中医不同治法诱导肌源性干细胞向成骨细胞诱导分化中SDF-1蛋白表达的比较研究

目的 探究在中医补肾、健脾、补肾健脾的不同方法下,人骨形态发生蛋白2（BMP-2）诱导大鼠肌源性干细胞（MDSCs）成骨分化的过程中基质细胞衍生因子1（SDF-1）蛋白含量变化。方法 购置体外分离培养大鼠肌源性干细胞(MDSCs)。用随机数字表法将60只SPF级SD大鼠分为6组,依次为正常组、诱导液组、诱导液+补肾阴组（左归丸组）、诱导液+补肾阳组（右归丸组）、诱导液+健脾组（补中益气汤组）、诱导液+补肾健脾组。对大鼠进行7 d灌胃,大鼠胃容积为 1 mL /100 g,以此为大鼠配药及灌胃,制备含药血清。通过茜素红染色观察其细胞形态,使用qRT-PCR法、ELISA检测上述各组细胞中SDF-1mRNA及蛋白表达。结果 ①qRT-PCR检测结果显示：与正常组相比,诱导组、补肾阴组、补肾阳组、健脾组、补肾健脾组显著升高;与诱导组比较,除健脾组外,其余各组组中SDF-1均显著升高,且具有统计学意义(P<0.05);②ELISA检测结果表明：与正常组相比,诱导组、补肾阴组、补肾阳组、健脾组、补肾健脾组中SDF-1mRNA相对表达量均高于正常组,除补肾阴组与补肾健脾组外均具有统计学意义(P<0.05);与诱导组相比,除补肾健脾组外,补肾阴组、补肾阳组、健脾组均具有统计学意义（P<0.05）。结论 ①大鼠肌源性干细胞(MDSCs)向成骨细胞的转化与SDF-1的水平升高有关;②补肾阴、补肾阳、健脾和补肾健脾法大鼠肌源性干细胞(MDSCs)向成骨细胞诱导分化的过程中存在正向促进作用,可能是通过提高SDF-1水平来促进成骨细胞的转化。     

“峻补肾阳”之右归丸对骨质疏松症防治的研究进展

梳理近20年右归丸防治骨质疏松症（osteoporosis,OP）的相关文献,应用VOS viewer进行可视化分析。右归丸可改善OP患者骨代谢及临床症状,通过调节TGF-β、Wnt/β-catenin及AMPK/mTOR等多条信号转导通路改善OP模型动物骨密度及骨代谢情况,并影响骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）的增殖及分化。共现聚类和关键词密度分析显示,右归丸防治OP的侧重点及趋势主要在于肾阳虚型OP、BMSCs成骨及成脂分化、骨代谢等,并探讨了右归丸调节上述信号通路防治OP的作用机制。     

《黄帝内经》“心开窍于耳”理论探析

通过整理《黄帝内经》（简称《内经》）“肾实”证候群发现,在未明确脏腑分类的“肾实”证候群中未发现肾脏异常所引起的“耳”部病变;这组症状在肾脉异常证候、有明确脏腑分类“肾实”相关疾病证候中也均未提及。这与现行中医教材所说的“肾开窍于耳”理论有所出入。进一步研读《内经》全文,发现《内经》并未提出“肾开窍于耳”,而是说“肾在窍为耳”（《素问·阴阳应象大论篇》）、“心开窍于耳”（《素问·金匮真言论篇》）。该文通过对《内经》“窍”理论进行整理分析,从文字上考证“窍”之含义,从《内经》原文考察“心肾之窍”“心与耳窍”之经络循行,从“心与耳窍”之生理病理等方面对“心开窍于耳”这一理论进行探讨。最后总结归纳了心病酿致耳疾的治疗体会及常见的辨证分型,并列举医案分析,为从心论治耳病和心藏象理论的研究开拓新的辨证思路。     

骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化中CXCR4蛋白表达的研究

目的 探究中医补肾阴、补肾阳、健脾、补肾健脾不同治法对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中CXCR4蛋白表达的影响,从而为中药防治骨质疏松症提供依据。方法 体外分离培养大鼠BMSCs,将SPF雌性SD大鼠用随机数字表法随机分成6组,依次分别为：正常组、诱导液组、补肾阴组、补肾阳组、健脾组、补肾健脾组。对大鼠进行7 d灌胃,制备含药血清,各组成骨诱导18 d后,进行茜素红染色检测矿化情况,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上述每组细胞上清液CXCR4、BMP2蛋白表达水平。结果 诱导18 d后,与正常组相比,补肾阳组与补肾健脾组BMP-2含量均显著升高(P<0.01),诱导组、补肾阴组BMP-2含量有所升高,但差异不具有统计学意义(P>0.05);与诱导组相比,补肾健脾组BMP-2含量均显著升高(P<0.01),补肾阴组与补肾阳组BMP-2含量有所升高,但差异无统计学意义(P>0.05),各含药组BMP-2蛋白浓度比较依次为：补肾健脾组>补肾阳组>补肾阴组>健脾组;与正常组相比,各组CXCR4含量均显著升高(P<0.01),且补肾健脾组上...     

GH/IGF-1系统在BMSCs成脂分化过程中作用机制的实验研究

目的 研究温肾健脾、活血化瘀含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成脂分化作用过程中生长激素(GH)/胰岛素样生长因子1(IGF-1)系统的调节机制。方法 将40只SPF级雄性SD大鼠用随机数字表法分成4组，依次为正常组、成脂诱导组、温肾健脾组、活血化瘀组。对大鼠进行7 d灌胃，制备含药血清，按一定比例将含药血清与完全培养基进行配比用以BMSCs成脂分化的培养。油红O染色观察BMSCs成脂分化情况后，用ELISA法测定脂肪细胞中GH、IGF-1的蛋白水平。结果 GH蛋白表达水平结果：与正常组比较，成脂诱导组低于正常组，差异不具有统计学意义(P>0.05)。与成脂诱导组相比，温肾健脾组、活血化瘀组结果均优于成脂诱导组，差异均具有统计学意义(P<0.05)。温肾健脾组与活血化瘀组相比，活血化瘀组结果优于温肾健脾组。(2)IGF-1蛋白表达水平结果：与正常组相比，成脂诱导组结果高于正常组，且差异具有统计学意义(P<0.05)。与成脂诱导组相比，温肾健脾组、活血化瘀组结果均低于成脂诱导组，且差异均具有统计学意义(P<0.05)。温肾健脾组、活血化瘀组相比，活血化瘀组结...     

由“肾藏精主骨”理论探讨DNA甲基化修饰与骨质疏松症

骨质疏松症（osteoporosis，OP）是一种以骨结构退化和骨量减少为主要特征的代谢性疾病。《黄帝内经》中提出“肾藏精主骨”理论，将“肾”与“骨”之间的生理病理转化密切联系起来。近年来，随着中国传统医学与表观遗传学研究的发展，甲基化修饰在骨质疏松症发生发展中的作用已成为研究热点。中医药治疗骨质疏松症在分子水平上被证实与DNA甲基化的调控有关，本文基于中医“肾藏精主骨”理论探讨DNA甲基化对骨质疏松症的调控机制，分析DNA甲基化修饰与中医基础理论的有机结合，旨在为中医药现代化研究提供新的参考。