ERβ对小鼠阴茎海绵体血管内皮保护作用的实验研究

目的:初步探讨雌激素受体β(ERβ)对小鼠阴茎血管内皮的保护作用.方法:随机选取ERβ基因敲除(ERβKO)雄性小鼠和相应野生型雄性小鼠各12只,随机分为4组:正常对照组、ERβKO组、野生型+TNFα处理组和ERβKO +TNFα处理组.ERβKO组及正常对照组腹腔注射生理盐水,野生型+TNFα处理组和ERβKO+TNFα处理组给予TNFα 6μg/(kg·d)腹腔注射,连续14 d.观察阿朴吗啡诱导的自发勃起反应;制备阴茎组织切片,内皮细胞标志物CD34、vWF免疫组化染色观察海绵窦内皮细胞变化,TUNEL法检测海绵体组织细胞凋亡情况.结果:与正常对照组相比,ERβKO组勃起潜伏期延长(P＜0.05),但勃起次数无显著差异;ERβKO+ TNFα组与野生型+ TNFα组潜伏期显著延长(P＜0.05),勃起次数显著减少(P＜0.05),以ERβKO +TNFα组变化更显著.免疫组化结果显示,与正常对照组(CD34:3.00±0.00,vWF:2.75±0.50)比较,海绵体组织CD34、vWF蛋白表达在ERβKO组(CD34:2.25±0.50,vWF:2.00±0.00)、ERβKO +TNFα组(CD34:0.25±0.50,vWF:0.33±0.58)、野生型+TNFα组(CD34:1.50±0.58,vWF:1.25±0.50)均显著减少(P＜0.05),且ERβKO +TNFα组比野生型+TNFα组减少更显著(P＜0.05).仅在ERβKO +TNFα组海绵体发现凋亡细胞.结论:ERβ基因敲除后,尤其在内皮损伤因素TNFα作用下,小鼠阴茎血管内皮细胞减少,提示ERβ对阴茎海绵窦内皮具有保护效应.     

润滑障碍中的lncRNA⁃mRNA共表达网络的构建及功能预测

目的：通过构建阴道润滑障碍（lubrication disorder,LD）女性阴道上皮组织差异表达lncRNA?mRNA共表达网络,探索LD患者的潜在发病机制。方法：利用以|Log2FC|≥2且校正后P值＜0.05,鉴别LD和正常对照组之间的长链非编码RNA（long non?coding RNA,LncRNA）以及mRNA的表达谱,利用Cytoscape软件构建差异表达lncRNA及差异表达mRNA网络,采用Gene Ontology（GO）和KEGG Pathway分析共表达网络中mRNA的生物学功能。结果：通过下一代测序技术,根据|Log2FC|≥2且校正后P值＜0.05标准筛选出LD组和正常对照组中共计499条上调表达的lncRNA、337条下调表达的lncRNA,以及1 582条上调表达mRNA、633条下调表达的mRNA。随后,通过其中100个lncRNA与311个mRNA构建了基于差异表达的lncRNA和mRNA的共表达网络。最后,共表达网络的功能富集分析表明mRNA主要与心肌相关的疾病和功能有关。结论：LD的发病机制可能与血液循环功能障碍、局部肌肉功能障碍以及cGMP通路等有关,需要相关研究来进一步证实。     

pAdxsi-ERβ腺病毒转染对ERβKO小鼠阴茎海绵体血管内皮的影响

目的:探讨ERβ基因过表达对ERβKO小鼠阴茎血管内皮的影响及相关分子机制。方法:选取ERβKO雄性小鼠12只,随机分为两组:ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组和ERβKO+TNFα+空病毒组。ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组给予ERβ基因重组腺病毒转染处理14 d,ERβKO+TNFα+空病毒组转染空病毒作对照,同时两组均给予TNFα6μg/(kg·d)腹腔注射,连续14 d。采用APO法观察小鼠的阴茎勃起功能;免疫组化检测内皮标志物CD34、vWF的变化情况;RT-PCR、Western印迹和免疫组化检测eNOS-NO通路相关分子表达情况。结果:与ERβKO+TNFα+空病毒组相比,ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组小鼠的变化情况如下:①勃起次数增多(2.17±0.41 vs 0.50±0.55,P<0.05),勃起潜伏期缩短[(24.0±1.27)min vs(28.83±1.33)min,P<0.05];②内皮标志物CD34、vWF表达更丰富[(1.50±0.55;1.33±0.52)vs(0.67±0.52;0.50±0.55),P<0.05];③eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P均<0.05),RT-PCR与Western印迹结果相符合。结论:ERβ基因对阴茎血管内皮具有保护作用,eNOS-NO通路是其发挥作用的机制之一。     

一项有关中国女性子宫动静脉畸形(AVM)危险因素的回顾性研究

目的研究中国女性子宫动静脉畸形(AVM)的相关危险因素,为临床诊断、处理子宫AVM提供依据。方法对本院治疗子宫AVM的28例患者进行分析,分析术后出血天数、流产次数及手术方式等因素与AVM的关系。结果年龄、手术方式、术后出血天数、手术医院、流产次数以及孕周与AVM在统计学上均显著相关。术后出血天数、流产次数及手术方式是AVM的独立危险因素。结论AVM的发生与术后出血天数、流产次数及手术方式等因素有关,可以通过分析相关风险因素,判断AVM发生的可能性,为临床诊断、处理子宫AVM提供理论与数据指导。     

配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染状况研究

目的:人类乳头瘤病毒(HPV)是女性发生宫颈癌的必要病因,也与男性阴茎癌、口咽癌、肛门癌等密切相关,但是目前对男性HPV的研究较少。本文研究配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染状况,为临床制定HPV相关性疾病的防治措施提供科学依据。方法:收集2016年8~12月因配偶宫颈HPV感染阳性,南京医科大学附属妇产医院泌尿男科门诊就诊男性的相关资料。尼龙棉签拭子在阴茎头、冠状沟、包皮内板、阴茎体等处取样,运用凯普生物HPV分型检测试剂盒,采用PCR和膜杂交的方法,检测不同型别HPV感染情况。结果:去除不合格病例,共纳入139例患者信息。139例配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染率为83.5%。HPV感染类型以6,16,39,18,58,52型为主,分别占43.2%(60/139)、19.4%(27/139)、10.1%(14/139)、9.4%(13/139)、9.4%(13/139)、9.4%(13/139)。在配偶宫颈HPV感染阳性的男性中,包皮过长比率高达75.5%,但包皮正常和包皮过长男性HPV感染率没有显著差异(P0.05)。结论:配偶宫颈HPV感染阳性的男性是HPV感染的高危人群,有必要对此类人群进行筛查和治疗,以降低男女双方的HPV感染。     

FGFR3基因突变导致软骨发育不全的产前分子诊断

目的本研究对FGFR3（fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3）基因突变导致的软骨发育不全（ACH）家系的1例中期妊娠者进行产前分子诊断,以达到优生的目的。方法患者妻子于20孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水20ml,提取羊水细胞基因组DNA,对FGFR3基因外显子10进行PCR扩增并测序。结果该例胎儿FGFR3基因外显子10测序结果显示,胎儿带有与父亲一样的FGFR3基因突变（c.1138G〉A）,B超监测显示双顶径与孕周不相符,双顶径（PBD）值偏低,进一步证实了ACH,目前在医生的指导下已经顺利引产。结论软骨发育不全是一种少见的常染色体显性遗传病,对于有ACH风险的胎儿进行产前分子诊断非常重要,从而有效地避免患儿出生。     

COL 2A1基因突变致SEDC的产前分子诊断

目的本研究对COL2A1基因（typeⅡcollagen gene）G504S突变导致的先天性脊柱骨骺发育不良（SEDC）家系的1例中期妊娠者进行产前分子诊断,从而预防SEDC的发生。方法患者妻于20孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水10ml,提取羊水细胞基因组DNA。选择3个多态性STR位点,即D3S1358、D16S539和D21S11,排除母体细胞污染。在此基础上,对COL2A1基因外显子23进行扩增,PCR产物进行正、反向测序。结果该例胎儿COL2A1的外显子23测序结果显示,胎儿未带有与父亲同样的COL2A1基因突变。胎儿产前基因诊断结果与B超监测结果一致。结论对于有SEDC风险的胎儿进行产前分子诊断非常重要,可以在B超诊断前了解胎儿基因型并明确诊断。     

ERβ基因敲除对小鼠阴茎海绵体eNOS-NO通路基因表达的影响

目的:探讨雌激素受体β(ERβ)基因敲除对小鼠阴茎海绵体eNOS-NO通路基因表达的影响。方法:选取ERβ基因敲除(ERβKO)雄性小鼠和相应野生型雄性小鼠各12只,随机分为4组:正常对照组(A组)、ERβKO组(B组)、野生型+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理组(C组)和ERβKO+TNF-α处理组(D组)。C组和D组每日给予TNF-α6μg/kg腹腔注射,A组及B组则以等量生理盐水替代,连续14 d。采用RT-PCR技术检测小鼠阴茎组织通路相关分子:eNOS、小窝蛋白-1(caveolin-1)、钙调蛋白(Cam)mRNA表达情况;Western blotting检测小鼠阴茎组织eNOS-NO通路相关分子蛋白表达水平的变化情况。结果:RT-PCR结果与Western blotting结果相符:与A组相比,B组eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P<0.05);TNF-α给药后,与C组比较,D组的eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P<0.05)。结论:ERβ基因敲除后,尤其在内皮损伤因素TNF-α作用下,eNOS-NO通路表达下调,提示ERβ对阴茎海绵窦内皮具有保护效应。