胸腔镜下行左颈胸交感神经节切除治疗长QT综合征一例

胸腔镜下行左颈胸交感神经节切除治疗长ＱＴ综合征一例秦永文郑成竹沈炎明邓小明金爱娟曹江章同华患者女，１７岁，于１９９３年７月在学校跑步１０米左右突然两眼黑蒙、晕厥，历时２～３分钟，醒后无特殊不适。同年８月份再次晕厥，神志不清，经胸部按压后苏醒。醒后感耳...     

(His)6 -eIF3s4融合蛋白在人乳腺癌细胞Bcap37中的表达

目的：构建真核细胞翻译起始因子3第4亚单位（eIF3s4）真核表达载体用于进一步功能研究。方法：设计引物,以K562细胞的总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增eIF3s4的全长编码区cDNA,克隆于pGEM-TEasy载体,经DNA测序并与GenBank数据库序列进行比对后,将该cDNA序列亚克隆于真核表达载体pcDNA4/HisMaxB载体,构建成（His）6-eIF3s4融合蛋白的表达载体,用LipofectamineTM2000瞬时转染人乳腺癌细胞株Bcap37,利用Westernblot方法检测（His）6-eIF3s4融合蛋白的表达。结果：DNA序列测定表明,利用RT-PCR方法克隆的eIF3s4全长编码区cDNA序列与GenBank数据库序列一致,Westernblot结果证实（His）6-eIF3s4融合蛋白在Bcap37细胞中获得预期表达。结论：成功地构建了eIF3s4的真核表达载体并在人乳腺癌细胞Bcap37中表达,为建立稳定的eIF3s4高表达细胞系,进而研究eIF3s4与肿瘤细胞多药耐药相关性打下了基础。     

人白细胞介素2基因在酵母菌中的表达及发酵研究

将一带有人白细胞的介素2cDNA 的大肠杆菌——酵母菌穿酸质粒转化啤酒酵母Saccharomyces cerevisiae 8534-8c,再将转化子与另一啤酒酵母 Saccharomyces cervisiae CSH83—L 进行杂交,得到二倍体菌株.同时,还研究了单倍体转化子和二倍体菌株在表达重组白细胞介素2上的差异以及不同培养条件下二倍体菌株的表达情况,确定了合适的发酵条件,并进行了五立升自动发酵罐的发酵研究.     

OCT4A基因对K562细胞生物学活性的影响

目的:探讨OCT4A基因体外对K562细胞生物学行为的影响及与凋亡相关的分子机制。方法:克隆人OCT4A基因,构建靶向上调及下调OCT4A基因与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的重组慢病毒表达载体p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA,三质粒包装系统包装病毒,并测定滴度。实验分为空白对照、p LVX空质粒、p LVX-OCT4A-Zs Green1、PLB-OCT4A sh RNA和非特异sh RNA共5组。Western-blot检测各组OCT4A蛋白表达。CCK-8法绘制各组细胞增殖曲线。采用Annexin V/7-AAD标记流式细胞术检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞分化抗原CD11b和CD15表达;实时定量PCR检测caspase3、BIM、BCL-x L和BAX m RNA表达变化。结果:成功克隆人OCT4A基因,并成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA。Western blot证实2种病毒感染后可分别有效上调及下调OCT4A蛋白的表达。CCK-8法检测显示,p LVX-OCT4A-Zs Green1组K562细胞体外增殖活性明显升高,而p LVX-OCT4A sh RNA组K562细胞增殖活性显著降低(P0.05)。感染后p LVX-OCT4A-Zs Green1和PLB-OCT4A sh RNA 2组K562细胞凋亡率分别为(3.48±0.52)%和(7.25±0.57)%(P0.05),而OCT4A过表达及抑制后细胞表面分化抗原CD15、CD11b的表达无明显变化。OCT4A上调后Caspase-3、BIM、BAX较对照组均下调,但差异无统计学意义(P0.05),而BCL-x L基因表达则明显升高(P0.01)。结论:成功构建重组慢病毒载体p LVX-OCT4A-Zs Green1及PLB-OCT4A sh RNA,它们可分别有效地上调及下调OCT4A蛋白表达。OCT4A基因可促进K562细胞的增殖、抑制凋亡,其抑制凋亡机制可能与BCL-x L基因上调有关。     

3例复发难治性B细胞急性淋巴细胞白血病的治疗及移植物抗宿主病预防

目的 通过对3例复发难治性B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的治疗方法及移植治疗后移植物抗宿主病(GVHD)的预防方法分析,总结这类疾病有效治疗方案及预防方案.方法 3例复发难治性B-ALL患者中2例为费城染色体Ph(+),在确定半相合供者后,给予CD19靶向嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞桥接治疗,缓解后接受亲缘半相合异基因造血干细胞移植(haplo-HSCT),采用造血干细胞移植方案GIAC进行移植治疗,同时在移植后给予小剂量环磷酰胺(PTCY,14.5 mg/kg体质量)预防GVHD.结果 3例B-ALL患者CAR-T细胞治疗后均获得了完全缓解(CR),其中2例达分子生物学缓解,1例达流式MRD阴性缓解;其中2例患者顺利接受haplo-HSCT,回输后均成功供者细胞造血重建,无严重GVHD,白血病疾病状态稳定.另1例伴有p.T315I突变的Ph(+)-ALL患者,CAR-T细胞治疗后获得短暂分子生物学缓解,但在移植准备过程中再次复发后失去移植机会.结论 CAR-T治疗后序贯亲缘半相合移植治疗复发难治性B-ALL患者效果良好;小剂量PTCY联合GIAC移植方案可以安全有效地预防GVHD的发生;CAR-T细胞治疗后短期再次复发的B-ALL患者目前仍然治疗困难.     

用蘑菇伞型封堵器堵闭成人巨大动脉导管未闭1例

患者 ,女 ,2 7岁 ,因发现心脏杂音 1 6年、心悸伴双下肢水肿 3个月入院。患者于 1 1岁体检时发现心脏杂音 ,当地医院诊断为“先天性心脏病” ,未进一步检查治疗。平素体质较差 ,但能胜任一般轻体力劳动 ,重体力劳动后即觉心悸 ,但无活动后口唇发绀等症状。 2 0 0 2年 5月就诊于当地医院 ,确诊为动脉导管未闭 (PDA) ,曾尝试行经导管封堵术 ,但因术中测肺动脉压高达 94/34mmHg( 1mmHg =0 .1 33kPa)而放弃封堵。为进一步治疗转入我院。入院后第 3天行经导管PDA封堵术。在局麻下穿刺右侧股动脉、股静脉。逆行主动脉造影示PDA呈漏斗型 ,最窄…     

应用自制封堵器经导管闭合膜部室间隔缺损

室间隔缺损 (室缺 )是先天性心脏病中最常见的一种 ,其中膜部缺损占 70 %左右[1 ] 。我们根据膜部室缺的解剖特点制作了双盘形封堵器 ,并成功治疗了 1 0例患者 ,报告如下。资料与方法　　 1 .临床资料 :1 0例患者 ,男、女各 5例 ,年龄 5～ 37(1 6 8± 1 1 2 )岁 ,均经体检、心脏超声检查诊断为膜部室缺。其中嵴下型 9例 ,三尖瓣隔瓣后型 1例。超声测量缺损直径 3～ 8(5 4± 1 8)ｍｍ。2 .封堵器制作 :封堵器由镍钛合金丝 (0 0 1ｍｍ)编织成管状 ,经热处理定型成双盘状 ,两盘片中间的腰部为圆柱形 ,圆盘部分直径比圆柱部分的直径大 4ｍｍ …     

单臂外固定架治疗儿童下肢骨折

目的：探讨单臂外固定架治疗儿童下肢骨折的临床疗效。方法回顾性分析2010年5月至2012年7月遵义医学院附属医院应用单臂外固定架治疗20例下肢骨折患儿的临床资料,其中骨干固定15例、跨膝关节固定5例;单臂单钉固定3例、双钉固定17例。结果20例患儿获得3～12个月随访（平均8个月）,均达到骨性愈合,骨折愈合时间4～12周（平均8周）。按Flynn疗效评定标准,优12例、良8例,优良率为100%。随访期间所有患者未出现骨折复位丢失,关节功能满意,无骨骺损伤及骺板早闭发生,未发生固定针松动。1例未遵医嘱于6个月后方拆除固定架,行功能锻炼后膝关节功能获得恢复;2例出现针道感染,对症处理后好转。结论应用单臂外固定架治疗儿童下肢骨折操作简单、创伤小、并发症少,疗效满意。     

利妥昔单克隆抗体治疗不同激素敏感性的ITP患者的疗效比较

目的:观察小剂量利妥昔单克隆抗体治疗糖皮质激素无效和依赖的ITP患者的疗效及其与激素敏感性的关系,为临床医师合理用药提供参考。方法:将79例ITP患者纳入研究,其中对糖皮质激素无效的19例,对糖皮质激素依赖的有60例。对所有患者给予地塞米松40 mg/d×4,d 7、14、21、28静脉滴注利妥昔单克隆抗体100 mg,治疗后对所有患者随访12个月,分析患者对激素的敏感性与利妥昔单克隆抗体治疗反应的关系。应用流式细胞术及ELISA法检测治疗前后Tregs比例,BAFF、IL-2和sCD40L水平的变化。结果:79例ITP患者经地塞米松联合利妥昔单克隆抗体治疗后1、3、6及12个月的总有效率分别为79.7%(63/79)、69.6%(55/79)、63.3%(50/79)和60.8%(48/79),其中对糖皮质激素无效(n=19)和存在糖皮质激素依赖(n=60)的ITP患者1、3、6和12个目的总有效率分别为47.4%(n=9)vs 90.0%(n=54);36.8%(n=7)vs 80.0%(n=48);21.1%(n=4)vs 76.7%(n=46);21.1%(n=4)vs 73.3%(n=44),2组间差异具有统计学意义。进一步分析两组治疗后1、3、6及12个月2组Treg细胞比例分别为(1.70±0.43)%vs (3.47±0.72)%;(1.66±0.33)%vs (4.29±0.91)%;(1.71±0.37)%vs (4.44±0.97)%;(3.36±0.54)%vs (4.29±1.04)%。研究结果表明,糖皮质激素依赖患者在治疗1个月后血浆中BAFF,IL-2和sCD40L的水平明显降低(P0.05),糖皮质激素无效患者的BAFF、IL-2和sCD40L水平虽然也有降低,但2组间差异无统计学意义。结论:对糖皮质激素依赖的患者应用利妥昔单克隆抗体治疗更有效,对Treg细胞、BAFF,IL-2和sCD40L调节是其可能机制之一。     

中国徐州地区成人血细胞分析参考区间调查和建立

目的:建立徐州地区正常成人血细胞参数的参考区间。方法:在徐州医科大学附属医院体检中心应用血细胞分析仪,检测正常人群(男性41 257人,女性41 257人,共82 514人)静脉血红细胞计数、血小板计数、白细胞计数等相关参数。结果:各项参数的参考区间如下:红细胞计数(RBC)在男性为(4.33-5.51)×10~(12)/L,在女性为(3.82-4.85)×10~(12)/L;血红蛋白水平(Hb)在男性为(132-172)g/L,在女性为(107-145)g/L;红细胞压积(HCT)在男性为(40-50)%,在女性为(34-44)%;血小板计数(Plt)在男性为(113-268)×10~9/L,在女性为(126-289)×10~9/L;白细胞计数(WBC)在男性为(4.00-9.40)×10~9/L,在女性为(3.54-9.30)×10~9/L;中性粒细胞计数(NEUT)在男性为(1.91-5.76)×10~9/L,在女性为(1.67-5.30)×10~9/L;单核细胞计数(MONO)在男性为(0.18-0.58)×10~9/L,在女性为(0.16-0.52)×10~9/L;淋巴细胞计数(LYM)在男性为(1.3-3.4)×10~9/L,在女性为(1.2-3.1)×10~9/L等等。结论:徐州地区成人部分血细胞参数,与国内外相关调查结果对比有显著差异。其中徐州地区成年女性Hb参考区间的下限明显偏低,成人的Plt计数参考区间上、下限明显低于国内外其他地区,而WBC计数参考区间上、下限与国内地区接近,但低于部分国外地区。初步建立徐州地区成人血细胞参考区间,其中RBC、Hb、HCT和Plt具有明显的性别差异,已为其分别建立了参考区间。