谷丙转氨酶37℃参考方法的建立及其应用研究

目的通过建立37℃谷丙转氨酶（ALT）参考方法，对酶校准品定值，探讨血清ALT测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立ALT酶催化活性参考方法，用参考方法测定ERM-AD 454 ALT参考品，验证参考方法的准确度，并对其精密度、线性范围和干扰因素进行方法学评价，同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值，按照NCCLS EP9-A方案比较40份人血清用酶校准品校正的常规方法和参考方法ALT结果。结果用参考方法测定ERM-AD454 ALT参考品结果186．4U／L，在其给定的186±4U／L范围内。初步建立的37℃ALT参考方法总CV0．89％～1．12％，线性范围1．3～300U／L。ALT测定结果在32U／L左右偏差超过5％的干扰物浓度分另4为游离胆红素205．2μmol／L、结合胆红素136．8μmol／L；ALT在123U／L左右测定结果偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素256．5μmol／L、结合胆红素273．6μmol／L。血红蛋白在2g／L和三酰甘油在10mmol／L以下时对两种浓度的ALT干扰分别均大于5％和仍然小于5％。用制备的酶校准品校准的常规方法和参考方法进行比较，相关良好（r^2=0．9992）。前者结果与后者相对偏倚在±10％之内。结论ALT参考方法基本建立，采用参考方法为酶校准品定值，可以提高血清ALT测定结果的准确度和可比性。     

天门冬氨酸氨基转移酶37℃参考方法的建立及其应用研究

目的通过建立37℃天门冬氨酸氨基转移酶（AST）参考方法,对酶校准品定值,探讨血清AST测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）推荐的参考测量程序建立AST酶催化活性参考方法,并对其精密度、线性范围和干扰因素进行方法学评价,用参考方法测定c．f．a．s多项校准液,并建立本室的参考范围。同时用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值,按照NCCLSEP9-A方案比较40份人血清用酶校准品校准的常规方法和参考方法AST结果。结果我室初步建立的37℃ AST参考方法相应方法学参数,如下：总CV0．89％-1．12％、线性范围1．3—300U／L。AST测定结果在48U／L左右偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素256．5μmol／L、结合胆红素205．2μmol／L;AST在165U／L左右测定结果偏差超过5％的干扰物浓度分别为游离胆红素307．8μmol／L、结合胆红素342μmol／L。血红蛋白在1g／L时对两种浓度的AST干扰均大于5％。而甘油三酯在10mmoL／L以下对两种浓度的AST的干扰仍然小于5％。用参考方法测定c．f．a．s多项校准液AST结果128．5U／L,比靶值高0．5U／L。本室参考范围AST：男性10—40U／L;女性7—40U／L。健康男女AST有显著差别（P〈0．05）。用制备的酶校准品校准的常规方法和参考方法进行比较,相关良好（r^w=0．9992）。前者结果与后者相对偏倚在±10％之内。结论我室的参考方法基本建立,采用参考方法为酶校准品定值,可以提高血清AST测定结果的准确性和可比性。     

四种分析技术检测血清单克隆免疫球蛋白的比较

单克隆免疫球蛋白( monoclonal immunoglobulin)即M蛋白,是由单克隆浆细胞分泌的异常免疫球蛋白,常在浆细胞病如多发性骨髓瘤、Waldenstr(o)n巨球蛋白血症和原发性淀粉样变性等患者血中出现.目前,免疫固定电泳被认为是分析和鉴定M蛋白的最灵敏的方法.高效毛细管电泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE)是20世纪80年代迅速发展起来的一种新技术,与传统的凝胶电泳相比,其分辨率高,结果重现性好,分析快速.     

丙氨酸氨基转移酶37℃参考方法评价临床常用方法探讨

目的通过建立37℃丙氨酸氨基转移酶(ALT)参考方法,评价干化学和湿化学五种检测组合的临床常用方法 ,探讨ALT测定结果的准确性与可比性。方法依据国际临床化学与检验医学联合会(IFCC)推荐的参考测量程序建立ALT参考方法,测定ERMR○-AD 454 ALT参考品,验证参考方法的准确性。并对其精密度进行评估。同时用参考方法为冰冻新鲜血清定值,校准非配套湿化学常用方法。干化学采用Vitros配套系统。按照NCCLS EP9-A方案分别比较40份人血清干湿化学五种检测组合的常用方法和参考方法ALT结果。结果用参考方法测定ERMR○-AD 454ALT参考品结果186.4 U/L,在其给定的186±4 U/L范围内。建立的37℃ALT参考方法总CV0.89%-1.12%。Vit-ros干化学配套系统;Olympus仪器和Roche试剂及校准品组成的湿化学非配套系统;Olympus仪器和Roche试剂及参考方法定值的冰冻血清作校准品组成的湿化学非配套系统;Olympus湿化学配套系统以及Olympus仪器试剂和Roche校准品组成的湿化学非配套系统ALT 5种检测结果和参考方法进行比较,相关均良好(r2分别为0.994,0.998 6,1,0.997,0.99。)。前3种检测系统ALT检测结果与参考方法相对偏倚均在±20%之内,符合CLIA’88的20%的判定标准。后两种检测系统结果与参考方法相对偏倚在ALT低水平高达60%。结论通过ALT参考方法可以评价加入磷酸吡哆醛的临床常用方法,提高血清ALT测定结果的准确性和可比性。不适合评价不加磷酸吡哆醛的临床常用方法。     

胶乳增强免疫比浊法测定血清胱抑素C方法学评价及临床意义

目的应用美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）的标准化评价方案对胶乳增强免疫比浊法测定血清胱抑素C（Cystatin C,CySC）进行初步评价。并探讨血清CysC在肾小球滤过功能中的应用价值。方法测定92例表观健康人、41例肾脏疾病患者血清CysC浓度。分析胶乳增强免疫比浊法测定血清CysC的精密度、准确性、线性范围和干扰因素。结果胶乳增强免疫比浊法测定血清CysC批内变异系数为1．52％（低值）、1．25％（高值）;日间变异系数为2．73％（低值）、1．77％（高值）;总变异系数为3．27％（低值）、2．06％（高值）。平均回收率为97．3％。检测线性范围为0．1～6．00mg／L,线性范围内偏差〈5％。总胆红素（正干扰）在573μmol／L、血红蛋白（负干扰）6g／L、甘油三酯（负干扰）12mmol／L以下对CysC偏差〈5％。基本不受溶血、黄疸和脂血干扰。肾脏疾病患者血清CysC与肌酐清除率（Ccr）相关系数r=-0．9031,肌酐（Or）与Ccr的相关系数r=-0．8433,在评价肾小球滤过功能方面。CysC优于Cr。结论胶乳增强免疫比浊法测定血清CvsC快速、准确、精密度高,可用于肾小球滤过功能的评价。     

M蛋白对免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测免疫球蛋白的干扰

目的探讨单克隆免疫球蛋白(M蛋白)对免疫透射比浊法和免疫散射比浊法定量检测免疫球蛋白的干扰作用。方法收集54例含不同浓度和类型M蛋白的患者血清样本(IgG型M蛋白20例、IgA型M蛋白16例、IgM型M蛋白18例)和25名体检健康者(正常对照组)的血清样本,分别采用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法定量检测IgG、IgA、IgM。通过干扰实验及回收实验评估某种类型M蛋白对同一样本中其他类型免疫球蛋白检测的干扰作用。结果免疫散射比浊法检测IgG、IgA和IgM的结果高于免疫透射比浊法(P0.05)。免疫散射比浊法和免疫透射比浊法检测正常对照组血清IgG和IgM浓度的相对偏差分别为4.86%、-1.00%,均低于允许总误差(TEa),而检测IgA浓度的相对偏差(15.42%)高于TEa。2种方法检测IgG型、IgM型M蛋白患者血清IgG、IgM浓度的相对偏差分别为14.38%、4.06%,均高于正常对照组(P0.05),而检测IgA型M蛋白患者血清IgA浓度的相对偏差(11.95%)低于正常对照组(P0.05)。IgG型M蛋白血清样本中IgG≥35.13 g/L时,免疫透射比浊法检测IgA的回收结果差异(Diff%)接近或超过其TEa;而IgG浓度达到43.64 g/L时,免疫透射比浊法检测IgM的Diff%仍低于其TEa;相同浓度的IgG型M蛋白对免疫散射比浊法检测IgA和IgM则无明显干扰作用。IgA和IgM型M蛋白均会干扰免疫透射比浊法检测IgG,并使Diff%超过其TEa;而相对较高水平的IgA和IgM型M蛋白会干扰免疫散射比浊法检测IgG。无论免疫透射比浊法还是免疫散射比浊法,IgA型M蛋白对IgM的检测或IgM型M蛋白对IgA的检测均有干扰作用,并使其Diff%超过相应的TEa。结论 IgG型、IgA型和IgM型M蛋白对免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测其他2种免疫球蛋白均有干扰作用,且呈浓度依赖性。免疫散射比浊法抗M蛋白干扰的能力可能优于免疫透射比浊法。