加热法人心肌钙蛋白T的提取与纯化

目的以加热法从人左心室肌组织中提取并纯化心肌肌钙蛋白Ｔ（ＣＴｎＴ）。方法取新鲜人左心室肌经捣碎、淬取、加热、透析后提取ＣＴｎＴ,以ＤＥＡＥ５２柱层析纯化。结果经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳初步鉴定,每１００ｇ左心室肌经此法可得１１．７９ｍｇＣＴｎＴ纯品,纯化后的ｃＴｎＴ为单一条带,分子量为３７ＫＤ。结论本法提取ＣＴｎＴ步骤简单,纯度尚可,可做抗原使用。     

新乡市区产妇及新生儿脐带血清弓形虫免疫球蛋白G抗体检测结果分析

我们近期采集新乡地区待产孕妇外周血及其出生婴儿脐带血 ,在同一时间、由同一人操作、采用同一批号试剂集中进行检测 ,现将结果报道如下。对象与方法一、对象　随机留取 2 0 0 3年 3～ 6月新乡市各医院胎位无异常、B超监测胎儿无畸形的足月待产孕妇空腹静脉血及其产后新生儿脐带血各 80份 ,分离血清并编号 ,- 4 0℃冻存备用。二、方法　试剂盒由珠海海泰生物制药有限公司 (生产批号 :0 30 4 2 1)提供 ,严格按说明书进行操作 ,同时设立阴性、阳性和临界对照以做好质量控制。A值观测采用国营华东电子管厂生产的DG30 2 2A型酶联免疫检测仪。…     

中国山东沿海地区汉族男性人群白介素-23受体基因多态性与痛风的易感性研究

目的探讨中国山东省沿海地区汉族男性群体的白细胞介素23受体（IL-23R）基因rs7517847位点G／T的多态性是否与痛风的易感性有关。方法选取202例痛风患者和346例健康对照者,检测中国汉族男性群体的IL-23受体内含子区rs7517847位点基因多态性分布,数据经,检验得出其与痛风发病的遗传易感性的关系。结果经,检验,痛风组和对照组中IL-23R基因rs7517847位点GG,GT和1Tr基因型频率（10．4％,49．5％,40．1％;16．2％,49．7％,34．1％;X^2=4．305,P〉0．05）与等位基因频率G和T（35．1％,41％;64．9％,59％;X^2=3．727,P〉0．05）均无统计学意义。IL-23R基因rs7517847位点G／T基因多态性与痛风病的危险因素无显著性关联。结论尚不能认为中国沿海地区汉族男性人群中IL-23R内含子区rs7517847位点基因多态性与痛风有关联性。     

甲醛固定石蜡包埋子宫内膜癌变组织中microRNA-29b表达及其临床意义

目的探讨以甲醛固定石蜡包埋组织为材料、实时荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌变组织中microR-NA-29b表达的可行性及其临床意义。方法选取甲醛固定石蜡包埋组织96份,其中正常子宫内膜16份,不典型增生内膜20份、子宫内膜癌60份。设计microRNA-29b和U6的茎环结构反转录引物和PCR扩增引物,以U6为内参,利用SYBR green实时荧光定量PCR技术检测子宫内膜癌变组织中microRNA-29b的含量,分析microRNA-29b在癌变组织中的表达及其与临床病理特征的关系。结果 microRNA-29b在甲醛固定石蜡包埋组织中有表达;mi-croRNA-29b在子宫内膜癌组织中的表达低于正常内膜及不典型增生内膜(P均<0.05);microRNA-29b表达与病理分期及有无淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论可以利用甲醛固定石蜡包埋组织进行microRNA-29b的相关研究;microRNA-29b在子宫内膜癌变组织中表达的差异可能与子宫内膜癌的发生、发展有关,对子宫内膜癌的早期诊断、预后评估可能有一定的指导意义。     

山东地区汉族儿童先天性甲状腺功能减低症NNT基因突变筛查研究

目的 探讨山东地区汉族儿童先天性甲状腺功能减低症(CH)烟酰胺核苷酸转氢酶(NNT)基因突变情况及其与CH的关系,为CH的诊断提供理论依据。方法 对50例来自山东地区的汉族CH患儿进行NNT基因编码区筛查。提取血液基因组DNA,PCR扩增NNT基因全部编码区后进行Sanger测序,将测序结果与NCBI中NNT基因编码区原序列(NM_012343.3)进行比对,检测这些患儿是否携带NNT基因突变并对发现的突变进行生物信息学分析。结果 2例患儿中发现了NNT基因c.1475C＞T(p.A492V)突变,1例患儿中发现NNT基因c.2704C＞A(p.P902T)突变,Polyphen值显示前者几乎无蛋白危害性,可能不是致病突变,而后者蛋白危害性较大,应为致病突变。结论 NNT基因突变可能不是山东汉族人群CH的主要病因,仍需扩大样本量进行研究。     

日本血吸虫循环抗原检测的血清预处理方法比较

血吸虫循环抗原主要有三大类：ＭＡＡ、ＧＡＡ和ＳＥＡ。在检测过程中，常存在交叉反应。为排除血清中杂蛋白的干扰，采用ＴＣＡ沉淀法［１］、ＰＥＧ沉淀法［２］和热碱处理法［３］３种方法预处理，并对其效果进行比较。材料与方法血清样品２０条尾蚴感染兔第８ｗｋ血清...     

nm23-H1基因表达及突变与肝癌转移的关系

[摘要] 目的　研究nm23-H1基因的表达及突变和原发性肝细胞癌（hepatocellular carcinoma ,HCC）发展和转移的关系。方法 应用逆转录 PCR（RT-PCR）和逆转录PCR-单链构象多态法（RT-PCR SSCP）对30例肝癌组织、30例癌旁组织和4例正常肝组织中nm23-H1基因 mRNA表达和基因突变情况进行检测。 结果 nm23-H1基因在肝癌组织、癌旁组织、正常组织中的表达水平分别为1.62±0.41、1.30±0.30和1.23±0.39。肝癌组织中nm23-H1基因的表达水平明显高于癌旁组织（P<0.05）和正常组织（P<0.01）; 低分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平低于高、中分化肝癌组织中nm23-H1基因表达水平（P<0.05）;有卫星转移灶和无卫星灶的肝癌组织中nm23-H1基因表达水平无显著差异（P>0.05）;30例肝癌组织及相应的癌旁组织中未发现nm23-H1 cDNA基因突变。 结论 nm23-H1基因表达水平增高与肝癌的转移有密切关系,nm23-H1基因的异常表达是HCC转移中的频发事件而与基因突变无关。     

家兔精液传播弓形虫的实验研究

目的 了解弓形虫能否通过精液传播，并探讨雌兔阴道不同健康状态对精液传播弓形虫的影响。 方法 8只健康新西兰雄兔经腹腔分别感染1×10⁵个RH株弓形虫速殖子，分别于感染前、后用假阴道采集雄兔精液，每周将采集到的精液混合液化后0.1 ml/只， 分别经宫腔内人工受精管感染4组阴道健康状态不同的成年新西兰雌兔（阴道正常组、阴道损伤组、滴虫性阴道炎组和霉菌性阴道炎组）， 共采集8周，将所得8份混合精液分别感染8次。每次受精后第2～3天耳缘静脉采血2 ml， 分别用ELISA和PCR检测血清抗弓形虫抗体和全血中弓形虫B1基因片段。 结果 ELISA结果显示，雌兔在初次受精后第16天可检测到抗弓形虫抗体，第1～4组抗体阳性家兔数分别有2、1、3和1只，ELISA阳性率为25.9％（7/27）。PCR检测最早在受精后3 d和最晚51 d可扩增出弓形虫B1基因片段200 bp， 第1～4组阳性家兔数分别有2、1、2和0只，PCR阳性率为18.5%（5/27）。其中两种检测结果均为阳性的3只。 结论 弓形虫可通过精液感染雌兔。雌兔的阴道健康状态对经精液感染弓形虫无影响。     

四川南充与山东青岛地区痛风临床特点比较

目的 通过分析四川南充和山东青岛地区痛风患者的临床及生化资料,探索内陆和沿海地区痛风的发病特点.方法 收集四川南充地区痛风患者194例、山东青岛地区痛风患者194例,对其临床资料及血尿酸(SUA)、血脂、空腹血糖(FPG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)等生化指标进行对比分析.结果 高嘌呤饮食诱发痛风发作在南充痛风患者所占比例低于青岛痛风患者(P＜0.01);南充痛风患者合并痛风石者所占比例低于青岛痛风患者(P＜0.05).南充痛风患者总胆固醇(CHO)及BMI水平明显低于青岛痛风患者(P均＜0.01),腰臀比(WHR)低于青岛痛风患者(P＜0.05).与青岛痛风患者相比,南充痛风患者合并脂代谢紊乱者较少(P＜0.05),冠心病、肥胖者所占比例少(P均＜0.01);南充痛风患者合并肾结石者较青岛痛风患者明显增多(P＜0.01).结论 与南充内陆地区痛风患者相比,青岛沿海地区痛风患者易由高嘌呤饮食诱发痛风发作,并且易合并有痛风石、脂代谢紊乱、冠心病和肥胖;与青岛沿海地区痛风患者相比,南充内陆地区痛风患者多合并肾结石.     

遗传性痉挛性截瘫一家系19例

先证者(Ⅴ5) 男,36岁.20年前开始出现双腿僵硬,走路不便,步态不稳,易跌倒,上下楼梯困难,病情呈进行性加重.查体:痉挛步态(+),髌阵挛(-),下肢腱反射亢进,双下肢病理征(+),弓形足,诊断为遗传性痉挛性截瘫.