丙型肝炎病毒H株包膜蛋白在昆虫细胞中的表达及意义

目的　获得丙型肝炎病毒 (HCV) H株包膜糖蛋白的重组杆状病毒 ,在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2 ,并初步应用于丙型肝炎患者血清抗体的检测。方法　用 PCR方法自 HCV H株扩增出包膜蛋白 E基因 ,构建重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞中稳定表达包膜糖蛋白 E1和 E2。免疫荧光及 Western blot方法鉴定表达产物。用表达的 E1和 E2蛋白与 35例丙型肝炎患者血清反应。结果　昆虫细胞中表达的 E蛋白呈现 3种分子大小 ,E1的相对分子量为 2 1× 10 3和 33× 10 3 ,E2的相对分子量为 6 0× 10 3。在 35份感染者血清中 ,有 4例 E1抗体阳性 ,其中 1例检出 E2抗体。在 9例 PCR检测 HCV RNA阳性而抗 HCV检测阴性的血清中 ,有 3例血清与表达的 E蛋白反应。结论　 HCV E蛋白基因可在昆虫细胞中稳定表达 ,表达的 E1和 E2蛋白可用于 HCV患者的血清学诊断     

招生体检中影响尿液常规检查的因素探讨

为了解招生学员尿液常规体检的影响因素，现将重庆市1999年和2000年度招收学员4333人的尿检结果分析报告如下。     

夏至草提取物对大鼠实验性微循环障碍的影响

目的：观察夏至草提取物对大鼠实验性微循环障碍的作用。方法：用10％高分子右旋糖酐(Dextran 500)以10ml／kg经静脉注射，复制大鼠微循环障碍血瘀证模型，造模后夏至草治疗组按9．0、3．0、1．0g／kg(含生药)静脉注射夏至草提取物，益母草治疗组按5．0g／kg静脉注射益母草注射液，对照组给等量的生理盐水，通过显微电视录像观察肠系膜微血管口径、流态和微淋巴管(ML)收缩性的变化。结果：夏至草提取物可明显扩张微血管，促进血流，使ML自主收缩频率、收缩活性指数(Index Ⅰ)、总收缩活性指数(Index Ⅱ)、淋巴动力学指数(L．D-Index)显著增高。结论：夏至草提取物对血液和淋巴微循环障碍有良好改善的作用。     

糙米利于健康

在人们的印象中糖就是甜的．然而在糖类家族中却有一些糖不具有甜味。     

贝克曼 DXC800生化仪典型故障维修

对贝克曼DXC800生化仪典型故障进行汇总分析，并详细介绍了处理的方法。     

低温等离子联合微填塞技术在难治性鼻出血治疗中的应用与评价

目的 探讨低温等离子联合鼻腔微填塞技术在难治性鼻出血的治疗中的应用价值,评价其疗效及安全性.方法 选取107例难治性鼻出血患者,随机分为两组:观察组58例,行鼻内镜下低温等离子联合鼻腔膨胀海绵微填塞治疗.对照组49例,行鼻内镜下后鼻孔填塞及鼻腔油纱条填塞治疗.对比两组疗效、术后患者主观不适感以视觉模拟评分法(visua...     

二甲基亚砜诱导成年大鼠骨髓基质细胞转分化为胰岛样细胞

背景：已有报道，二甲基亚砜可使骨髓基质细胞分化为神经元，那么可否用二甲基亚砜诱导骨髓基质细胞向nestin阳性细胞分化，继而向胰岛分化。 目的：探讨二甲基亚砜对成年大鼠骨髓基质细胞定向诱导分化为胰岛样细胞团的作用。 设计：以细胞为观察对象，随机对照，体外实验。 单位：河北北方学院医学院组织学与胚胎学教研室。 材料：实验于200605／2007—07在河北北方学院组胚教研室细胞室完成。选取6～8周龄Wistar大鼠10只，性别不拘，由解放军军事医学科学院实验动物中心提供。实验用分析纯二甲基亚砜购自北京市化学试剂厂。反转录聚合酶链反应系统为Prornega公司产品（A3500），Taq酶和DNA marker DL2000购自北京天为时代生物技术有限公司，鼠抗人胰岛素单克隆抗体（ZM20155）、兔抗人胰高血糖素多克隆抗体（ZA20119）购自北京中杉金桥生物技术有限公司，兔抗人nestin多克隆抗体（与大鼠组织有良好的交叉反应，可用于检测人、大鼠等哺乳动物组织）、SABC试剂盒购自武汉博士德公司，大鼠胰岛素放射免疫试剂盒，购自美国Linco公司。 方法：骨髓基质细胞以含体积分数0．1胎牛血清的H-DMEM培养60min，收集未贴壁细胞以含10g／L二甲基亚砜的无血清H—DMEM作为诱导液，以109／cm^2密度接种于6孔板，诱导3d，继之用体积分数0．1胎牛血清的H-DMEM培养7d。 主要观察指标：用DTZ染色观察诱导细胞团的形态，免疫细胞化学染色检测巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素的定位：反转录聚合酶链反应检测诱导细胞团的内分泌基因表达；放免分析检测细胞团的胰岛素分泌量。 结果：①骨髓基质细胞分化的细胞团形态：骨髓基质细胞为典型的成纤维细胞样或葡萄样贴壁细胞，经二甲基亚砜诱导3d后，出现胰岛样细胞团，经DTZ染色显示了和胰岛同样的特性。②免疫细胞化学染色显示：二甲基亚砜诱导后1d骨髓基质细胞表达nestin蛋白，诱导10d表达胰岛素和胰高血糖素；未经二甲基亚砜诱导的骨髓基质细胞则不表达胰岛素和胰高血糖素。③反转录聚合酶链反应结果显示：骨髓基质细胞经二甲基亚砜诱导后胰岛样细胞团表达insulin1，insulin2，glucagon和somatostain基因。④细胞团的胰岛素分泌量：胰岛样细胞团对葡萄糖刺激敏感，低糖（3．3mmol／L）和高糖条件下（16．7mmol／L）胰岛素分泌量分别为5．56和24．5μU/mL。 结论：体外经二甲基亚砜诱导的大鼠骨髓基质细胞可定向分化为胰岛样细胞。     

乙脑病毒 E蛋白的原核表达、纯化及初步鉴定

目的:构建乙脑病毒(JEV)E蛋白重组载体并在原核细胞BL21(DE3)中表达. 方法:采用RT-PCR扩增片段,定向克隆入pET28a( )中;重组载体pET28a-6His-E转化BL21(DE3),通过酶切、SDS-PAGE和Western Blotting检测其载体构建和蛋白表达;表达产物包涵体经Ni-NTA亲和层析纯化. 结果:构建得到原核融合重组载体pET28a-6His-E;诱导后表达得到6His-E融合蛋白,纯化得到表达产物并进行了初步的鉴定. 结论:表达并纯化得到JEV E蛋白原核表达产物.     

急性外伤性颅内血肿并小脑幕切迹疝66例救治

2004年1月～2007年5月，我院神经外科共收治急性外伤性颅内血肿并小脑幕切迹疝患者66例，现将临床资料进行分析对比，以阐明该病特点及手术时机。