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目的:探讨翻译控制肿瘤蛋白(TCTP)mRNA在肝再生中的表达情况和生物学意义.方法:对健康成年雄性SD大鼠进行2/3部分肝切除以建立肝再生模型,分别于肝切除术后不同时间点收集再生肝组织,在显微镜下进行有丝分裂指数评价,利用流式细胞术分析细胞周期分布变化;半定量RT-PCR法检测TCTP mRNA的表达.结果:肝细胞有丝分裂指数在术后3~12h明显升高.细胞周期分析显示,肝切除术后1h呈现G0/G1向S期迁移,G2/M期细胞比例在3h呈现升高,6h升高最为显著.TCTP mRNA的表达在肝切除术后1h时轻微上调,在3~12h呈显著升高,之后下降至初始水平.结论:在肝再生组织中TCTP mRNA表达呈动态变化,可能与有丝分裂和细胞增殖密切相关. 相似文献
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目的 克隆肝再生相关新基因。方法 以抑制性消减杂交得到的1个EST为模板制备探针,运用Southern印迹方法,从构建的再生肝76 h c DNA文库中调取了它的c DNA全长,并利用基因原核表达技术,表达并纯化出它的蛋白产物,制作了该蛋白的兔源多抗,分别用所制该基因的探针,采用点杂交技术检测了0~76 h的再生肝材料。结果 获得了1个新基因全长,BL AST检索结果为1未知功能基因,暂时命名为liver regeneration relatedprotein(L RRP) ,大鼠基因组数据库中检索结果证实L RRP位于19q12且由4个外显子和3个内含子组成,递交Gen Bank获登录号为AY0 98917。表达纯化出了它的融合蛋白产物,并得到了它的多克隆抗体。点杂交结果也证实了基因在肝切除后76 h明显上调。结论 L RRP基因全长的克隆和它的高效多克隆抗体的获得为进一步研究该基因的功能奠定了基础。 相似文献
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人血管内皮生长因子VEGF183(132-158)肽段含有细胞外基质结合序列与纤溶酶、基质金属蛋白酶以及uPA酶裂解位点,研究该肽段作为一种蛋白药物的缓释载体,在体内既可和细胞外基质结合,又可在体内的相应酶作用下,缓慢释放。该研究以绿色荧光蛋白GFP为指示分子,进一步采用加端PCR方法将VEGF183(132-158)肽段连到GFP的C端,原核表达并纯化该融合蛋白,通过与琼脂糖肝素柱结合实验与冷冻切片的荧光显微镜观察,发现该肽段赋予了GFP蛋白结合琼脂糖肝素柱与细胞外基质的功能,GFP融合蛋白的获得为下一步的体内释放研究打下了基础。 相似文献