的基因或植入细胞的其他功能性产物的表达进行观察和检测。     

基因修饰细胞在脑内移植研究中的应用

脑组织移植术作为一种研究和治疗中枢神经系统(CNS)疾患的方法，在过去的十几年中得到了迅速发展，但作为供体的神经细胞不易获得，并难以在宿主脑内长期存活，限制了脑组织移植术的应用。以脑内移植胚胎中脑组织治疗帕金森病(Parkinson's discase；PD)为例，作为供体的中脑组织，其多巴胺(dopamine；DA)能神经元含量比任何其它脑组织都高，但也只占其总细胞数的一小部分。     

胚脑组织的冷冻保存及其临床应用的尝试

本文着重介绍胚脑组织进行冷冻保存复苏培养和移植的实验方法。观察其冷冻保存后的胚脑组织在体外及宿主脑内继续生长、分化的情况。应用ＣＴ立体定向技术在尾核头部作冷冻胚胎移植治疗１例重症帕金森氏病病人的手术程序及结果。     

胚脑组织的冷冻保存,培养和移植

本实验对胚胎的大脑组织进行了冷冻保存、培养和移植,证实了经冻存的胚脑组织在体外和移植入宿主脑内后保持继续生长、分化的特性。