人类脂肪来源成体干细胞体外定向成软骨的诱导实验

目的 评价人类脂肪来源成体干细胞(hADASc)体外培养转基因定向成软骨诱导的可行性.方法 hADASc体外培养后行PGL3.转化生长因子β1(TGF-β1)基因转染并鉴定,检测转染细胞Lueiferase活性相对光读数(RLU),再行反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测和抗Ⅱ型胶原免疫组织化学染色(实验组:转染的hADASc,同比对照组:加入软骨细胞定向诱导培养基的未转染hADASc;阴性对照组:未转染的hADASc),自动图像分析系统分析免疫染色图片并计算阳性颗粒(PU)值.结果 人类皮下脂肪体外分离培养出具有干细胞特征的有核组织细胞.hADASc转染后,实验组测得RLU值(9 212.583±315.240)高于阴性对照组(317.000±20.710,P＜0.01).RT-PCR结果显示转染的hADASc表达TGF-β1;免疫染色结果显示,实验组与同比对照组呈阳性反应,且两组PU值(13.864±2.416,13.637±2.548)均与阴性对照组的PU值差异有统计学意义(6.013±0.827,P＜0.05).结论 人类皮下脂肪体外分离培养出具有干细胞特征的有核组织细胞.PGL3-TGF-β1基因转染的hADASc可表达TGF-β1.内源性TGF-β1可诱导hADASc分泌Ⅱ型胶原蛋白,与外源性TGF-β1作用相类似.     

血清miR-381在乳腺癌骨转移患者中的表达水平

目的探讨血清miR-381在乳腺癌骨转移患者中的表达及临床意义。方法收集东莞市塘厦医院和南方医科大学第三附属医院在2015年7月到2017年6月收治的乳腺癌患者外周血血清样本120例,其中乳腺癌骨转移患者60例,乳腺癌非骨转移患者60例。实时荧光定量PCR检测miR-381在乳腺癌患者血清中的表达,并分析其与乳腺癌骨转移患者的骨转移程度以及骨痛程度的关系,ROC分析血清miR-381相对表达水平对乳腺癌骨转移患者的诊断作用。结果与乳腺癌非骨转移患者相比,乳腺癌骨转移患者血清中miR-381的相对表达水平显著降低(P0.001);且乳腺癌患者血清中miR-381的相对表达水平越低,乳腺癌患者骨转移程度以及骨痛程度越高;ROC分析表明乳腺癌患者血清中miR-381的相对表达水平诊断乳腺癌骨转移的曲线下面积为0.876(95%CI:0.795~0.957),当乳腺癌患者血清中miR-381相对表达水平为3.44时,其敏感度和特异性分别为77.5%和93.4%。结论血清miR-381在乳腺癌骨转移患者中的相对表达水平明显降低,表达水平与骨转移程度相关。     

全髋关节置换治疗系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死6例

背景:全髋关节置换是目前治疗髋关节疾患终末期的主要方法,疗效确切,但是对于伴有股骨头缺血性坏死的系统性红斑狼疮患者,常合并如严重骨质疏松症等其他疾患,目前国内外对于此类患者接受髋关节置换的效果尚不清楚.目的:探讨系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死行全髋关节置换的临床效果.方法:回顾性分析本科1998-06/2008-06行全髋关节置换的系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性骨坏死患者临床资料.共6例(共6髋)获得随访,其中男1例,女5例,年龄46(28～67)岁,5髋使用生物固定型假体,1髋使用骨水泥型假体.治疗效果评估选用WOMAC骨关节炎指数,SF-36和Harris评分标准.结果与结论:平均手术时间为141(85～210)min,平均出血量为522(180～1500)mL;平均随访时间3.5(1～10)年,1例于术后1.5年死于颅内出血.术后早期出现1例泌尿系统感染,其他病例在随访期间无假体感染、松动、脱位及深静脉血栓等并发症出现.随访时Harris评分、WOMAC骨性关节炎指数、SF-36评分均较术前明显改善(P<0.05).结果提示全髋关节置换可明显提高系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死患者的生活质量,中期临床效果良好.     

全髋关节置换治疗系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死6例

背景：全髋关节置换是目前治疗髋关节疾患终末期的主要方法,疗效确切,但是对于伴有股骨头缺血性坏死的系统性红斑狼疮患者,常合并如严重骨质疏松症等其他疾患,目前国内外对于此类患者接受髋关节置换的效果尚不清楚。 目的：探讨系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死行全髋关节置换的临床效果。 方法：回顾性分析本科1998-06/2008-06行全髋关节置换的系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性骨坏死患者临床资料。共6例(共6髋)获得随访,其中男1例,女5例,年龄46(28~67)岁,5髋使用生物固定型假体,1髋使用骨水泥型假体。治疗效果评估选用WOMAC骨关节炎指数,SF-36和Harris评分标准。 结果与结论：平均手术时间为141 (85~210) min,平均出血量为522(180~1 500) mL;平均随访时间3.5(1~10)年,1例于术后1.5年死于颅内出血。术后早期出现1例泌尿系统感染,其他病例在随访期间无假体感染、松动、脱位及深静脉血栓等并发症出现。随访时Harris评分、WOMAC骨性关节炎指数、SF-36评分均较术前明显改善(P < 0.05)。结果提示全髋关节置换可明显提高系统性红斑狼疮合并股骨头缺血性坏死患者的生活质量,中期临床效果良好。     

应用微阵列芯片分析人脂肪源干细胞成骨分化miRNA表达差异及靶基因预测

目的运用微阵列芯片技术分析人脂肪源干细胞在成骨诱导分化前后miRNA表达谱的差异,并预测其靶基因。方法提取人脂肪源干细胞成骨分化前后的miRNA,分别与哺乳动物miRNA芯片V3.0杂交,应用SAM和Cluster软件进行数据分析,对有显著差异的miRNA进行实时荧光定量PCR验证,并通过miRBase数据库预测其靶基因。结果共筛选出9个差异表达miRNA,has-miR-17、has-miR-20a、has-miR-20b、has-miR-106a、has-miR-199b-5p显著上调,has-miR-125a-5p、has-miR-125b、has-miR-31、has-miR-193a-3p显著下调。结论人脂肪源干细胞成骨诱导分化前后存在明显的miRNA差异表达,预测到部分靶基因。     

骨性关节炎和炎症性关节炎行全膝关节置换翻修术临床效果的比较及相关分析

目的对应用单一翻修假体系统行膝关节置换翻修术的骨性关节炎与炎症性关节炎的临床材料进行汇总分析、对比。方法1994至2000年间,共69例患者71膝在芬兰坦配雷大学医学院医院应用翻修假体TCⅢ行全膝关节置换翻修术。56膝为女性,16膝为男性,平均年龄69．1岁（36～85岁）,平均随访时间为5.9年（3．0—10．2年）;16膝为炎症性关节炎,55膝为骨性关节炎,初次手术和翻修术的时间间隔平均为6．8年。临床评估参照KSS评分系统,再次翻修、截肢和死亡视为随访终止。结果所有患者术后1年和最终随访时的膝关节总评分、功能评分、活动范围、疼痛评分、行走评分及上楼评分等与术前相比差异有统计学意义（P〈0．001）。尽管23例假体周围有无症状性骨吸收线,但是关节均无明显结构上的松脱。并发症包括4例术后感染,1例髌骨疼痛综合症,1例髌腱断裂。以再次翻修作为终点,假体5年生存率为95％,8年生存率为94％。最终随访时,骨性关节炎患者的各项数据比炎症性关节炎患者稍好,但统计学分析结果示两组之间的差异无统计学意义。结论尽管炎症性关节炎会导致患者韧带松弛,容易感染,骨质破坏,一般情况较差,但是其行全膝关节置换翻修术的疗效与骨关节炎相接近。     

全锁骨或次全锁骨切除及个体化重建治疗锁骨原发恶性肿瘤

目的探讨修复锁骨原发恶性肿瘤整块切除术后锁骨区巨大骨与软组织缺损的方法及肩关节功能疗效。方法回顾性分析2018年1月至2021年12月收治的3例锁骨原发恶性肿瘤行肿瘤整块切除(全锁骨或次全锁骨切除)及个体化修复锁骨区骨与软组织缺损的患者资料, 均为女性, 年龄分别为48、57、14岁。肿瘤类型为骨肉瘤、孤立性浆细胞瘤、多形性未分化肉瘤。术后辅助化疗及肩关节康复锻炼, 评估肿瘤转归及肩关节活动, 功能评分采用骨与软组织肿瘤功能评分(Musculoskeletal Tumor Society score, MSTS)、Constant-Murley评分及美国加州大学(University of California, Los Angeles, UCLA)肩关节评分系统。结果 3例均获得随访, 随访时间分别为33、23、8个月, 至末次随访均未见肿瘤复发及转移。在肿瘤切除后, 1例骨肉瘤及1例多形性未分化肉瘤患者行锁骨钢板联合先进人工韧带加强系统(ligament advanced reinforcement system, LARS)重建, 1例孤立性浆细胞瘤患者行LARS韧带重建, 末次...     

人类脂肪来源成体干细胞体外定向成软骨的诱导实验

Objective To investigate the feasibility of inducing human adipose derived adult stem cells (hADASc) into chondrocytes by gene transfection.Methods hADASc were cultured in vitro, and transfected with gene PGL3-TGF-pl, whose Luceferase activity (RUL value) was measured.PT-PCR was used to monitor the expression of tranfected hADASc.Anti collagen II immunohistochemical staining was performed in the experimental group (transfected hADASc) , active control group (untransfected hADASc cultured in chondrocytes induction medium) and negative control group (untransfected hADASc cultured in conventional medium).The immuno-staining image was analyzed with an automated imaging analysis system and computed for PU values.Results Nucleated tissue cells with features of stem cells were isolated from in vitro culture of human subcutaneous adipose tissue.The RUL value of the experimental group (9 212.583±315.240) was higher than that of the control group(317.000?0.710, P＜0.01).RT-PCR revealed that the transfected hADASc could express the TGF-β1.Anti collagen Ⅱ immunohistochemical staining was positive in experimental group and active control group, with PU values (13.864±2.416 and 13.637±2.548,respectively) statistically different from that of the negative control group (6.013 ±0.827, P＜0.05).Conclusions Nucleated tissue cells with features of stem cells can be isolated from culture of human subcutaneous adipose tissue in vitro.The PGL3-TGF-β1-transfected hADASc may express TGF-β1.The endogenous TGF-β1-induced hADASc produces collagen Ⅱ , with similar actions of exogenous TGF-β1.     

定制节段人工假体复合结构骨移植重建骨干肿瘤术后大段骨缺损的临床研究

目的 评价应用定制节段型人工假体复合大段结构骨移植重建骨干恶性肿瘤切除术后骨缺损的临床疗效。方法 回顾性分析我院骨肿瘤科2014年1月至2019年3月期间,采用定制节段型人工假体复合大段结构骨移植重建骨干恶性肿瘤切除术后骨缺损的病人共6例（股骨3例,胫骨2例,肱骨1例）,其中2例采用大段冻干异体骨,4例采用自体游离腓骨结构植骨。采用美国骨肿瘤学会评分系统（Musculoskeletal Tumor Society 93, MSTS 93）评价术后功能。结果 所有病人均未发生围手术期并发症,且均获得随访,平均随访时间为23.8个月（1~61个月）。术后根据肿瘤性质继续辅助化疗等治疗,随访期内无复发,5例无瘤生存,1例死于原发乳腺癌肺转移（术后25个月）,假体生存率为100%,4例术后6个月植骨愈合,术后MSTS 93评分平均为27分。结论 规范治疗和切除骨干恶性肿瘤后,采用定制节段型人工假体复合大段骨移植重建骨干骨缺损,实现即刻稳定重建,保留关节功能,中期植骨愈合后实现远期生物重建,并发症少,临床疗效满意。