分离亲水气单胞菌外毒素的聚丙烯酰胺凝胶色谱填料

由丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺在水油悬浮液中共聚得到聚丙烯酰胺凝胶 (ZSP)系列 ,并用红外、溶剂吸收实验等对合成的ZSP的结构进行了研究。以商品葡聚糖凝胶SephadexG 10 0为对照 ,研究了ZSP 10对使中华鳖致病的亲水气单胞菌外毒素的分离性能。结果表明 :ZSP 10对毒素分离效率高 ,洗脱峰不拖尾 ,且结构和膨胀度可调 ,成本低廉 ,不易染菌霉变。经SephadexG 10 0和ZSP 10提纯的外毒素蛋白均保留了生物活性。根据SDS -PAGE的分析 ,确认经提纯的毒素蛋白的分子量为 3.2× 10 4     

冰冻技术的电镜改装

冰冻技术的电镜改装在生物电子显微学的研究中，低温冰冻技术由于具有独特的优点获得越来越广泛的应用。高分辨生物大分子电子晶体学的研究，因为可应用冰冻－水合技术大大减轻电子束的幅射损伤和真空损伤，从而成为基本技术。但冰冻技术在应用中也遇到一些困难：其中一个...     

斜带石斑白细胞cDNA文库的构建

用Tripure试剂盒提取斜带石斑白细胞总RNA ,反转录合成第一链cDNA ,进行长距离PCR ,蛋白酶K消化 ,SfiI酶切 ,通过CHROMASPIN - 40 0柱 ,回收大于 5 0 0bp的cDNA ,与λTripIEx2载体连接 ,体外包装后构建了斜带石斑细胞的cDNA文库。库容 1 .6 5× 1 0 6 ,重组频率 82 % ,扩增后滴度 7.5× 1 0 9pfuml- 1。插入片断长度 5 0 0～ 2 30 0bp ,最多的是在 75 0～ 1 0 0 0bp范围。本文库可作为筛选斜带石斑细胞因子基因的重要资源     

分离亲水气单胞菌外毒素的功能高分子凝胶色谱填料

由丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺在水油悬液中共聚得到聚丙烯酰胺凝胶ZSP，并用IR、溶剂吸收实验等对合成的ZSP的结构进行了确证。以商品葡聚糖凝胶色谱Sephaddex—G100为对照，研究了ZSP-10对中华鳖致病的亲水气单胞菌外毒家蛋白的分离性能，结果表明经Sephadex—G100和ZSP-10提纯的外毒家蛋白均保留了生物活(毒)性，纯度高。从SDS—PAGE分析结果，可以认为经提纯的毒家蛋白是分子量为32KDa的纯品。与Sephadex—G100凝胶相比，聚丙烯酰胺凝胶色谱填料ZSP-10对蛋白质的回收率更高，且成本低廉，不易染菌，是具有良好的应用前景的蛋白质分离色谱填料。