人脐血MSCs的分离培养及向神经的诱导分化

目的探讨人脐血中分离所得到间充质干细胞（MSCs）向神经组织细胞诱导分化的实验条件。方法淋巴细胞分离液分离正常人脐血单个核细胞,利用差速消化法通过多次传代得到MSCs,流式细胞仪测定细胞表型。取2至4代的MSCs加入含有维甲酸（RA）与神经生长因子（NGF）的诱导分化培养基将其定向诱导,免疫细胞化学染色检测诱导后的MSCs神经元和神经胶质细胞标志的表达。结果脐血MSCs每传一代,细胞数量增加约2～3倍。流式细胞仪检测,脐血MSCs不表达CD34,表达CD25、CD29、CD105、CD106。诱导后的细胞不仅形态类似神经元和神经胶质细胞,而且表达神经丝蛋白200（NF）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）。结论从人脐血中可以分离得到与骨髓相似的MSCs,并且能够在体外分化为神经元样和神经胶质细胞样细胞。     

血浆同型半胱氨酸水平与2型糖尿病周围神经病变关系的探讨

目的:评估空腹血浆总同型半胱氨酸(tHcy)水平与2型糖尿病(DM)周围神经病变的关系,并分析影响DM患者血浆tHcy水平的因素。方法:以103例2型糖尿病患者为DM组,45例健康者为正常对照组,其中DM组分为有周围神经病变组(DPN+组)和无周围神经病变组(DPN-组),用酶转换免疫分析法测定血浆tHcy浓度;并用发光免疫法测定血清叶酸和维生素B12水平。结果:DPN+组的空腹血浆tHcy浓度明显高于DPN-组和正常对照组[(14.20±2.92)μmol/Lvs(9.05±1.78)μmol/L和(8.95±2.27)μmol/L,P<0.01];存在高Hcy血症的DM患者DPN发生率明显高于无高Hcy血症患者(80.65%vs34.72%,P<0.01)。逐步回归分析显示:维生素B12、叶酸(FA)均为DM患者tHcy的决定因素(P<0.01);多元Logistic回归分析显示,空腹tHcy、糖化血红蛋白(HbA1C)、维生素B12均与DPN的发生有关;空腹血浆tHcy、HbA1C、V itB12均为DPN的独立危险因素。结论:空腹高Hcy血症是DPN的危险因素;血清维生素B12、FA水平影响tHcy的浓度。     

当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎性损伤的影响及分子机制初探

目的　探讨应用当归制剂对脂多糖诱导的肝组织炎症反应的影响及其分子机制。方法　将ICR小鼠分为用药组、实验对照组及正常对照组 3组 ,采用脂多糖 (LPS)配合卡介苗 (BCG)注射法建立小鼠 (用药组和实验对照组 )肝脏炎性损伤模型 ,经腹腔给用药组小鼠注射当归制剂 ,给实验对照组注射等量生理盐水 ,连续给药 10d后 ,常规组织病理学观察 ,比较小鼠肝组织炎症反应情况。同时用逆转录 -聚合酶链反应 (RT -PCR)检测小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA表达的变化。结果　用药组小鼠肝脏的炎症反应明显弱于实验对照组 (P <0 .0 5 ) ;肝脏炎性损伤小鼠脾脏单个核细胞TNF -αmRNA的表达在注射LPS后 4h较正常对照组小鼠明显增加 (P <0 .0 1) ,在注射后 7h时达到峰值 ,而后有所下降 ;在注射LPS后 7h ,用药组小鼠TNF -αmRNA的表达与实验对照组相比 ,无显著差异。结论　当归制剂能显著抑制脂多糖诱导的肝组织炎症反应 ,明显减轻肝组织的炎性损伤 ,然而其主要抑制作用可能并非通过影响炎性介质TNF -αmRNA的表达来实现。     

纤维支气管镜肺活检在准确诊断肺移植术后急性排斥反应中的作用

目的 探讨肺移植术后纤维支气管镜肺活检(TBLB)对准确诊断急性排斥反应(AR)的作用.方法 分析肺移植术后有完整TBLB随访资料的50例受者AR的诊断情况.肺移植术后50例受者常规进行TBLB共145例次.根据术后早期TBLB的病理学诊断结果,将受者分为早期AR组和早期无AR组.分析术后早期TBLB诊断AR的阳性率,术后远期两组受者AR发生率和TBLB对诊断AR的准确率.结果 术后早期受者AR发生率为44%(22/50).早期AR组22例受者中,经TBLB诊断为AR的共有25例次;TBLB对肺移植术后早期AR的诊断准确率为100%.受者术后远期AR发生率为22%(11/50),其中早期AR组和早期无AR组分别有5例和6例受者发生AR.TBLB对术后远期AR的诊断准确率为100%.所有发生AR的受者中,有61.1%的受者无典型的AR临床表现.结论 肺移植术后急性排斥反应无典型的临床表现,容易误诊,TBLB对诊断肺移植术后急性排斥反应具有较高的准确率.     

国际标准化脑死亡供肺获取1例

总结国际标准化脑死亡供体肺的获取经验，以形成一套适用于巾国临床肺移植的脑死亡供体获取标准和规范。本例脑死亡患者的判定严格按国际通用标准，项目负责人在确认家属捐献意愿后，组织2位以上的高年资神经内科、颅脑外科、麻醉科或ICU专家严格按“脑死亡判定标准”及“脑死亡判定技术规范”逐条认真检查患者。脑死亡判定成立后患者家属代表向医院方签署停止一切治疗的知情同意书，签署“脑死亡自愿无偿器官捐献申请书”。对机械通气50h的志愿捐献者进行脑死亡评估和供体器官功能评估后，严格按照国际标准化多脏器获取流程行供肺获取术。本例供体成功完成了肺的获取。实践证明这项操作流程规范可靠。     

2型糖尿病患者真胰岛素和胰岛素原的改变及其意义

目的：探讨2型糖尿病（DM）患者、糖耐量减低（IGT）者血清真胰岛素（TI）、胰岛素原（PI）及免疫反应胰岛素（IRI）的变化及其意义。方法：测定42例糖耐量正常者（NGT）、31例IGT和91例新诊断的2型DM患者空腹及餐后1h、2h的TI、PI和IRI。并根据体重指数（BMI）分为肥胖晋组和非肥胖亚组。结果：（1）各组TI、PI和IRI在肥胖亚组均比非肥胖亚组高（P＜0．01）。（2）2型DM肥胖和非肥胖亚组餐后1h的TI和IRI明显低于NGT的相应组（P＜0．05），也低于2型DM餐后2h的相应组，TI和IRI释放曲线呈早期分泌相降低和高峰延迟。（3）空腹PI：NGT＜IGT＜2型DM组，各组之间差异有显著性（P＜0．05）。（4）各组内肥胖亚组的空腹PI／IRI和非肥胖亚组相似（P＞0．05），2型DM、IGT的空腹PI／IRI显著高于NGT（P＜0．05）。结论：不同糖耐量的肥胖者均有高胰岛素血症和高胰岛素原血症。2型DM、IGT患者有高PI血症和不成比例的PI增高，后者是胰岛β细胞分泌功能缺陷的标志之一。     

纤维支气管镜肺活检在准确诊断肺移植术后急性排斥反应中的作用

目的 探讨肺移植术后纤维支气管镜肺活检(TBLB)对准确诊断急性排斥反应(AR)的作用.方法 分析肺移植术后有完整TBLB随访资料的50例受者AR的诊断情况.肺移植术后50例受者常规进行TBLB共145例次.根据术后早期TBLB的病理学诊断结果,将受者分为早期AR组和早期无AR组.分析术后早期TBLB诊断AR的阳性率,术后远期两组受者AR发生率和TBLB对诊断AR的准确率.结果 术后早期受者AR发生率为44%(22/50).早期AR组22例受者中,经TBLB诊断为AR的共有25例次;TBLB对肺移植术后早期AR的诊断准确率为100%.受者术后远期AR发生率为22%(11/50),其中早期AR组和早期无AR组分别有5例和6例受者发生AR.TBLB对术后远期AR的诊断准确率为100%.所有发生AR的受者中,有61.1%的受者无典型的AR临床表现.结论 肺移植术后急性排斥反应无典型的临床表现,容易误诊,TBLB对诊断肺移植术后急性排斥反应具有较高的准确率.     

成人胰岛细胞的分离纯化及初步的临床应用

目的分离及纯化成人胰岛,以用于同种胰岛细胞移植。方法利用胶原酶灌注消化以及Ficoll分离液分层纯化的方法获得成人胰岛细胞,并应用于2例临床糖尿病患者。结果经双硫腙染色鉴定,分离纯化后的胰岛细胞活性达到80%~90%;且经胰岛素释放试验表明,实验中收获的胰岛具有良好的胰岛素分泌功能。经临床试验,1例糖尿病患者在输入此胰岛后,已脱离胰岛素治疗;另1例患者已停止服用降糖药。结论用胶原酶灌注消化及Ficoll分离液分层纯化的方法获得成人胰岛细胞是可行的。     

特发性肺动脉高压患者肺移植术前评估及维护策略探讨

肺移植是终末期肺病的有效治疗手段。特发性肺动脉高压（idiopathic pulmonary arterial hypertension,IPAH）是肺移植重要的适应证,在肺动脉高压的分类中属于动脉性肺动脉高压,与肺纤维化、慢性阻塞性肺病等肺部疾病不同,IPAH作为肺血管病,在肺移植术前的评估及维护上具有一定的特殊性。     

器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)——肺移植

为了进一步规范器官移植病理学临床技术操作,中华医学会器官移植学分会组织器官移植专家和移植病理学专家,从移植肺活组织检查病理学临床操作规范、移植肺并发症的病理学诊断临床技术操作规范、诊断性介入肺脏病学快速现场评价技术在移植肺病理诊断中的初步应用等方面,制定器官移植病理学临床技术操作规范(2019版)之肺移植病理学临床技术操作规范。