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目的:探讨骨形成蛋白8B(BMP8B)对人牙周膜干细胞(PDLSCs)增殖、分化的影响。方法:体外分离培养人PDLSCs,免疫荧光染色检测PDLSCs细胞蛋白基质细胞抗原1(STRO-1)、CD146蛋白。将PDLSCs细胞分为对照组、阴性转染组、BMP8B沉默组和BMP8B过表达组。流式细胞术、茜素红染色和油红O染色对PDLSCs进行鉴定。CCK-8法检测细胞增殖情况。对PDLSCs进行成骨诱导，检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性。茜素红染色检测成骨细胞矿化结节。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测细胞中BMP8B、Osterix、OCN、Runx2 mRNA表达水平，蛋白免疫印迹(WB)检测细胞蛋白表达情况。结果:显微镜下观察PDLSCs细胞为单核、多边形或梭形，具有成骨潜能和成脂潜能。与对照组和阴性转染组相比，BMP8B沉默组细胞增殖情况、ALP活性、茜素红染色程度及BMP8B、Osterix、OCN、Runx2 mRNA和CyclinD1、CDK2、Osterix、OCN、Runx2蛋白表达显著降低(P<0.05)。与对照组和阴性转染组相比，BMP8B过表达组各项... 相似文献
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目的:探讨miR-24-3p与骨形态发生蛋白8B(BMP8B)的靶向关系，并分析二者对成骨细胞功能的影响。方法:体外分离培养人牙周膜干细胞(hPDLSCs),并将其诱导分化为成骨细胞，采用碱性磷酸酶(ALP)染色法、茜素红染色法鉴定成骨细胞；将成骨细胞分为空白对照组、阴性对照组(inhibitor-NC组)、沉默miR-24-3p表达组(miR-24-3p-inhibitor组)、共转染组(miR-24-3p-inhibitor+BMP8B-siRNA组)。采用实时荧光定量PCR法检测miR-24-3p、BMP8B mRNA水平；CCK-8法、流式细胞仪分别检测各组成骨细胞增殖、凋亡情况；采用ALP活性检测试剂盒检测ALP活性；免疫印迹法检测各组成骨细胞BMP8B蛋白、功能活性相关蛋白(PICP、BGP、OPN)水平。应用TargetScan数据库预测miR-24-3p与BMP8B靶向关系并用双荧光素酶报告基因实验验证。结果:与空白对照组、inhibitor-NC组比较，miR-24-3p-inhibitor组成骨细胞增殖抑制率、凋亡率降低，ALP活性及PICP、BGP、OPN表达升高... 相似文献
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