一种适用于大规模高效快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法

目的:寻求适合于毛囊组织工程的大规模高效快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法。方法:将含有毛囊中下部的皮下组织剪碎,加入胶原酶Ⅰ消化2h,悬液经400目筛网过滤,收集被筛网截留的毛乳头进行培养,计算其贴壁率,绘制细胞生长曲线,并与显微解剖法相比较。结果:用这种方法成功分离培养了人头皮毛乳头细胞。结论:消化过滤法是一种能够大规模高效、快速分离培养人头皮毛乳头细胞的方法。     

颞肌神经血管定位在颞肌筋膜法动力性矫正晚期面神经麻痹中的意义

背景颢肌筋膜法动力性矫正晚期面神经麻痹(以下简称面瘫)的手术中,存在颞肌血管神经定位困难的问题.为明确颞肌的精细解剖而设计了此次实验.目的通过分组进行人类颞肌的血管神经分束研究,以阐明颞肌动力修复晚期面瘫的显微解剖应用基础.设计随机对照的研究.单位南方医科大学南方医院整形外科及解剖教研室.对象收集2000年自愿遗体捐助的20具24 h内死亡的新鲜尸体头部标本,其中男性12具,女性8具,年龄在16～50岁,平均30岁,死因均为感染或肿瘤等疾病,随机分为4组.方法分别用氧化铅、墨汁或甲基丙烯酸树脂进行血管灌注,并进行神经显微解剖染色,结果拍摄照片,在计算机中进行图像叠加,从而形成血管神经的分束构筑图.主要观察指标①颞肌形态.②颢肌前动脉、颞深后动脉及颞中动脉直径、长度和分布面积百分比.③颞深前神经、颞深后神经及颞中神经直径、长度和分布面积百分比.④颞肌静脉的分布.⑤颞肌神经血管的分束.结果颞肌具有可利用的、有独立神经血管支配的三个肌肉分区,互相之间有丰富的吻合支.结论晚期面瘫眼、鼻和口部畸形的动力矫正可选用对应的颞肌神经血管束一期完成.     

毛发诱导结合自体毛囊单位移植技术进行毛发定向重建的研究

目的 将异位诱导形成的毛发组织进行移植,实现毛发的定向重建.方法 制备新生C57鼠的皮肤细胞悬液注射于裸鼠体内,诱导形成皮下异位毛发组织,取出后在体视显微镜下分离成单个毛囊单位,移植至裸鼠体表,并进行大体观察和组织学检测.结果 按照预定密度移植后的毛发成活良好并呈周期性生长,组织学可见各时期相应的毛囊形态.结论 诱导形成的毛发组织可以作为移植物,通过毛囊单位移植的方式,实现毛发组织密度和方向的可控性重建.     

富含血小板血浆对小鼠触须毛乳头细胞活性和毛囊重建的影响

目的 探讨富含血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)对小鼠触须毛乳头细胞(dermal papilla cells,DPCs)活性和毛囊重建的影响.方法 将采用2步离心法制备的PRP与采用显微解剖法获得的DPCs共培养,显微镜下观察细胞的形态变化,通过MTT法检测第4和第8代DPCs细胞活性.将新鲜分离的C57BL/6J小鼠背部表皮细胞与第4代的DPCs混合制成含有不同终浓度PRP的细胞悬液并移植至裸鼠体内,观察移植区域毛发形成的时间,4周后处死裸鼠,HE染色计算各组毛囊数量.结果 通过2步离心法获得的PRP中含有的血小板数量约为全血的8.3倍,与未加PRP的对照组比较,终浓度为5％和10％ PRP组不但可促进前6代DPCs的聚集性生长,还可促进前8代DPCs的增殖.在裸鼠体内实验中,10％ PRP组长出毛发的最早时间和形成毛囊的数量分别为(18±1)d和(344±27)根,对照组为(20±1)d和(288±35)根,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 PRP既能够增强DPCs的活性,也有助于毛囊的重建.     

毛囊细胞混合物移植诱导裸鼠毛囊样结构形成

目的 观察毛囊细胞复合物移植诱导裸鼠毛发再生和毛囊重建情况.方法 采用裸鼠移植技术,将混合分离出来的毛囊细胞,包括毛囊毛乳头细胞、毛囊外根鞘细胞、毛囊真皮鞘细胞和毛囊真皮成纤维细胞等,移植到裸鼠皮下,观察毛囊形成情况.结果 在裸鼠的皮肤切片中可以看到较为完整的毛囊结构形成.结论 毛囊细胞混合物可以在体内诱导出毛囊样结构形成.     

成年鼠被毛毛乳头细胞分离方法的建立与评价

目的 寻求一种简单高效的分离培养小鼠被毛毛乳头细胞的方法.方法 取5周龄C57小鼠背部皮肤,刮去毛发后予0.2％Ⅰ型胶原酶37℃消化2h,刮下毛球部,经过2次Ficoll密度梯度离心后,得到纯净的毛乳头进行培养.检测毛乳头贴壁率、毛乳头细胞特异性标记表达及其体内毛囊重建能力.结果 该分离方法能显著降低工作强度,减少污染机会,获得的毛乳头贴壁快、细胞迁出快.qRT-PCR、细胞免疫荧光实验结果均证实体外培养的小鼠被毛毛乳头细胞可表达与毛囊诱导能力相关的特异性标记物ALP、β-catenin及Versican,且与触须毛乳头细胞相比差异无统计学意义(P＞0.05).体外培养的小鼠被毛毛乳头细胞具有诱导毛囊再生的能力.结论 胶原酶消化结合Ficoll梯度离心是一种简单、有效地分离获取小鼠背部毛乳头的方法.     

鼻部的电脑整形美容显像系统测量

鼻部的电脑整形美容显像系统测量胡志奇罗锦辉高建华李建秋在隆鼻术中如何判断鼻外形的完美，以往主要凭个人的审美观和手术经验，或采用一些简单的工具如直尺、两角规等进行比较粗糙的测量。自８０年代国外开始应用电脑行整形美容手术设计后［１～３］，有了精确的依据，...