5-脂氧合酶在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达

目的 探讨5-脂氧合酶(5-LO)在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中的表达。方法 分离大鼠腹腔巨噬细胞培养一定时间，用高效液相色谱、Western blot和RT—PCR分别观察5-LO催化的代谢产物的生物合成、5-LO和5-脂氧合酶激活蛋白(FLAP)表达的变化，并用毛细管电泳定量分析RT—PCR产物。结果 体外培养24h对5-LO以及FLAP的表达没有明显影响，5-LO酶活性没有明显的变化；培养到第72小时，5-LO mRNA和蛋白表达没有明显的影响，但FLAP几乎检测不到，mRNA的量明显降低，检测不到白三烯B4(LTB4)和5-羟二十碳四烯酸(5-HETE)。进一步培养到第120小时，5-LO的mRNA和蛋白表达明显下降，FLAP的mRNA和蛋白检测不到。毛细管电泳定量分析结果显示，培养1、24和72h，5-LO的相对表达量没有明显变化，培养到120h则下降了约80％。结论 5-LO可以在体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞中稳定表达72h。     

PTEN抑癌基因在乳腺癌中的研究进展

乳腺癌是我国女性常见的一种恶性肿瘤，迄今其发生发展的分子机制还不完全清楚。PTEN基因是1997年发现并被克隆的第一个具有磷酸酶活性的抑癌基因，大量的研究表明，乳腺癌的发生常伴有PTEN蛋白的表达缺失或减弱，提示该基因的突变失活与乳腺癌的发生、发展及预后密切相关。本文就抑癌基因PTEN与乳腺癌的关系研究进展加以综述。     

慢性肾炎与原发性肾综患者血管紧张素转化酶基因多态性的检测及其意义

目的　研究血管紧张素转化酶 (ACE)基因多态性在慢性肾炎 (CGN)及原发性肾病综合征 (PNS)患者的分布与临床表现的关系。方法　提取外周血DNA ,然后PCR扩增基因片段 ,检测 86例慢性肾炎慢性肾功能不全 (尿毒症期 )患者 (CNG组 )、5 6例PNS患者 (PNS组 )及 5 0例健康献血员 (对照组 )的ACE基因多态性。结果　CGN组插入纯合子(II)基因型较对照组比例高 ,女性患者缺失杂合子 (DI)发生率上升 ,缺失纯合子 (DD)发生率下降。高血压发生率由大到小依次是DD型 >DI型 >II型 ,而血中ACE浓度也是DD型 >DI型 >II型 ,提示缺失 (D)基因产物ACE浓度与高血压呈正相关关系。PNS组DD型发生率较CGN组及对照组高 ,其中PNS组与CGN组对比差异有显著性 (P <0 0 1)。结论　CGN及PNS患者的临床表现与ACE基因多态性有关     

香菇多糖对巨噬细胞一氧化氮和一氧化氮合酶活性的影响

目的研究香菇多糖(LTN)诱导巨噬细胞的一氧化氮(NO)生成和一氧化氮合酶(iNOS)的活性,探讨LTN的免疫调节作用机理.方法采用Griess反应和荧光法测定不同剂量的LTN作用小鼠腹腔巨噬细胞后NO的生成量和iNOS活性.观察mRNA转录抑制剂、蛋白质合成抑制剂和iNOS抑制剂对巨噬细胞NO的生成和iNOS活性的影响.结果LTN能使小鼠腹腔巨噬细胞NO生成增加,iNOS活性增高,并呈作用剂量依赖关系.3种抑制剂均能抑制LTN诱导的小鼠腹腔巨噬细胞N0的生成和iNOS活性.结论LTN能刺激小鼠腹腔巨噬细胞提高iNOS活性和NO的生成.提示LTN的免疫调节作用机制可能与LTN刺激巨噬细胞NO生成有关.     

枇杷叶三萜酸对慢性支气管炎大鼠气道上皮细胞NF-κB和ICAM-1表达的影响

目的 研究原花青素对大鼠佐剂性关节炎的治疗作用并探讨其作用机理。方法 60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、地塞米松治疗组（2mg／kg）、原花青素小剂量组（1．2mg／kg）、原花青素中剂量组（6mg／kg）、原花青素大剂量组（30mg／kg），每组10只．用完全弗氏佐剂制造大鼠佐剂性关节炎（AA）模型，大鼠于致炎后第8天给药，观察各组对AA大鼠足肿胀及体重的影响。第24天处死大鼠，剪下致炎足的对侧足爪，剪碎后浸泡于生理盐水2小时，EIA法测浸泡液中PGE2的含量。同时分离大鼠腹腔巨噬细胞，     

3种国产牛奶中脂肪酸营养价值分析

目的测定不同种类牛奶中脂肪酸的含量。探讨牛奶脂肪酸的营养价值。方法以3种市售国产牛奶为研究对象，采用毛细管气相色谱-质谱法进行牛奶脂肪酸的分离测定。结果3种国产牛奶含有13～16种脂肪酸，酸牛奶总脂肪酸的含量最低。不同类型脂肪酸的比例不均衡。其中饱和脂肪酸的含量最高，约占70％；多不饱和脂肪酸的含量最低，仅为3％～7％。除低脂牛奶外。全脂牛奶和酸牛奶的ω-6／ω-3脂肪酸比率基本接近推荐值。结论与全脂牛奶和低脂牛奶相比。酸牛奶更适宜高血脂患者或心脑血管病高危人群的饮用。3种国产牛奶中的饱和脂肪酸（SFA）：单不饱和脂肪酸（MUFA）：多不饱和脂肪酸（PUFA）均不符合世界卫生组织推荐的1：1：1。有必要优化牛奶脂肪酸的组分以满足人体的营养需求。     

绿茶提取物EGCG对肺癌细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

绿茶的水溶性提取物含有多种多酚类化合物,其中表没食子儿茶素没食子酸酯[（-）-epigallocatechin-3-gallate,EGCG]的含量最高,也最具有药用功效。已发现EGCG可抑制人肺癌血管生成,但其抑制肺癌血管生成的机制还不完全清楚。低氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growthfactor,VEGF）是促血管生成的关键因子。本文的目的拟探讨在非小细胞肺癌细胞A549中,EGCG是否通过影响HIF-1α和VEGF表达来抑制肺癌血管生成。方法：将已在无血清培养液中饥饿24h的A549细胞用不同浓度的EGCG[0（对照）、10、25、50、100μmol／L）预处理1h后,再加终浓度为40ng／mL的胰岛素样生长因子（insulin—like growthfactor-1,IGF-1）在37℃继续孵育16h。将各组细胞和条件培养液收集后,采用Westernblot分析各组细胞中HIF-1α蛋白的表达、ELISA检测各条件培养液中VEGF的蛋白分泌、实时PCR测定各组细胞HIF-1α和VEGFmRNA的表达水平。     

高效毛细管电泳法检测尿液中痕量纤维蛋白肽A、B

目的 建立高效毛细管电泳测定尿液中反应体内微血栓形成的特异分子标志物纤维蛋白肽A(FPA)和纤维蛋白肽B(FPB)的方法.方法 采用25 cm×50 μm涂层毛细管柱,0.1 mol/L pH2.5的磷酸缓冲液,27.58 kPa压力进样,190nm紫外检测.用比FPB多一个酪氨酸的合成肽(FPB-Tyr)作内标,加内标后的尿样用Sep-Pak C18柱预处理.结果 采用本法,尿样中的FPA、FPB和内标可在16min内得到很好的分离,三者的迁移时间分别为:7.28、14.31、15.22min;将内标和一系列浓度的FPA、FPB标准品加入空白尿样,用Sep-Pak C18柱预处理后,毛细管电泳进样分析,在FPA和FPB浓度为0-40 mg/L的范围内,用FPA(FPB)同内标的校正峰面积比值对添加的相应的FPA(FPB)浓度得到校正工作曲线,线性关系良好,R均>0.99.未预处理的尿样中FPA、FPB的最低检出浓度分别为30μg/L、40μg/L(信噪比为3:1);本法FPA和FPB测定的日内、日间精密度好,平均回收率高.结论 本方法可靠,特异性好,可为开展纤维蛋白肽类及其它的痕量肽类分析提供参考.     

DNA拓扑异构酶Ⅰ抑制剂诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的实验研究

拟从细胞凋亡角度出发，探讨能够诱导鼻咽癌上皮细胞凋亡的因素，为有效地防治该恶性肿瘤提供新的思路。方法：光镜下观察细胞的形态变化；流式细胞仪检测细胞周期变化及亚二倍体比例；ＤＮＡ凝胶电泳及二苯胺法测定ＤＮＡ片段化程度。结果：一定浓度的拓朴异构酶Ⅰ（Ｔｏｐｏｉｓｏ－ｍｅｒａｓｅⅠ，ＴＯＰＯⅠ）抑制剂喜树碱（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ，ＣＰＴ）体外作用于人低分化鼻咽癌上皮细胞系ＣＮＥ－２Ｚ细胞一定时间后，镜下可见细胞体积缩小，染色质凝聚，胞膜突起及凋亡小体形成等形态变化。２～１０μｍｏｌ／Ｌ的ＣＰＴ分别作用１２小时后作流式细胞仪检测，亚二倍体比例均为３０％左右；各浓度分别作用２４小时，亚二倍体比例均为５０％左右；同时细胞周期有明显的变化，主要表现为Ｇ２／Ｍ期细胞减少。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳呈典型的梯形带。结论：拓朴异构酶Ⅰ抑制剂ＣＰＴ对人低分化鼻咽癌上皮细胞具有明显的凋亡诱导作用。     

Bcl-xL反义寡核苷酸对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物敏感性的影响

目的观察Bcl-xL反义寡核苷酸(ASODN)对裸鼠人鼻咽癌移植瘤化疗药物顺铂敏感性的影响.方法建立裸鼠人鼻咽癌移植瘤模型,分为对照组、ASODN治疗组、顺铂(DDP)治疗组、ASODN DDP联合治疗组,观察裸鼠瘤体变化及组织形态学改变.结果单独应用ASODN和DDP治疗组的抑瘤率分别为14.2%和30.9%,而在相同条件下,联合用药组效果最明显,抑瘤率为52.2%,较ASODN、DDP单独应用差异有显著性.结论 ASODN与DDP联合化疗有协同作用,ASODN可以提高肿瘤细胞对顺铂的敏感性,具有增效作用.