骨调素和单核细胞趋化蛋白在大鼠梗阻性肾病中的表达及可能作用

目的:探讨骨调素(OPN)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)在大鼠梗阻性模型中的表达及其在肾脏纤维化发病机制中的作用.方法:采用-单侧输尿管结扎制造梗阻性肾病模型,分别于造模后7 d、14 d取肾组织,应用HE染色观察肾脏病理改变,免疫组化方法检测肾组织畔OPN和MCP-1蛋白的表达,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察肾组织中OPN mRNA和MCP-1 mRNA的变化.结果:OPN、MCP-1表达主要位于肾小管上皮细胞,随着梗阻时间的延长,肾组织中OPN、MCP-1蛋白和mRNA表达明显增加.结论:OPN、MCP-1蛋白和mRNA在梗阻性肾病大鼠肾组织表达明显增加介导炎症过程,参与肾间质纤维化.     

头皮脑回样病变畸形

目的提高对头皮脑回样病变畸形的认识和治疗水平。方法复习有关文献,对头皮脑回样病变畸形的病因、临床表现、诊断、分类和治疗进行了分析,采用切除后植皮或扩张头皮瓣修复治疗6例。结果6例病变切除彻底,随访无复发。其中2例植皮病例患者导致局部秃发,4例扩张头皮瓣修复外形满意。结论头皮脑回样病变畸形是一种罕见的头皮良性病变,头皮扩张术是修复治疗头皮脑回样病变的理想方法。     

原位肛门整形重建术的研究

目的：探讨改进的内外括约肌在原位肛门整形重建术中的应用及其手术效果。方法：改进包括：①肛门内括约肌改进为双层双环肌套；②肛门外括约肌改进为股薄肌采用“围巾式”环绕结肠末端一周，其远端剖为两条，一条缝合固定于耻骨韧带；另一条缝合固定于骶尾韧带，即为肛门外括约肌重建和外括约肌浅部和深部的重建。结果：38例术后肛门外形及功能和远期生活质量、生存率均更为满意。术后随访总优良率达94．73％；远期生存率达76．32％。结论：低位直肠癌Miles术后，同时行改进的内外括约肌原位肛门整形重建的效果是可行的，更接近正常的肛门解剖结构和生理功能。     

改进原位肛门整形重建术的临床研究

目的探讨采用改进的四联术原位肛门整形重建术的效果。方法38例低位直肠癌行Miles根治术后行一期改进的四联术原位肛门整形重建术,改进包括:①肛门内括约肌改进为双层双套环;②肛门外括约肌改进为肛门外括约肌浅部与深部重建;③直肠角改进为肛提肌切缘牢固地缝合于肛门括约肌外面与结肠前壁;④直肠瓣改进为三个人工直肠瓣。结果38例术后肛门外形、功能及远期生存率均更为优良,术后肛门功能测试的总优良率达94·73%,远期生存率高达76·32%。结论改进的四联术原位肛门重建术的效果良好,改进术式的设计也更符合正常解剖结构与生理功能。     

用SYBR Green I实时逆转录-聚合酶链反应定量检测人、小鼠精子中CatSper1 mRNA

目的:建立并优化SYBR GreenI实时RT-PCR体系,定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。方法:用TRIzol分别提取人、小鼠成熟精子中的总RNA,逆转录后用SYBR GreenI实时PCR定量检测CatSper1 mRNA。SYBR GreenI实时PCR采用普通PCR试剂,加入SYBR GreenI染料,优化退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例,并在PCR循环时采用四步法以消除引物二聚体的影响。优化完成后用不同浓度的精子cDNA为模板做标准曲线,以检测SYBR GreenI实时PCR的扩增效率。结果:定量检测CatSper1 mRNA的SYBR GreenI实时PCR体系适宜退火温度、Mg2+浓度及上、下游引物比例分别为63℃、3.0mmol/L和1∶1,四步法中采集荧光的温度为88℃。优化后用人和小鼠精子cDNA为模板做标准曲线分别为Y=-3.402log(X)+25.99和Y=-3.409log(X)+24.09,扩增效率分别为96.8%和96.5%,可定量检测人、小鼠成熟精子中的CatSper1 mRNA。结论:用普通的逆转录及PCR系统和试剂,建立了一种方便、廉价、可靠的SYBR GreenI实时荧光定量RT-PCR系统,可用于人、小鼠精子中CatSper1 mRNA定量检测。     

抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD28VH单链三特异抗体的胞内可溶表达、纯化及体外活性测定

目的　研究抗人卵巢癌 (ovariancarcinoma ,oc)×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体(singlechaintrispecificantibody,scTsAb)在大肠杆菌中的可溶表达与纯化及纯化后产物的活性测定 ,从而为其应用于卵巢癌治疗的临床研究打下基础。方法　将已构建的scTsAb表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3)Star菌株 ,采用低温 (30℃ )、低剂量IPTG(0 .2mmol L)诱导 ,进行胞内可溶表达。根据抗卵巢癌三特异抗体 (ocTsAb)等电点较高 (pI9.0 ) ,而菌体蛋白大多为酸性蛋白的特点 ,利用DEAE弱阴离子交换层析(pH8.0 )进行一步纯化 ,并利用ELISA及FACS的方法检测纯化后抗卵巢癌三特异抗体的活性。结果　(1)SDS PAGE鉴定低温诱导时可溶比例达到 5 6 %。 (2 )绝大多数菌体蛋白被DEAE层析柱吸附 ,而抗卵巢癌三特异抗体在穿透液中流出 ,SDS PAGE检测纯度达到 90 %。 (3)ELISA结果显示纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与重组CD2 8纯抗原 ,Jurkat(CD3 )细胞膜提取抗原 ,SKOV3细胞膜提取抗原均有特异性结合。 (4 )FACS结果证明纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与Jurkat(CD3 )活细胞、SKOV3活细胞有特异性结合。结论　低温诱导胞内可溶表达的抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体经弱阴离子交换层析一步纯化后仍保持原有免疫学活性 ,这     

股骨CT图像轮廓跟踪方法

目的 为重建和测量股骨的解剖结构，需要大量地读取CT图像的信息，以获得股骨轮廓的坐标值。方法本研究采用直方图阈值图像分割、Kirsh边缘提取法获得股骨的二值化轮廓图像。结果轮廓坐标的提取应用了“迷宫”边缘跟踪算法。结论本方法可大量、快捷、正确地提取图像轮廓信息。     

艾滋病发病机制中的细胞凋亡理论

有关HIV感染引起CD4’T淋巴细胞耗竭最终导致艾滋病的确切机制尚不清楚。目前研究最多的仍是细胞凋亡理论,本文就细胞凋亡在艾滋病发病中的作用,凋亡的可能机制两方面进行概述。     

静脉丙种球蛋白加地塞米松治疗小儿特发性血小板减少性紫癜临床观察及护理

目的探讨静脉丙种球蛋白(IVIG)加地塞米松治疗小儿特发性血小板减少性紫癜(ITP)的疗效及护理。方法对34例ITP患儿随机分为激素组和静脉丙种球蛋白加地塞米松组(简称丙球组)。结果丙球组出血症状改善迅速，血小板上升时间、峰值时间较激素组明显缩短，两组比较差异有显著意义。结论静脉丙种球蛋白加地塞米松治疗TIP疗效显著。     

大肠杆菌T蛋白PDH结构域的高效表达纯化与活性测定

 目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料。方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的GlutathioneSepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化。结果表达产物达菌体总蛋白的40%,可溶性目的产物得量为240mg·L^-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5%,GSTPDH融合蛋白的PDH的比活为38U·mg^-1。结论本法成功构建高效表达PDH菌株,表达量高,纯化度高,GST-PDH酶活性正常,为进一步研究奠定基础。