偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的比较蛋白质组学分析

目的筛选与偏头痛肝阳上亢型相关的蛋白质，进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的分子机制。方法用电刺激SD大鼠三叉神经节，并灌服附子汤的方法制造偏头痛肝阳上亢型模型。采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离偏头痛肝阳上亢型大鼠脾脏淋巴细胞的总蛋白，PDQuest7．0图像分析软件识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图，搜索数据库鉴定蛋白质。结果鉴定到的10个差异蛋白分别为：氯通道蛋白-1、硫氧还蛋白过氧化物酶-I、硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ、专利蛋白W0979348序列、Rho GDP解离抑制因子α、肌动蛋白2／3复合物、神经微丝轻肽、蛋白酶体、热休克蛋白-27、膜联蛋白-A1。结论这些蛋白可能与偏头痛肝阳上亢证的形成有关，本实验为进一步揭示偏头痛肝阳上亢证的发病机制提供了新的线索。     

动脉粥样硬化性血栓性脑梗死患者肝阳化风证证候积分的相关性研究

目的探讨动脉粥样硬化性血栓性脑梗死肝阳化风证证候积分与神经功能缺损积分及日常生活能力积分的关系。方法证候积分采用本所研究制订的证候分级计分表；临床神经功能缺损程度评分标准按改良爱丁堡与斯堪的那维亚研究组标准；日常生活能力采用Barthel指数（BI）计分法。三者积分采用相关分析。结果证候积分与神经功能缺损积分呈正相关，而与日常生活能力积分呈负相关（r=0．89，-0．81，P〈0．01）。结论证候积分可以作为脑梗死肝阳化风证的中医临床辨证标准。     

平肝潜阳法对偏头痛肝阳上亢型大鼠模型肾上腺组织蛋白质组的影响

目的探讨平肝潜阳法对偏头痛肝阳上亢型大鼠模型作用的分子机制。方法用电刺激SD大鼠三叉神经节的方法并灌服附子汤制造偏头痛肝阳上亢型模型。采用双向凝胶电泳（2-DE）技术分离大鼠肾上腺组织的总蛋白，图像分析识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）获得相应的肽质量指纹图（PMF），搜索数据库鉴定蛋白质。结果得到分辨率及重复性较好的正常对照组、偏头痛肝阳上亢型大鼠、中药治疗组大鼠肾上腺组织的2-DE图谱，质谱分析鉴定得到其中的8个差异蛋白质点。结论平肝潜阳药物可能通过调节多种与能量代谢有关的蛋白和泛素的表达而起到治疗偏头痛肝阳上亢证的作用。     

平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺差异蛋白质组学分析

目的：观察平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺蛋白质表达的影响，为进一步探讨平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证作用机理提供依据。方法：左旋甲状腺素（L-T4）腹腔注射和附子汤灌胃造成甲亢肝阳上亢证模型，应用蛋白质组学技术比较正常组、甲亢肝阳上亢证组及平肝潜阳药物治疗组中肾上腺的差异蛋白质。结果：3组蛋白质斑点总体分布相似，主要分布在等电点pI5～8．5，分子量M8．5～135．5kD。与正常组比较，甲亢肝阳上亢证模型组中蛋白质点表达上调的有4个，下调的点有9个；在模型组中上调的4个点在治疗后均较治疗前有下降；而模型组中下调的9个点在治疗后均较治疗前有上调。结合生物信息学进行质谱鉴定，发现其中10个蛋白质分别为神经介素B受体，NG-二甲基精氨酸二甲氨基水解酶，核苷二磷酸激酶，胶原蛋白（Ⅱ）α1链，泛素，硫氧还蛋白依赖性过氧化物还原酶，苹果酸脱氢酶，硫氧还蛋白过氧化物酶，热休克蛋白-27，膜联蛋白-A1。结论：平肝潜阳药物治疗后的甲亢肝阳上亢证大鼠肾上腺蛋白质的表达上具有差异，平肝潜阳药物的作用机制可能与所鉴定的这10个蛋白质的抗氧化、调节交感-肾上腺髓质功能及影响能量代谢相关酶等作用有关。     

脑梗死肝阳化风证临床辨证标准与神经功能缺损评分、实验诊断指标间的相关性分析

目的探讨脑梗死肝阳化风证的临床辨证标准与神经功能缺损程度、辅助实验诊断指标之间的关联性。方法收集60例临床上辨证为肝阳化风证的脑梗死患者的证候积分、临床神经功能缺损程度评分及实验诊断指标[血浆皮质醇（F）、血栓素B2（TXB2）、去甲肾上腺素（NE）及血清三碘甲状腺原氨酸（T3）]的数据,用统计学方法分析三者之间的关联性。结果证候积分与神经功能缺损程度评分和血浆F、NE、TXB2呈正相关,与血清T3呈负相关,经检验,有统计学意义。结论神经功能缺损评分和实验诊断指标能显著提高临床辨证标准的客观性,建立证候积分、神经功能缺损评分和4项实验诊断指标的综合辨证标准有临床使用价值。     

平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞 蛋白质表达的影响

目的：探讨平肝潜阳方对偏头痛肝阳上亢证大鼠作用的分子机制。方法：用电刺激SD大鼠三叉神经节的方法并灌服附子汤复制偏头痛肝阳上亢证模型, 采用平肝潜阳方中药进行干预。运用双向凝胶电泳技术分离偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞的总蛋白,图像分析识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图,搜索数据库鉴定蛋白质。结果：平肝潜阳方能够明显改善偏头痛大鼠的头痛等症状,得到分辨率及重复性较好的正常大鼠、偏头痛肝阳上亢证大鼠、中药治疗大鼠血淋巴细胞的双向凝胶电泳图谱;共得到13肽质量指纹图谱,2个无质谱结果,搜索到具有统计学意义的蛋白质11个,包括乙醇脱氢酶3,糖原磷酸化酶,ATP合酶D链,膜联蛋白-3,泛素,中性粒细胞防御素4前体,黑素瘤相关性E2抗原,热休克蛋白-27,膜联蛋白-A1,硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ,谷胱甘肽合成转移酶片断。结论：平肝潜阳方治疗后的偏头痛肝阳上亢证大鼠血淋巴细胞蛋白质的表达与治疗前比较有差异,所鉴定的11个蛋白质可能与平肝潜阳方的作用机制有关。     

平肝潜阳药物对偏头痛肝阳上亢证患者的临床疗效及其对血淋巴细胞蛋白质表达的影响

目的：观察平肝潜阳药物对偏头痛肝阳上亢证患者的临床疗效和对血淋巴细胞蛋白质表达的影响,为深入研究偏头痛肝阳上亢证病理生理机制及平肝潜阳法治疗作用的分子机制奠定基础。 方法：32例偏头痛肝阳上亢证患者随机分为治疗组和对照组。治疗组口服平肝潜阳方,对照组口服氟桂利嗪片剂。治疗2个疗程。观察患者治疗前后的中医症状积分、止痛疗效和不良反应;采用双向凝胶电泳、基质辅助激光解吸电离一飞行时间质谱法分离和鉴定偏头痛患者外周血淋巴细胞和正常人之间差异蛋白表达,并观察应用平肝潜阳方干预后,各组差异蛋白质表达水平的变化。结果：平肝潜阳方有明显止痛效果（87．5％）,与氟桂利嗪片（75．0％）比较,差异有统计-9意义（P〈0．01）;以改善眩晕、烦躁易怒和面部烘热症状更为明显（P〈0．05）。两组中医症状积分均降低（P〈0．01）,其中以治疗组更为明显（P〈0．01）,治疗组未出现明显不良反应。正常人、平肝潜阳方治疗组偏头痛肝阳上亢证患者治疗前和治疗后血淋巴细胞凝胶蛋白质点数依次为534±42、552±54和529±55。平肝潜阳方治疗组偏头痛肝阳上亢证患者与正常人比较有6个蛋白质表达下调,14个蛋白质表达上调;平肝潜阳方治疗组偏头痛肝阳上亢证患者治疗前后比较发现表达下调的6个蛋白质中有4个表达增强,而表达上调的14个蛋白质中有11个表达降低。共得到12个肽质量指纹图谱,2个无质谱结果,搜索到10个具有统计-9意义的蛋白质,主要有通道蛋白、抗氧化蛋白、细胞信号转导蛋白、代谢相关蛋白和免疫相关蛋白等。 结论：平肝潜阳中药复方有良好的止痛作用,能改善中医症状;可能通过调节部分血淋巴细胞蛋白质的表达治疗偏头痛肝阳上亢正。     

平肝潜阳方药对高血压肝阳上亢证大鼠下丘脑组织中Tpx Ⅱ,HSP27及ANXAⅠ表达的影响

目的:观察自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rats,SHR)肝阳上亢证模型下丘脑组织中硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(thioredoxin peroxidase Ⅱ,Tpx Ⅱ)、热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)、膜联蛋白A1 (annexin A1,ANXA1)基因在平肝潜阳方药干预下的表达变化,探讨三者在平肝潜阳方药干预的作用.方法:SHR随机分为:模型组、对照组和治疗组(n=10).除正常组SD大鼠(n=10)外,其他组大鼠均灌服附子汤复制高血压肝阳上亢证模型.其中对照组和治疗组分别于复制模型成功后给予依那普利和平肝潜阳方药干预4周.观察大鼠的行为学和血压变化,采用RT-PCR和Western印迹检测各组大鼠下丘脑组织中Tpx Ⅱ,HSP27,ANXA1基因和蛋白质表达的变化.结果:与正常组比较,高血压肝阳上亢证模型大鼠血压、心率和易激惹程度明显升高,而旋转耐受时间降低(p＜0.01);平肝潜阳方药和依那普利能够逆转这种改变.Tpx Ⅱ和ANXA1基因和蛋白在模型组中的表达较正常组明显升高(p＜0.01),而HSP27基因和蛋白在模型组中的表达较正常组明显降低(P＜0.01); Tpx Ⅱ和ANXA1在对照组及治疗组中的表达较模型组有明显降低(P＜0.05或P＜0.01),而HSP27在对照组及治疗组中的表达较模型组有明显升高(P＜0.05或P＜0.01);对照组与治疗组比较,Tpx Ⅱ和ANXA1蛋白表达明显差异(P＜0.05或P＜0.01).结论:平肝潜阳方药不仅能够明显降低血压,而且能够改善大鼠的宏观表征,其作用可能与调节下丘脑组织中Tpx Ⅱ,ANXA1及HSP27基因表达有关.     

人工神经网络在中医药现代化研究中的应用

文章综述了人工神经网络在中医药现代化研究中的应用,包括其在中医证候研究、中药功效研究及复方研究、中医舌诊研究和中医脉象研究四个方面的应用。     

平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响

目的:观察平肝潜阳药物对甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质表达的影响,为进一步探讨平肝潜阳药物治疗甲亢肝阳上亢证作用机制提供依据.方法:左旋甲状腺素(L-T4)腹腔注射和附子汤灌胃以建立甲亢肝阳上亢证模型,应用蛋白质组学技术比较正常组、甲亢肝阳上亢证组及平肝潜阳药物治疗组中下丘脑的差异蛋白质.结果:3组蛋白质斑点总体分布相似,主要分布在等电点pI 3～10,分子质量为13.8～98.8 kD.与正常组比较,甲亢肝阳上亢证模型组中蛋白质点表达上调的有6个点,下调的有10个点;在模型组中上调的6个点在治疗后均较治疗前有下降;而模型组中下调的10个点在治疗后均较治疗前有上调.结合生物信息学进行质谱鉴定,发现其中9个蛋白质分别为prohibitin,硫氧还蛋白过氧化物酶6,组氨酸三聚体核苷结合蛋白1,蛋白酪氨酸磷酸酶,假定蛋白,肌动蛋白抑制蛋白2,硫氧还蛋白过氧化物酶-Ⅱ,热休克蛋白-27,膜联蛋白-A1.结论:平肝潜阳药物治疗后的甲亢肝阳上亢证大鼠下丘脑蛋白质的表达具有差异,所鉴定的这9个蛋白质可能与平肝潜阳药物的作用机制有关.