细胞因子信号转导抑制因子在直肠癌组织中的表达

目的 探讨人直肠癌组织中细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）的表达.方法 应用RT-PCR法测定8例正常人直肠组织、16例直肠癌组织（青年组8例、老年组8例）中SOCS-3的表达.结果 与正常直肠组织比较,青年组、老年组病人直肠癌组织SOCS-3 mRNA的表达均呈降低趋势,老年组更为显著（P＜0.01）;老年组直肠癌组织SOCS-3 mRNA表达水平显著低于青年组（P＜0.05）.结论 SOCS-3基因在老年直肠癌的发生、发展中可能起着更为重要的作用.     

结直肠癌患者尿液中20种氨基酸靶向代谢组特征研究

目的 探究20种常见氨基酸在结直肠癌(CRC)患者的尿液特征;寻找CRC诊断的生物学标志物。方法 纳入100名健康对照者和113名CRC患者(Ⅰ期27例,Ⅱ期28例,Ⅲ期34例,Ⅳ期24例),基于超高效液相色谱串联质谱法对尿液中的20种常见氨基酸应用多反应监测技术进行靶向定量分析,应用统计学方法分析CRC患者与健康对照氨基酸含量差异,并构建CRC诊断模型。结果 CRC患者尿液中16种氨基酸含量与健康对照差异有统计学意义,Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ期各自有9种,15种,14种,17种氨基酸含量与健康对照差异有统计学意义。由异亮氨酸,天冬酰胺,脯氨酸,组氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸6种氨基酸构建的生物标志物组合用于CRC诊断的AUC值在发现组/验证组分别为0.857/0.851,在Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ期CRC的AUC值分别为0.847,0.843,0.897,0.896。结论 尿液中20种氨基酸含量变化可以用于CRC诊断,为CRC的早期诊断提供了新的研究思路。     

抗NPM1单克隆抗体的制备

目的 制备并鉴定NPM1单克隆抗体.方法 利用纯化的NPM1融合蛋白作为抗原,通过常规的细胞融合技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA法筛选能出产生抗NPM1单克隆抗体的阳性细胞株,对抗NPM1单克隆抗体的特性进行分析.结果 筛选出1株产生抗NPM1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,产生的抗体为IgGl亚类,效价达1∶720000;纯化后经SDS-PAGE显示两条蛋白条带,纯度达95％以上,相对分子质量约为50000和25000,与单一抗体重链、轻链分子大小相符.免疫组化证实,纯化的2G7抗NPM1单克隆抗体可检测出NPM1在结直肠癌表达,阳性位点为细胞核.结论 制备的抗NPM1单克隆抗体可用于NPM1蛋白功能的研究与临床检测.     

以蛋白质组学方法筛选人源性大肠癌噬菌体抗体库

目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库，建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗，再用富集抗体库和PVDF膜进行Westem—Blot印记实验。结果经Western—Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白。结论成功建立了双盲，双向，高通量筛选大肠癌特异性抗原及其相应噬菌体抗体的方法。     

骨髓增殖性肿瘤JAK2V617F基因突变的临床意义

蛋白质酪氨酸激酶是信号通路中的重要调控因子,也是重要的治疗靶标[1]。2005年,5个研究小组同时发现在费城染色体阴性骨髓增殖性肿瘤(MPN),即真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)及原发性骨髓纤维化(PMF)患者体内存在JAK2V617F突变[2]。JAK2V617F突变体的     

老年冠心病患者载脂蛋白B100基因突变的研究

目的探讨老年冠心病发病基因水平上的原因,为冠心病的诊断提供理论依据。方法采用ＰＣＲ与限制性内切酶ＭｓｐⅠ酶切的方法对１８３例老年冠心病患者进行了载脂蛋白Ｂ１００基因突变的研究。结果７４例心绞痛病例中,基因水平有改变者为１８例（２４．４％）;１０例心肌梗死患者基因水平有改变者３例（３３．３％）,余者基因水平无改变。结论老年冠心病患者中心绞痛和心肌梗死两类冠心病部分病人病因与其基因水平碱基突变有关。     

ApoB基因突变与老年2型糖尿病及其心血管并发症的关系

目的 探索ＡｐｏＢ基因突变与老年２型糖尿病及其心血管并发症的关系。方法 采用ＰＣＲ的限制性内切酶ＭＳＰＩ酶切的方法对５５例老年２型糖尿病伴心绞痛、心肌梗死患者进行ＡｐｏＢ１００基因突变检测。结果 ３２例２型糖尿病伴心绞痛患者中基因水平有改变者为５例,２２例２型糖尿病心肌梗死患者基因水平改变者为４例。结论 老年２例糖尿病伴心绞痛、心肌梗死患者中,部分患者病因与其基因水平碱基突变有关。     

胶体金标记单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备

目的制备胶体金标记单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体（McAb）,用于检测食品中的致病性单核细胞增生李斯特菌。方法以纯化的单核细胞增生李斯特菌（标准菌株号54001、54002）为抗原,免疫Balb/c小鼠,制备单克隆抗体,建立胶体金标记的单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备方法。结果筛选出2株单抗杂交瘤细胞株F5、F9,并获得免疫球蛋白,测定免疫球蛋白亚类为IgM。通过选用柠檬酸钠法制备胶体金标记单核细胞增生李斯特菌抗体,测定其最适蛋白结合浓度为12 g/ml。结论成功制备了胶体金标记的单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体,为建立食品中病原性单核细胞增生李斯特菌检测技术奠定基础。     

金黄色葡萄球菌的耐药性分析及流行病学分型

目的 研究金黄色葡萄球菌(SAU)的耐药性及流行病学分型特点.方法 应用Microscan Walkaway96全自动细菌鉴定仪进行菌种鉴定及抗菌药物敏感性试验;应用脉冲凝胶电泳将随机选取的部分MRSA进行分子流行病学分型.结果 共分离497株金黄色葡萄球菌,未发现万占霉素及利奈唑胺耐药及中介的菌株,SAU对磺胺甲噁唑/甲氧苄啶及氯霉素耐药率相对较低,分别为12.6％、5.9％ ;40株MRSA脉冲凝胶电泳分型共有6个分型,其中A型及其亚型最多,占47.5％,B型占20.0％,其余4个分型占32,5％.结论 万古霉素及利奈唑胺是对MRSA最为敏感的药物,医院MRSA分子流行病学分型以脉冲凝胶电泳分型A型及B型为主.