茜草酸甙中甙元的化学结构分析

上文中叙述了从茜草提取物中分离出二个具有使正常狗外周血白细胞升高作用的甙——茜草酸甙Ⅰ及Ⅱ,但根据其光谱及化学数据还不能对其结构作出推断。为此,必须先经水解,分离出甙元或其衍生物,才能进行化学结构的分析。我们采用的分离流程见图1。依此分离出甙元及甙元的几种衍生物,进行化学结构的探讨。     

重组巴斯德毕赤酵母高密度培养中铵离子浓度的影响

采用Mut^s表型的重组毕赤酵母生产血管生长抑制素，表达阶段流加甘油—甲醇混合碳源以提高菌体密度和血管生长抑制素的表达水平，菌体密度可达174g／L，约是表达阶段采用甲醇为单一碳源的发酵过程的3倍。菌体密度的提高导致表达阶段发酵液中铵离子浓度下降很快，当发酵液中的铵离子浓度低至40mmol／L时，影响了血管生长抑制素的表达。改变pH调节方式并在发酵后期添加25mmol／L(NH4)2SO4使发酵液中铵离子浓度维持在150mmol／L以上，血管生长抑制素的表达产量达到108mg／L。     

同一乙型肝炎患者体内HBV S基因的多态性

同一乙型肝炎患者体内ＨＢＶＳ基因的多态性房德兴甘人宝李载平翟春生周宗安分析已发表的ＨＢＶ全基因组或部分基因序列可以看出即使同一亚型也有很大差异，建立中国人自然感染ＨＢＶ的基因库对于该病毒的变异研究具有极其重要的意义，采用ＰＣＲ扩增、Ｍ１３噬菌体克隆和...     

中国地方株人乳头瘤病毒16型E7基因一级结构及其变异

从湖北地区一宫颈癌活检组织中提取ＤＮＡ，采取加端聚合链反应（Ａｄｄ－ｏｎ ＰＣＲ）技术，获得了人乳头瘤病毒１６型E７基因（ＨＰＶＩ６Ｅ７）。将该基因克隆于载体ｐＵＣ１８后，进行了该基因一级结构顺序分析。完整的ＨＰＶ１６Ｅ７湖北株基因（ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ）全长２９４ｂｐ，与已发表的德国株（ＧＳ）大小一致，但其核苷酸顺序中有２处发生了变异，均为Ｃ→Ｔ变异。第４３位ＣＡＡ→ＴＡＡ使相应的谷氨酰胺密码子变为终止密码，形成无义突变（Ｎｏｎｓｅｎｓｅｍｕｔａｔｉｏｎ）。将重组质粒中０．３ｋｂ的ＨＰＶ１６Ｅ７基因在表达载体ＰＷＲ５９０－１中进行克隆，经诱导使重组表达质粒在大肠杆菌中高效表达，得到了预计的、分子量约为６９×１０~３的融合蛋白。该蛋白的表达量占菌体总蛋白量的３０％左右。该试验表明ＨＰＶ１６Ｅ７一级结构以及所编码的蛋白多肽在不同的国家和／或不同的地区可能存在着差异。本文首次报道了中国地方株ＨＰＶ１６Ｅ７基因的一级结构。     

重组人表皮生长因子(rhEGF)对胃癌细胞生长作用的研究

目的旨在探讨ＥＧＦ对人胃癌细胞生长的影响。方法采用重组人表皮生长因子（ｒｈＥＧＦ）作用于人胃粘膜正常细胞株３Ｔ３、腺癌细胞株Ｎ２８,Ｎ４５和ＳＧＣ７９０１,通过ＭＴＴ活细胞染色法检测细胞生长率。结果ｒｈＥＧＦ在０．０５～１００μｇ／ｍｌ浓度范围内对正常３Ｔ３细胞有明显促进增长的作用,而对胃癌细胞则有部分抑制细胞生长的效应,且此效应与细胞分化程度有关。结论ＥＧＦ对实验动物的肿瘤生长有抑制作用。     

携带adr和adw两种亚型乙型肝炎病毒的病例

应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）扩增了一例疫苗保护失败的乙型肝炎病毒持续携带者及其母亲产前血清中ＨＢＶ Ｓ基因，并将其克隆入Ｍ１３ｍｐ１８中进行序列分析。发现患者及其母亲血清中均存在ａｄｒ和ａｄｗ两种亚型的ＨＢＶ ＤＮＡ。由其Ｓ基因推测出的氨基酸序列也分别与已报道的ａｄｒ和ａｄｗ两种亚型相符合。患者血清中ａｄｗ亚型存在第５８５位核苷酸Ａ变为Ｃ的点突变，导致Ｓ基因主蛋白第１４４位天门冬氨酸变为丙氨酸，并     

免疫介导再生障碍性贫血小鼠IL-3和IL-3受体变化的研究

本研究目的是为再生障碍性的贫血的临床治疗提供新的思路。建立了免疫介导再生障碍性贫血小鼠模型 ,用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定植物血凝素 (PHA)刺激的再生障碍性贫血小鼠脾细胞培养上清液中IL 3,以点杂交法对其靶细胞受体进行半定量分析。结果表明 ,用植物血凝素 (PHA)刺激的再生障碍性小鼠脾细胞培养上清液中IL 3含量高于正常对照 ,二者之间有明显差异 (P <0 .0 0 1) ;其靶细胞IL 3受体的表达量明显低于正常对照。结论 :IL 3靶细胞的IL 3受体水平在再生障碍性贫血的治疗中起着重要的作用。     

葡萄糖供应速率对大肠杆菌表达及分泌人表皮生长因子的影响

采用一株大肠杆菌BL 21(DE 3)[pBLMVL 2EGF]生产人表皮生长因子(hEGF),其中hEGF表达由PL启动子控制并通过phoA信号肽分泌到胞外。实验结果表明:诱导阶段以恒定比供应速率流加葡萄糖时,流加速率对hEGF的表达和分泌有很大影响。当葡萄糖比供应速率为0.122g/(g.h)时,hEGF表达水平最低,分泌效率最差,只有37.5%;随着葡萄糖比供应速率的增加,胞外和胞内hEGF比生产速率明显增加,当葡萄糖比供应速率为0.196 g/(g.h)时,单位菌体产生的hEGF水平最高(121.6 m g/g),其中分泌至胞外的hEGF占42%。此外,诱导前补充有机氮源有利于提高诱导初始hEGF的生产速率。     

Muts型基因重组巴斯德毕赤酵母高密度发酵过程中甲醇流加的控制

在采用Muts 表型基因重组巴斯德毕赤酵母 (Pichiapastoris)发酵生产血管生长抑制因子(angiostatin)的过程中 ,诱导表达阶段甲醇的质量浓度对血管生长抑制因子的表达至关重要 .因重组Muts 型巴斯德毕赤酵母利用甲醇极慢 ,按文献方法流加甲醇时 ,甲醇逐渐积累达 30 g/L ,血管生长抑制素表达水平仅为 4mg/L .采用甲醇检测与控制系统对甲醇流加进行反馈控制后 ,甲醇质量浓度可稳定控制在设定范围 .采用此系统控制诱导阶段的甲醇流加 ,同时手动流加适量甘油以促进细胞生长 ,血管生长抑制因子表达水平量最高可达 89mg/L .