淋病奈瑟菌引起的阴茎根部脓肿1例

患者男,46岁,职员,阴茎根部脓肿溃疡1个月余。实验室涂片检查见革兰阴性双球菌,培养有透明、湿润、突起的小菌落生长,经分子生物学鉴定为淋球菌。诊断:淋球菌引起的阴茎根部脓肿。K-B法药敏试验显示头孢曲松、头孢克肟低敏,大观霉素敏感,故用大观霉素治疗,10天后溃疡愈合。     

351株甲真菌病病原菌临床分布及体外药敏试验

 目的 了解海南省甲真菌病病原菌的分布以及菌株对临床常用抗真菌药物的敏感情况。方法 收集2016年5月-2018年11月某院就诊的甲真菌病患者甲屑标本,通过培养、鉴定以及体外药敏试验,对检出的真菌菌株进行分析。结果 共收集甲真菌病患者348例,检出病原菌351株。病原菌以酵母样菌属为主（53.28%）,其中优势菌为近平滑假丝酵母菌（22.22%）和白假丝酵母菌（11.40%）;其次是皮肤癣菌属（29.63%）,其中优势菌为红色毛癣菌（25.07%）。检出病原菌的患者年龄段主要集中在21~30岁（86株）、31~40岁（77株）、41~50岁（49株）;患者男女比例1：1.52。甲真菌病患者临床分型主要为以远端侧缘甲下型（47.41%）、浅表白甲型（18.97%）、全甲破坏型（15.80%）为主。红色毛癣菌和指（趾）间毛癣菌对特比萘芬的MIC几何均数最低,茄病镰刀菌对伏立康唑的MIC几何均数最低,假丝酵母菌（白假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、都柏林假丝酵母菌）对酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑的MIC几何均数均较低。结论 海南岛2016-2018年甲真菌病病原菌以酵母样菌属为主,由其引起的甲真菌病可首选酮康唑、伊曲康唑、伏立康唑。     

食品中肠出血性大肠埃希菌O157:H7的PCR检测

目的建立快速准确检测食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的方法。方法采用多重聚合酶链式反应技术（MPCR）特异性扩增肠出血性大肠埃希菌O157：H7的STX、rfbE、fliC基因。结果分别在228，378，709bp处扩增出3个目的基因片段，且只有肠出血性大肠埃希菌O157：H7获得扩增，其他菌种扩增均呈阴性。结论PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便，为食品中肠出血性大肠埃希菌O157：H7的快速检测提供了新的手段。     

羊布鲁氏菌外膜蛋白质的组成鉴定

目的：通过蛋白质组技术阐明羊布鲁氏菌外膜蛋白的主要组成。方法：提取并纯化羊布鲁氏菌的外膜蛋白,应用双向电泳技术进行分离,选取双向电泳图上主要的蛋白点进行质谱分析,同时主要蛋白质点的肽指纹图谱利用Mascot在NCBInr蛋白数据库中进行检索。结果：共鉴定到67个蛋白点,主要外膜蛋白为Omp25和Omp31,其他外膜蛋白如Imp、Frp、GroEL等,功能涉及物质运输、能量代谢、应激等。结论：对主要外膜蛋白Omp25和Omp31的识别与分析不仅有助于对布鲁氏菌致病机制的研究,而且为布鲁氏菌病的疫苗研制提供靶标蛋白。     

布鲁氏菌自杀载体的改建及其在突变株构建中的应用

目的:改建布鲁氏菌自杀载体.方法:用NdeⅠ将pKOBEG-SacB质粒中的反向筛选基因SacB切下来,与同样酶切处理的pUC19质粒连接,得到pUC19-SacB,经测序和蔗糖筛选实验证实.结果:成功将SacB从pKOBEG-SacB中切下来并插入到pUC19质粒中,构建得到了pUC19- SacB.测序和蔗糖筛选实验证实.插入的sacB基因具有较好的反筛功能.我们利用该质粒,成功的构建了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统的突变株,改建的载体能高效的应用于布鲁氏菌染色体的精确修饰.结论:构建了一个新的自杀质粒pUC19-SacB,该质粒能用于布鲁氏菌无痕缺失突变株的构建.     

奇异变形菌基因组文库的构建及标识序列的发现

目的:构建用于筛选奇异变形菌的特异序列的基因组文库,并从中筛选变形杆菌特异的标识序列.方法:提取奇异变形菌的基因组DNA,用Sau3AI部分酶切,回收酶切产物,然后与BamHⅠ酶切的pUC19质粒连接,转化JM109,构建奇异变形菌的基因组文库.随机挑取抗性克隆,用位于质粒上的引物进行扩增,确定插入片段的大小及分布情况.DNA测序确定部分克隆中插入的序列,根据序列设计引物,分析这些序列在奇异变形菌临床分离株中的分布,验证序列的特异性.结果:成功构建了奇异变形菌的基因组文库,库容量达到1.1×105 CFU.阳性克隆的比例为95%,插入片段大小主要分布在200~500 bp的范围.对其中14个克隆进行了序列测定,其中5个片段与已知序列有一定的同源性,另外9个与已知序列没有同源性,特异性分析发现了几个较好的标识序列.结论:成功构建了奇异变形菌的基因组文库,利用该文库发现了奇异变形菌特异的序列.     

多重PCR特异检测布鲁氏菌方法的建立

目的建立一种快速检测布鲁氏菌的多重PCR方法,为临床快速检测、准确诊断布鲁氏菌提供依据。方法针对布鲁氏菌外膜蛋白31 kD、22 kD和2a基因,各设计一对引物,扩增片断大小分别为427 bp3、17 bp和830 bp。利用纯培养物和模拟标本,分析这3对引物的特异性和敏感性。结果3对引物均能特异扩增布鲁氏菌的DNA,31 kD、22 kD和2a,扩增纯培养物的敏感性分别为2.8×103、4.6×103和2.1×104cfu,将3对引物组合在一起建立了多重PCR方法,能从模拟的细胞和血液标本中扩增出特异的产物,对模拟的细胞感染标本的敏感性为1×105cfu,对模拟的血标本的敏感性为1.2×106cfu。结论针对外膜蛋白基因,建立了能特异地检测标本中布鲁氏菌的多重PCR检测方法。     

海南地区红色毛癣菌对5种抗真菌药敏感性检测

目的:检测本地区红色毛癣菌对常用抗真菌药物的敏感性,为临床诊疗提供依据.方法:依据CLSIM38-A2方案的微量稀释法,对本地区浅部感染分离的103株红色毛癣菌进行5种抗真菌药物体外敏感性测定,每株菌每个药物浓度均同时重复2孔.结果:体外药敏实验结果显示,红色毛癣菌对5种药物表现出良好的体外药物敏感性,其中特比萘芬(G...     

三重PCR鉴别牛、羊和猪3个布氏杆菌种的方法研究

布氏杆菌是引起布氏杆菌病的病原体.根据宿主范围、培养生物特性、氧化代谢和抗原特征等,布氏杆菌属主要分为6个种(specides)19个生物型(biovar)[1-2].     

布鲁菌重要毒力调控基因在环境刺激和细胞侵染过程中的转录研究

目的 了解dnaK、htrA、vjbR和gntR等布鲁菌的重要毒力调控基因的功能.方法 本研究利用定量RT-PCR的方法分析了dnaK、htrA、vjbR和gntR在酸等体外刺激条件下和巨噬细胞感染过程中的转录变化.结果 这些毒力调控基因在体外刺激条件下、侵染过程中可特异的诱导表达,但是它们在这些刺激条件和胞内不同时期的转录丰度不同.结论 dnaK、htrA、vjbR和gntR在布鲁菌感染过程的不同环节发挥作用.