抗幽门螺杆菌单克隆抗体与人血小板交叉识别的实验研究

目的：研究抗幽门螺杆菌（Hp）尿素酶B（ureB）单克隆抗体与血小板膜糖蛋白（GP）的结合情况。方法：运用Western blot、流式细胞术（FCM）和免疫放射法（IRMA）分析血小板膜GP成分与幽门螺杆菌ttreB成分的相关性。结果：抗幽门螺杆菌ureB单抗1F11与血小板成分GPⅢa、P-选择素有一定程度结合，但与GPIb、GPⅡb及GPⅥ无结合。结论：血小板成分GPⅢa、P-选择素与幽门螺杆菌ureB存在交叉识别的共同抗原表位，提示Hp感染与部分特发性血小板减少性紫癜（ITP）的发病机理有关。     

Raji 细胞系特异性Fab噬菌体抗体库的构建及筛选

目的构建针对B细胞淋巴瘤Raji细胞系噬菌体抗体库并从中筛选出特异性的抗体。方法以Raji细胞免疫BALB/c小鼠,RT-PCR法从脾淋巴细胞中扩增抗体轻链к和重链Fd基因。经SacI/XbaI和XhoI/SpeI双酶切,依次克隆入噬菌体载体pComb3H-SS中,并电转化大肠杆菌XL1-Blue,以辅助噬菌体VCSM13进行超感染,构建B细胞淋巴瘤Raji细胞系特异性Fab噬菌体抗体库。以Raji细胞为抗原进行筛选,获得抗Raji细胞的抗体,通过ELISA法进行抗原结合活性的测定,并对所得阳性克隆进行基因测序分析。结果构建了容量为2.18×107的抗人B细胞淋巴瘤Raji细胞系的Fab噬菌体抗体库,并筛选获得了与Raji细胞系特异性识别结合的8株阳性克隆。对其中两个阳性克隆进行基因序列分析,结果显示其重链可变区、轻链可变区分别与免疫球蛋白基因库中已注册的鼠源性免疫球蛋白重链可变区和轻链可变区序列具有高度同源性。结论成功地构建Fab噬菌体抗体库并筛选出针对Raji细胞系膜抗原的抗体,为进一步研究B细胞淋巴瘤的免疫治疗提供了实验基础。     

抗人尿激酶受体单克隆抗体的制备与鉴定

目的　制备抗人尿激酶受体单克隆抗体,为今后ｕＰＡＲ 病理生理作用及临床意义的研究提供新的手段。方法　利用杂交瘤技术,用经ＰＭＡ刺激的Ｕ９３７ 细胞与可溶性尿激酶受体（ｓｕＰＡＲ）免疫Ｂａｌｂ／ｃ 小鼠,与ＳＰ２／０ 细胞融合。结果　获得国内第１ 组４ 株抗人尿激酶受体（ｕＰＡＲ）单抗,分别命名为ＳＺ－ ９８、ＳＺ－ ９９ 、ＳＺ－ １００ 、ＳＺ－ １０１。结论　４ 株单抗均能与ｕＰＡＲ 特异性结合,能与Ｕ９３７ 细胞及经ＰＭＡ作用的Ｋ５６２ 细胞反应。ＳＺ－ １０１ 与国外抗ｕＰＡＲ单抗３９３６ 有相同的ｕＰＡＲ 结合位点;而ＳＺ－９８、ＳＺ－ ９９ 与ＳＺ－ １００ 在ｕＰＡＲ上有不同的结合位点     

高效液相色谱法测定益髓胶囊中淫羊藿甙含量

益髓胶囊是根据祖国医学理论研制的中药复方制剂，主治老年性骨质疏松症等。为了保证药品质量，选择其中主要成分淫羊藿甙作为质控指标，采用高效液相色谱法测定了淫羊藿甙的含量。1实验部分1．1仪器与试剂：LC－6A液相色谱仪，SPD－6AVUV－VIS分光光度检测器，CR－3A数据处理仪。乙腈为色谱纯一级（山东禹王实业总公司化学试剂厂）；磷酸盐、三乙胺为国产分析纯；淫羊藿甙标准品（中国药品生物制品检定所）；水为二次蒸馏水。1．2样品处理：取干燥至恒重的本品0．2g，精密称定，加无水乙醇20mL，回流1h，连续2次，过滤，合并滤液，…     

hHCN2基因的表达和电生理记录

目的将hHCN2基因有效转染到HEK293细胞，建立一种研究心肌离子通道的有效模型。方法采用Lipofactamine2000脂质体将hHCN2基因转染HEK293细胞。运用全细胞膜片钳技术检测克隆hHCN2基因表达的情况。结果pcDNA3-hHCN4真核表达载体转染HEK293细胞3d后，记录到转染成功的hHCN2基因编码的通道电流。结论该实验采用的技术稳定可靠，为开展克隆离子通道结构和功能关系的研究奠定了基础。     

肺癌细胞系内皮蛋白C受体的表达及其意义

目的 从细胞、蛋白和基因三个水平分析内皮蛋白C受体（endothelial protein C receptor，EPCR）在肺癌细胞系的表达。方法 以EA．hy926内皮细胞作阳性对照，人胚肺W138细胞作阴性对照，通过流式细胞术、West-ern．blot及半定量逆转录-聚合酶链反应分析EPCR在6种肺癌细胞系的表达水平。结果 6株肺癌细胞系均有EPCR的表达。高转移肺癌95D细胞表达最高。结论 EPCR的表达是肺癌细胞的重要特征，可能与肺癌增殖及转移有关。     

煦少火注射液对急性心肌梗死犬血浆ET-1、TXB2/6-keto-PGF1α的影响

目的探讨煦少火注射液(XSH)对急性心肌梗死(AMI)犬的作用机理.方法成年家犬随机分为5组,用结扎LAD方法造成犬AMI模型,采用静脉点滴给药,检测犬冠脉流量(CF)、血浆内皮素(ET-1)、血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)的含量,并进行组间比较.结果XSH组ET-1、TXB2/6-keto-PGF1α显著低于模型对照组,冠脉流量高于模型对照组.结论XSH可增加冠脉流量,抗血小板聚集,扩张血管,改善血流动力学,有利于调节和维持心肌氧代谢和能量的供需平衡,对心肌缺血的心脏具有保护性抑制作用.     

乌鸡白凤丸对动脉硬化家兔主动脉平滑肌细胞凋亡及调节基因表达的影响

目的:研究乌鸡白凤丸对动脉硬化家免主动脉平滑肌细胞凋亡及调节基因表达的影响.方法:用高脂饮食喂饲家兔复制动脉粥样硬化模型,检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、apoA1、apoB100含量,用流式细胞仪观察家兔主动脉平滑肌细胞凋亡率、增殖率及相关凋亡基因蛋白bcl-2、fas、bax表达的变化.结果:乌鸡白凤丸0.5/kg、1.0/kg能使高脂家免血清TC、TG、LDL、apoB100、AI、细胞凋亡率、细胞增殖率均明显降低,fas、bax、bcl-2基因蛋白表达明显增高.结论:乌鸡白凤丸拮抗动脉粥样硬化形成的机制与其调节主动脉平滑肌细胞凋亡相关基因蛋白bcl-2、fas、bax的平衡,抑制平滑肌细胞凋亡有关.     

塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响

目的:探讨塞来昔布对实验性结肠癌原位移植瘤生长及血管形成的影响。方法:使用对数生长期的人结肠癌细胞(HT-29)于裸鼠皮下接种成瘤后原位种植。术后随机分为对照组(C组)及塞来昔布高、中、低剂量组(H、M、L组)共四组进行研究。结果:24只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%,比较各组原位移植瘤体积和瘤质量差异有统计学意义,P值均<0·05。L、M和H组的抑瘤率分别为25·30%、38·80%和76·92%,与对照组比较差异有统计学意义,P=0·000,且存在明显的剂量依赖。干预组瘤组织中MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量与对照组相比差异有统计学意义,P值分别为0·050、0·050、0·050和0·010,随着剂量增加,MVD、VEGFmRNA、MMP-2mRNA和匀浆上清中PGE2含量逐渐降低。瘤组织中PGE2含量与瘤质量,以及MVD与VEGFmRNA、MMP-2mRNA均存在显著的正相关性,r=0·8814,P=0·000;r=0·8573,P=0·000;r=0·6427,P=0·001。结论:塞来昔布通过抑制人结肠癌裸鼠原位移植瘤环氧化酶-2活性,抑制PGE2合成、VEGFmRNA和MMP-2mRNA表达,抑制肿瘤的血管形成,从而对结肠癌的生长有抑制作用。     

胶原结合试验在血管性血友病诊断和分型中的应用

血管性血友病 (vWD)是最常见的遗传性出血性疾病之一 ,是由于血浆中vW因子 (vonWillebrandfactor,vWF)质或量的异常而致。vWD具有高度异质性 ,其诊断必须依靠vWF质和量的检测 ,特别是 1型和 2AvWD在临床诊断中存在一定困难。我们探讨了vWF胶原结合试验 (vWF∶CBA)在vWD的诊断和分型中的意义。对象和方法1　研究对象　vWD患者 2 6名 ,均为苏州大学附属一院门诊病例 ,1型vWD 10名 ,2A型vWD 10名 ,3型vWD 6名 ,根据1994年国际血栓与止血委员会vWD的诊断和分型标准而确诊[1 ] 。 2 0名正常献血员作为对照研究。2　试剂和仪器　Ⅲ…