银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控

目的 研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOs)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法 以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO，应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化，逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOs基因表达的影响，并探讨这一调控作用的分子机制。结果 EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOs mRNA和蛋白的表达、减少NO的生成，抑制IκB-α的降解和阻止p65／RelA进入细胞核。结论 结果提示EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOs基因表达和NO的生成进行调控。     

银杏叶提取物对星形胶质细胞诱导型一氧化氮合酶基因表达的调控

 目的研究银杏叶提取物(EGh761)对星形胶质细胞合成一氧化氮(NO)的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法以脂多糖(LPS)和IFN-γ诱导体外培养的大鼠星形胶质细胞表达诱导型一氧化氮合酶(iNOS),产生NO作为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型,应用逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对星形胶质细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果EGb761能明显降低星形胶质细胞中iNOS mRNA和蛋白质的表达、减少NO 的生成、防止活化的胶质细胞损伤共培养神经元,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核,提示EGb761对iNOS基因表达的抑制作用依赖于NF-κB信号通路。结论EGb761可能对与胶质细胞过度活化有关的神经系统疾病具有治疗、预防的作用。     

银杏叶提取物对H2O2诱导的巨噬细胞凋亡的抑制作用

 目的研究银杏叶提取物(EGb761)对H₂O₂所致RAW264.7巨噬细胞凋亡的保护作用。方法以H₂O₂诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡为实验模型,用噻唑蓝(MTT)实验、流式细胞术、蛋白质印迹分析、琼脂糖凝胶电泳和荧光分析分别检测细胞存活率、线粒体膜电位、细胞色素C的释放和Bax,bcl-2蛋白水平、DNA的降解、半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)活性。结果EGb761能明显降低H₂O₂对RAW264.7细胞的氧化损伤,提高细胞的存活率；维持线粒体膜的完整性,抑制跨膜电位的耗散和细胞色素C的释放；抑制caspase-3的活化和DNA的降解。结论EGb761具有清除活性氧,减轻H₂O₂所致RAW264.7细胞的氧化损伤,在对H₂O₂诱导的细胞凋亡中发挥重要的抗凋亡作用。     

银杏叶提取物对胶质瘤细胞NF-κB表达和NO生成的调控

目的研究银杏叶提取物(EGb761)对C6胶质瘤细胞核转录因子-κB(NF-κB)表达和可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、一氧化氮(NO)生成的影响。方法以脂多糖(LPS)和佛波酯(PMA)诱导体外培养的C6胶质瘤细胞表达可诱导型一氧化氮合酶、产生大量NO,应用激光共聚焦成像系统和NO荧光探针监测细胞内NO浓度变化,逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测EGb761对C6胶质瘤细胞中iNOS基因表达的影响,并探讨这一调控作用的分子机制。结果EGb761能明显降低C6胶质瘤细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少NO的生成,抑制IκB-α的降解和阻止p65/RelA进入细胞核。结论EGb761可通过NF-κB信号通路对C6胶质瘤细胞iNOS基因表达和NO的生成进行调控。     

银杏叶提取物对星形胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究银杏叶提取物（EGb761）对H2O2所致星形胶质细胞氧化损伤的保护作用。方法 用不同浓度的EGb761预处理细胞，再加入H2O2，通过噻唑蓝（MTT）实验、线粒体跨膜电位（△ψm）及细胞色素C释放实验、DNA损伤实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）活性测定，观察ECb761对细胞存活率、线粒体膜通透性、DNA氧化损伤及Caspase-3活性的影响。结果 EGb761能明显降低H2O2对星形胶质细胞的氧化损伤，提高细胞的存活率；维持线粒体膜的完整性，抑制跨膜电位的耗散和细胞色素C的释放；抑制Caspase-3的活化和DNA的降解。结论 EGb761具有清除活性氧，减轻H2O2所致星形胶质细胞的氧化损伤，对星形胶质细胞有保护作用。     

川芎嗪的抗氧化机制对缺血性脑损伤的保护作用

目的:研究fMLP刺激人多形核白细胞产生活性氧和一氧化氮的动力学过程并评价川芎嗪的作用。方法:实验于2001年在中国科学院生物物理所细胞生物实验室完成。应用超微弱化学发光、电子自旋共振自旋捕集技术和自旋探针氧测定法,测定多形核白细胞呼吸爆发过程中产生的活性氧、一氧化氮及其氧消耗。结果:fMLP刺激人多形核白细胞产生的化学发光既与一氧化氮合成酶合成一氧化氮有关,又与NADPH氧化酶催化产生超氧阴离子有关。化学发光动力学过程呈双峰曲线。第二峰总比第一峰晚几分钟。第一峰主要与超氧阴离子的产生有关,第二峰则与一氧化氮合成与释放有关,川芎嗪能直接清除超氧阴离子,抑制多形核白细胞诱导型一氧化氮合成酶合成一氧化氮。结论:人多形核白细胞激活后产生活性氧及一氧化氮的次序有先后,二者可迅速反应生成过氧化亚硝基,而川芎嗪是一种有效一氧化氮合酶活性调节剂,也是一种较强的抗氧化剂。     

从脾胃升降理论探讨功能性胃肠病重叠症状

功能性胃肠病是临床常见疾病,症状复杂并相互重叠.现代研究对症状重叠机制的认识尚未完全,祖国医学从整体出发,以脾胃升降理论为指导原则,探讨功能性胃肠病的重叠症状的病因病机及治疗对策.     

白藜芦醇对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调控

目的探讨白藜芦醇(Res)对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活化及炎性细胞因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)]基因表达的调节。方法分别用1mg/LLPS或25mmol/LRes+1mg/LLPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-κB活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α、IL-1β、IL-6mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后6～12h明显高于正常对照组(P<0.001),而Res+LPS组NF-κB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.005)。结论LPS可诱导巨噬细胞NF-κB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而Res能抑制NF-κB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

EseroS-GS对脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎性因子生成的调节

 目的探讨EseroS-GS对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞核因子-kB(NF-kB)活化及炎性细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)基因表达的调节,为Eseros-GS的临床运用提供理论依据。方法分别用LPS或Eseros-GS+LPS处理体外培养的小鼠巨噬细胞,采用蛋白质印迹分析和电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测细胞中NF-kB活性,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞中TNF-α,IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白的表达。结果LPS组NF-kB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量在刺激后2～12h明显高于正常对照组(P<0.01),而EseroS-GS+LPS组NF-kB活性和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著低于LPS组(P<0.01)。结论结果提示,LPS可诱导巨噬细胞NF-kB活化,导致TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达增强,而EseroS-GS能抑制NF-kB活化而调节TNF-α、IL-1β、IL-6基因的表达。     

EGb761对星形胶质细胞iNOS基因表达的调控

目的：以脂多糖(LPS)和γ-干扰素(WN-γ)诱导体外培养的大鼠脑星形胶质细胞表达可诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、产生大量一氧化氮(NO)为病理条件下胶质细胞过度活化的实验模型，研究了银杏叶提取物(EGb761)对星形胶质细胞合成一氧化氮的作用以及对共培养的小脑颗粒神经元的作用。方法：应用逆转录基因扩增技术和蛋白质印迹技术检测了EGb761对星形胶质细胞中iNOS基因表达的影响，并探讨了这一调控作用的分子机理。结果：EGb76l能明显降低星形胶质细胞中iNOSmRNA和蛋白的表达、减少一氧化氮的生成、防止活化的胶质细胞损伤共培养神经元，抑制IKB-α的降解和阻止p65／RdA进入细胞核，结果提示EGb761对iNOS基因表达的抑制作用依赖于NF-κB信号通路。结论：实验结果提示EGb761可能对与胶质细胞过度活化有关的神经系统痰病具有治疗、预防的作用。