厚朴酚葡萄糖苷对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响

目的:探索联苯型新木脂素类化合物厚朴酚葡萄糖苷（magnolol-2-O-β-D-glucopyranoside,Mag-glu）对人乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,并对其可能机制进行研究。方法:MTT法检测化合物对MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的影响;细胞划痕实验和Transwell小室法检测化合物对人乳腺癌细胞运动、侵袭和迁移能力的影响;Western blotting法检测化合物对缺氧诱导因子1α（HIF-1α）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和环氧化酶2（COX-2）蛋白表达的影响。结果:Mag-glu具有抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的作用,且呈现浓度和时间依赖性。划痕实验结果表明,经过不同浓度的Mag-glu处理MDA-MB-231细胞24 h后,细胞水平运动运动能力明显下降（P<0.01）。Transwell结果显示,经过不同浓度的Mag-glu处理细胞24 h和48 h后,细胞迁移和侵袭能力显著下降。Western blotting结果显示,随着Mag-glu浓度的增加,HIF-1α、MMP-9、COX-2的表达均下调。结论:Mag-glu在体外能够抑制人乳腺癌细胞的增殖、侵袭和迁移,其机制可能是抑制了HIF-1α信号途径,导致其下游顾客蛋白COX-2和MMP-9的表达下调有关。     

三氯乙酰亚胺酯法合成紫草素-1'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

目的:采用三氯乙酰亚胺酯法合成紫草素-1'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷.方法:以β-D-吡喃葡萄糖为起始原料制得糖基供体2,3,4,6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖酰基2,2,2-三氯乙酰亚胺酯,然后与紫草素反应得1-(1-(5,8-二羟基-1,4-萘醌-2-基)-4-甲基-3-戊烯氧基)-2,3,4,6-四-O-...     

刺五加注射液对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的：：观察刺五加注射液对小鼠酒精性肝损伤的保护作用。方法：昆明种雄性小鼠60只(18~22 g),随机分为正常组、模型组、硫普罗宁阳性药对照组和刺五加高、中、低剂量组(200 mg/kg、100 mg/kg、50 mg/kg ),每组各10只。采用50%乙醇12 ml·kg-1·d-1连续灌胃10 d,制备小鼠酒精性肝损伤模型。测定血清中天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶及三酰甘油( TG)水平;肝组织丙二醛、还原型谷胱甘肽含量,计算肝脏指数,并观察肝脏病理变化。结果：小鼠酒精性肝损伤模型构建成功。除刺五加低剂量组TG水平与模型组差异无统计学意义(P>0.05)外,与模型组比较,刺五加注射液均能够降低血清中天门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶和TG水平(P<0.05~P<0.01);抑制小鼠肝脏组织丙二醛含量的升高,提高肝脏中还原型谷胱甘肽含量(P<0.05~P<0.01);减轻肝脏病理组织损伤;刺五加高、中剂量组均能降低小鼠肝脏指数(P<0.05和P<0.01)。结论：刺五加注射液对小鼠酒精性肝损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制氧化应激有关。     

酶法糖基化合成一种新型补骨脂定葡萄糖苷

目的为提高补骨脂定的水溶性和稳定性,用体外酶法糖基化反应对其进行结构修饰。方法通过UDP-糖基转移酶对补 骨脂定进行糖基化修饰,合成一种新的葡萄糖苷化合物（1）。使用高分辨电喷雾电离质谱（HR-ESI-MS）和核磁共振（NMR）分 析,鉴定化合物1的结构;利用高效液相色谱峰面积计算出样品溶液的浓度;MTT法检测化合物对3种肿瘤细胞（SMMC7721、 MCF-7、SW480）增殖的影响。结果根据波谱分析,鉴定制备出的新型葡萄糖苷化合物为psoralidin-6’,7-di-O- β-D-glucopyranoside（1）。水溶性检测结果表明,化合物1的水溶性是底物（补骨脂定）水溶性的32.6倍。此外,化合物1在pH 8.8和高温条件下较补骨脂定更加稳定。在抗肿瘤细胞增殖实验中,只有补骨脂定对3种肿瘤细胞都显示出较强的抑制能力。 结论体外酶法糖基化是进行结构修饰、改善水溶性和稳定性的强有力方法。     

补骨脂抗氧化及抗肿瘤活性成分的研究

目的：研究补骨脂成分的抗氧化和抗肿瘤活性。方法：运用多种柱色谱等现代分离手段对补骨脂甲醇浸膏进行分离,利用磁共振技术和电喷雾电离质谱鉴定化合物的结构,并评价化合物的抗氧化和抗肿瘤活性。结果：分离出11个化合物,鉴定为：①补骨脂素,②异补骨脂素,③补骨脂定,④补骨脂苷,⑤异补骨脂苷,⑥双补骨脂酚A,⑦双补骨脂酚B,⑧12,13-二氢-12,13-环氧补骨树脂酚;⑨补骨脂宁,⑩异补骨脂二氢黄酮,?补骨脂二氢黄酮甲醚。化合物③,⑥,⑦具有清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的能力;③,⑨~?对肝癌HepG2细胞和乳腺癌MDA-MB-231细胞具有抗增殖作用,⑦对肝癌HepG2细胞有一定抗增殖作用。结论：化合物③,⑥,⑦具有一定的抗氧化活性;③,⑦,⑨~?具有一定的抗肿瘤活性。     

17-Demethoxy-reblastatin 联合顺铂对三阴性乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察17-Demethoxy-reblastatin （17-DR）联合顺铂（cisplatin, DDP）对三阴性乳腺癌 （triple-negative breast cancer,TNBC）细胞株MDA-MB-231增殖和凋亡的影响及其相关的分子机制.方法 用MTT法、集落克隆形成法检测药物对细胞增殖抑制的影响,流式细胞术检测药物作用后细胞的凋亡情况.结果 不同浓度17-DR或DDP对细胞增殖具有抑制作用,且二者联用时抑制作用增强.50 μmol·L-1 17-DR、8 μmol·L-1 DDP及二者联用刺激24 h诱导细胞的凋亡率依次为14.7%、20.1%、45.2%.联合用药组Caspase-3的激活增强以及下调RIP1蛋白的表达.结论 17-DR作为热休克蛋白90 （heat shock protein 90, Hsp90）抑制剂能够增强DDP对MDA-MB-231细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制可能与下调Hsp90的顾客蛋白RIP1的表达相关.     

碱提酸沉法提取银杏外种皮中银杏酸的工艺研究

目的优化银杏外种皮的有效部位总银杏酸的提取工艺。方法采用碱提酸沉法提取银杏外种皮中银杏酸,通过单因素试验和正交试验,以白果酸含量为指标,采用高效液相色谱法测其含量,考察料液比、碱液浓度、碱提时间、酸沉pH、酸沉时间对提取工艺的影响。结果银杏酸的最佳提取工艺条件为料液比1:5,碱液浓度3%,碱提时间1 h,酸沉pH 5,酸沉时间1 h。结论经优选的碱提酸沉法提取银杏酸工艺,操作简单,稳定易行,提取效果好,重复性好,适合大量提取银杏外种皮中银杏酸。     

3-溴丙酮酸增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用

目的探讨3-溴丙酮酸（3-BP）增强肝癌细胞对顺铂敏感性的作用及其可能机制。方法MTT法检测3-BP、顺铂对HepG2、
SMMC7721细胞的增殖抑制作用。选择低于半数抑制浓度（IC50）的100 μmol/L的3-BP和8 μmol/L的顺铂单独或联合处理细
胞,PI 单染流式细胞术检测细胞凋亡,caspase 3 活性检测试剂盒测定caspase-3 的活性变化,ATP检测试剂盒测定细胞内ATP
水平,Western blot 检测XIAP、PARP蛋白的表达。结果3-BP 在50~400 μmol/L 浓度范围内对HepG2、SMMC7721 细胞具有
明显的增殖抑制作用（P<0.01）,作用48 h 的IC50分别为238.9±13.9 μmol/L、278.7±11.7 μmol/L;顺铂在2~32 μmol/L 浓度范围
内对HepG2、SMMC7721细胞具有明显的增殖抑制作用（P<0.01）,作用48 h的IC50分别为16.4±0.9 μmol/L、20.9±1.8 μmol/L。
100 μmol/L 3-BP与8 μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h 的增殖抑制率分别为（60.6±2.2）%、（56.8±2.3）%,明
显高于对照组和单独用药组（P<0.01）。100 μmol/L 3-BP与8 μmol/L顺铂联合作用于HepG2、SMMC7721细胞48 h 的凋亡率
分别为（51.1±4.3）%、（46.5±3.9）%,较单用3-BP、顺铂的凋亡率明显提高（P<0.01）。结论3-BP 能增强肝癌细胞HepG2、
SMMC7721对顺铂诱导的凋亡的敏感性,其机制可能是通过引起细胞内ATP缺乏、下调XIAP蛋白的表达以及增加caspase-3的
活性。     

南葶苈子乙酸乙酯浸膏对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖、凋亡的影响

目的探讨南葶苈子的乙酸乙酯浸膏对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖、凋亡的影响。方法采用系统溶剂萃取法对南葶 苈子甲醇浸膏进行初步分离。MTT法检测各萃取浸膏（5、10、20、40、80 μg/mL）的细胞毒性。集落克隆法检测不同浓度的南葶 苈子乙酸乙酯浸膏（0.625、1.25、2.5 μg/mL）对人非小细胞肺癌H1975细胞增殖的影响。Annexin V-FITC/PI双染及流式细胞术 检测不同浓度的乙酸乙酯浸膏（0、10、20、40 μg/mL）对人非小细胞肺癌H1975细胞凋亡的影响。免疫印迹法检测不同浓度乙酸 乙酯浸膏（0、10、20、40 μg/mL）对凋亡相关蛋白Akt、Bax及Bcl-2蛋白表达的影响。建立人非小细胞肺癌H1975细胞裸鼠移植 瘤模型,设置空白组,给药组（100 mg/kg）,阳性对照组,观察乙酸乙酯浸膏的体内抗肿瘤活性。结果MTT和集落克隆结果显示,乙 酸乙酯浸膏呈剂量依赖、时间依赖方式抑制人非小细胞肺癌H1975细胞增殖。与对照组相比,差异均具有统计学意义（P<0.05）。 流式细胞术结果表明,乙酸乙酯浸膏能显著诱导人非小细胞肺癌H1975 细胞发生凋亡（P<0.05）,并且呈现浓度依赖性。 Western blot结果显示,乙酸乙酯浸膏可降低蛋白Bcl-2、Akt的表达,增加蛋白Bax的表达（P<0.05）。另外,南葶苈子乙酸乙酯浸 膏表现出较好的体内抗肿瘤活性,对裸鼠体质量和器官的毒性较小。结论南葶苈子的乙酸乙酯浸膏具有较强的体内、体外抗 肿瘤作用,具有成为抗肺癌药物的潜力。