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纳米粒子载体携带反义转化生长因子-β1基因的局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响 总被引:1,自引:1,他引:1
目的探讨纳米粒子携带反义转化生长因子(TGF-)β1局部定位转染对大鼠自体移植静脉内膜增生的影响。方法45只大鼠制成自体静脉移植模型后,分成纳米粒子DNA组、纳米粒子空载体组和生理盐水对照组,进行局部定位转染,2周后观察移植静脉内膜的变化,应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、Westernblot以及免疫组织化学等方法检测反义基因对内源性TG-Fβ1表达的影响。结果基因转染后两周,内膜厚度为(20.5±4.7)μm,明显小于两个对照组(P<0.01)。RTPCR和Westernblot结果表明,基因转染组的TGF-β1mRNA和蛋白的表达明显低于空载体组及生理盐水对照组。结论纳米粒子可有效地作为基因的转移载体;纳米粒子携带反义TGF-β1可以减少内源性TGF-β1基因的表达,抑制细胞外基质(ECM)的合成,从而达到抑制内膜增生的目的。 相似文献
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为探讨构建能表达肝细胞生长因子基因的腺病毒重组体的方法,以及这种腺病毒重组体能否在血管平滑肌细胞表达。将含有肝细胞生长因子基因片段的质粒用限制内切酶酶切,以琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因片段:将它用DNA连接酶插入至腺病毒穿梭质粒中,并用限制内切酶鉴别插入方向,得到插入方向正确的重组腺病毒穿梭质粒。用限制内切酶酶切重组腺病毒穿梭质粒和表达载体,使它们线性化;以电转化方法使它们共转化至BJ5183细胞中进行同源重组,构成肝细胞生长因子基因腺病毒重组体。以脂质体为转染介质,将肝细胞生长因子基因腺病毒重组体转染到人胚肾细胞中进行包装,使病毒复性具有感染能力。用包装后的肝细胞生长因子基因腺病毒重组体感染体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞;经逆转录一聚合酶链反应和蛋白印迹检测发现肝细胞生长因子呈现过表达。此外,酶切及测序发现重组腺病毒穿梭质粒和肝细胞生长因子基因腺病毒重组体是正确的;绿色荧光蛋白标记对重组体在人胚肾细胞中的包装及包装后感染大鼠主动脉平滑肌细胞进行了荧光示踪。结果提示,肝细胞生长因子基因腺病毒重组体构建成功,为血管疾病转基因治疗奠定了基础,具有一定临床价值, 相似文献
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反义ICAM-1寡脱氧核苷酸抑制大鼠腹主动脉瘤形成的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
我们建立大鼠腹主动脉瘤 (AAA)模型 ,通过局部缓释反义寡脱氧核苷酸的方法封闭胞间粘附分子 (ICAM ) 1基因表达 ,观察动脉瘤形成过程的改变 ,以进一步研究AAA的发病机制及防治措施。材料与方法1.实验动物分组及AAA模型建立 :Wistar大鼠 6 4只 ,体重 2 5 0~ 30 0 g ,随机分组 :(1)对照组 2 4只 ,分为正常动脉组、术后 3d、7d、14d组 ;(2 )Lipofectin组 6只 ;(3)寡脱氧核苷酸 (ODNs)组 36只 ,分为反义组、正义组和错配组 ,再分为5 0 μg和 2 0 0 μg组。按文献 [1]制成AAA模型。寡核苷酸组以Lipofectin(GIBCO BRL)作为携带系统 … 相似文献
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目的:探讨人类胰腺癌组织中桩蛋白的表达情况及临床病理学意义。方法:应用免疫组化法分别检测47例胰腺癌组织及47例正常胰腺组织中桩蛋白的表达情况,观察其与患者临床病理参数的关系,采用χ2及Fisher's exact检验统计学方法分析实验结果。结果:免疫组化检测结果显示,胰腺癌组织中桩蛋白的表达阳性率为76.60%(36/47),明显高于正常胰腺组织29.79%(14/47),两者差异有统计学意义(P<0.05)。桩蛋白的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤位置无明显相关性(P>0.05),而与肿瘤TNM分期(P<0.05)、肿瘤浸润范围(P<0.05)、区域淋巴结转移(P<0.05)相关,差异具有统计学意义。结论:桩蛋白与胰腺癌关系密切,进一步从基因水平的研究有助于寻找胰腺癌更佳的诊断和治疗方法。 相似文献
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目的:探讨趋化因子CXCL12在甲状腺乳头状癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法:采用SP免疫组织化学法检测79例甲状腺乳头状癌、癌旁组织及33例良性甲状腺疾病组织标本中CXCL12的表达。结果:在癌旁甲状腺组织中,CXCL12表达阴性。在癌组织中,CXCL12高水平阳性表达于癌细胞胞浆,阳性表达率为69.6%。在良性甲状腺疾病中CXCL12阳性表达率为12.1%。癌组织与癌旁组织、良性甲状腺疾病组织中表达差异显著(P〈0.05)。CXCL12表达与甲状腺乳头状癌淋巴结转移呈正相关(P〈0.05)。结论:CXCL12可能在甲状腺乳头状癌淋巴结转移中起到一定作用。 相似文献
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目的研究趋化因子受体CXCR7在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达,并探讨其表达与PTC临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测79例PTC及其癌旁2 cm甲状腺正常组织以及33例良性甲状腺疾病组织中CXCR7的表达。结果在PTC癌组织中,CXCR7表达阳性率为65.8%(52/79),在甲状腺癌旁正常组织中CXCR7表达阳性率为0(0/79),在良性甲状腺疾病中CXCR7表达阳性率为30.3%(10/33)。PTC癌组织中CXCR7表达阳性率明显高于良性甲状腺疾病组织(P<0.05)及其癌旁甲状腺正常组织(P<0.05)。CXCR7阳性表达与PTC淋巴结转移有关(P<0.05)。结论 CXCR7可能参与了PTC的发生、发展及淋巴结转移。 相似文献
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精氨酸对大肠癌病人肿瘤细胞增殖活性的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:研究精氨酸(arginine,Arg)对大肠癌病人的肿瘤细胞增殖活性的影响。方法:大肠癌病人44例、随机分为实验组、对照组。实验组每日静脉输注Arg25g、连续3d。免疫组化方法(S-P法)观察肿瘤增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的变化、流式细胞仪检测肿瘤细胞周期各时相百分比。结果:实验组PCNA表达显著下降,由55.3%降至43.9%(P<0.01),S期%及(S+G2+M)期%亦显著降低,而对照组各指标均有显著变化(P>0.05)。结论:短期应用药理剂量的Arg可以抑制大肠肿瘤细胞增殖活性,提示Arg在大肠肿瘤的综合治疗中有较大的应用潜力。 相似文献
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