lncRNA AK126393通过PI3K/Akt通路调节结直肠癌细胞的增值与凋亡

目的 探索长链非编码 RNA (long non-coding RNA,lncRNA)AK126393在人结直肠癌细胞中的作用机制。方法荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常结肠组织细胞系与结直肠癌细胞系中lncRNA AK126393表达,选取最低表达细胞系进行转染lncRNA AK126393过表达质粒和阴性对照(NC),采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,Western blot法检测Bcl2、Bax、PI₃K、P-PI₃K、Akt、P-Akt和LC3蛋白表达。结果 lncRNA AK126393在结直肠癌细胞系中呈现低表达,其中SW480细胞表达最低;过表达质粒转染SW480细胞后lncRNA AK126393相对表达水平显著升高;细胞增值能力显著降低,细胞凋亡水平增加;Western blot法检测结果显示Bcl2、LC3-Ⅱ、P-PI₃K、P-Akt蛋白表达明显升高,Bax和LC3-Ⅰ蛋白表达明显降低,PI₃K和Akt蛋白表达无明显变化。结论 lncRNA AK126393可以通过抑制PI₃K/Akt信号通路激活实现抑制结直肠癌细胞增殖、促进细胞凋亡以及引起细胞自噬的作用。     

基层医院开展中低位直肠肿瘤腹腔镜手术的初期经验

目的:探讨基层医院开展腹腔镜中、低位直肠肿瘤手术的可行性和安全性。方法:回顾性分析从2010年6月至2012年6月开展的腹腔镜中、低位直肠肿瘤切除术19例以及同期开展的21例开腹手术病人的资料,比较两组病人在手术时间、术中出血量、术后住院时间、术后肛门排气时间、术后并发症、淋巴结清扫数量等方面的差异。结果:两组在年龄、性别、肿瘤位置、Dukes分期等方面无差异。腹腔镜组无一例中转开腹。在术中出血量、术后住院时间、术后肛门排气时间等方面,腹腔镜组明显优于开腹组;而在手术时间、术后并发症发生率、淋巴结清扫数量上两组无统计学差异。结论:专业团队、术中遵循直肠全系膜切除原则以及掌握适应证是基层医院安全、有效开展腹腔镜中、低位直肠肿瘤手术的基础和重要条件。     

lncRNA AK126393对结肠癌细胞的抑制作用及机制研究

目的:探索长链非编码 RNA（long non-coding RNA,lncRNA）AK126393调控人结肠癌细胞凋亡的作用及其机制。方法:采用荧光实时定量聚合酶链反应检测人正常结肠上皮细胞和不同结肠癌细胞系中lncRNA AK126393的表达水平,采用pcDNA3.1-AK126393转染HCT116细胞增加AK126393的表达,采用MTT法检测细胞的增殖活力,采用流式细胞术检测细胞凋亡水平,采用Western blotting检测细胞中目标蛋白的表达水平。结果:与人正常结肠上皮细胞系永生化结肠上皮细胞系NCM460相比,人结肠癌细胞系中AK126393的表达均出现显著下降,其中HCT116细胞中AK126393表达最低;pcDNA3.1-AK126393转染HT116细胞后AK126393的相对表达水平出现显著升高;AK126393 的过表达抑制HCT116细胞的增殖能力,促进其细胞凋亡水平,并且引起细胞自噬的发生;同时AK126393 的过表达显著抑制HCT116细胞内AKT/ERK1/2信号通路的磷酸化水平。结论:LncRNA AK126393具有抑制结肠癌细胞增殖、促进凋亡以及引起细胞自噬的作用,其作用可能是通过抑制AKT/ERK1/2信号通路的激活来实现。     

高龄结肠癌并发急性肠梗阻的外科治疗体会

结肠癌并发急性肠梗阻是老年人常见的急腹症之一,发生率为10%～30%[1]。随着中国人口的老龄化,老年性梗阻性结肠癌的发病率日益升高,以术前诊断延误率高、晚期病例多、并存疾病多、术后并发症多为特点,其手术危险性高于其他年龄组。上海市浦东医院自2009年1月―2012年7月共收治39例年龄≥70岁确诊为结肠癌并发急性肠梗阻的患者,均行手术治疗,体会如下。     

腹腔镜胆囊切除术后再手术19例临床分析

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(laparoscopic cholecystectomy,LC)后因各种并发症而再次行开腹手术或腹腔镜手术的原因、诊断方法、治疗措施及预后。方法:回顾分析1994年6月至2011年6月19例LC患者术后再次手术的临床资料。结果:19例再次手术的患者中,胆囊管残端钛夹脱落2例,胆囊管残端局部坏死3例,副肝管及右肝管分支裂伤各1例,胆囊床毛细胆管渗漏2例,胆管炎性狭窄2例,胆囊动脉出血2例,腹壁戳孔小动脉出血引发巨大血肿1例,胃穿孔1例,小肠脐部切口疝回纳后挫伤回肠壁形成血肿致小肠梗阻1例,术中遗漏胃角后壁、结肠肝曲及直肠癌各1例。患者经再次手术后均痊愈出院,随访3～12年,无任何后遗症发生。结论:术前全面采集、详细分析病史,通过影像学资料评估患者胆道情况,术中遵循LC操作原则,可降低并发症发生率及再手术率。     

80岁以上高龄腹部肿瘤患者的围手术期处理

目的探讨80岁以上高龄腹部肿瘤患者的围手术期处理。方法回顾性分析2004年1月至2009年12月收治的41例80岁以上腹部肿瘤手术患者的临床资料。结果全组41例中急诊手术7例,择期手术34例。根治性手术25例,姑息性切除手术9例,仅行短路手术7例。术后10例行ICU监护治疗;39例发生术后并发症,其中,呼吸道并发症27例,低蛋白血症24例,贫血15例,切口感染和切口裂开11例,心血管系统并发症5例。38例顺利出院,3例死亡。结论对于腹部肿瘤患者,超高龄并非手术禁忌证。积极预防和改善全身各系统器官功能,注意心肺功能的保护和营养状况的改善及选择正确的手术方案和时机都是手术安全有效的重要保障。     

miRNA-34 a对人结肠癌细胞 HCT116增殖及侵袭转移的影响

目的：研究微小RNA-34a（microRNA-34a,miR-34a）在人结肠癌细胞株HCT116中的过表达对细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法设计合成并构建携带绿色荧光蛋白（ GFP）的miR-34a真核表达载体,脂质体法稳定转染HCT116细胞。通过Realtime PCR验证转染后miR-34a的表达变化。 MTT法检测转染前后HCT116细胞增殖能力变化, Transwell法检测转染前后HCT116细胞侵袭能力改变,western blot检测目的蛋白的表达。结果 miR-34a转染HCT116细胞后其表达量增加到（7．32±1．34）倍,而HCT116细胞增殖能力也受到显著抑制,下降到（0．49±0．10）;Bcl-2蛋白受到miR-34a表达的抑制,而BAX的表达则受到miR-34a表达的增强;HCT116细胞侵袭能力在miR-34a过表达后显著增强,相应的MMP-2和MMP-9表达也出现显著增强。阴性对照组与空白对照组比较无显著性差异。结论 miR-34a的过表达能够抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖及侵袭转移,与调控Bcl-2／BAX和MMP-2和-9蛋白的表达密切相关。     

miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用及其分子机制

目的探讨miR-34a在结肠癌细胞增殖和迁移中的作用,并验证其靶点蛋白。方法传代培养人结肠癌细胞株HCT-116,分别采用空病毒载体(pRI-CMV-GFP)转染(阴性对照组)、慢病毒载体(pRI-CMV-GFP-miRNA-34a)转染(慢病毒组),另选未经任何处理的HCT-116细胞作为空白对照组。采用Real-time PCR法检测miR-34a的相对表达量,采用MTT实验、Transwell小室法检测HCT-116细胞增殖和迁移能力,采用细胞免疫荧光试验和Western blotting法验证其靶点蛋白。结果以空白对照组miR-34a表达为1,阴性对照组为1.03±0.09,慢病毒组为6.41±1.56,慢病毒组高于阴性对照组及空白对照组(P均<0.01),证实慢病毒转染成功。与空白对照组、阴性对照组比较,慢病毒组细胞增殖和迁移能力显著下降(P均<0.01)。细胞免疫荧光试验显示,慢病毒组细胞c-Met的荧光强度显著降低,而空白对照组与阴性对照组无明显变化。Western blotting结果显示,慢病毒组c-Met及磷酸化c-Met表达均低于阴性对照组、空白对照组(P均<0.01)。结论过表达miR-34a可抑制结肠癌细胞增殖及迁移,并下调靶点蛋白c-Met及磷酸化c-Met表达,提示miR-34a可作为结肠癌治疗的分子靶点。     

腹腔镜胆囊切除术后再手术13例报告

目的探索LC术后因各种并发症而再次开腹手术或再次腹腔镜下手术的产生原因、诊断依据、预防方法、治疗措施和预后。方法回顾1994年6月至今,LC手术共3886例,因LC术后各种并发症而再次开腹手术或再次腹腔镜下手术者13例,占LC总数的0.33%。胆漏8例,其中5例胆囊管端漏,分别于LC后3、5、7、10及及2个月再次开腹行胆囊管结扎、腹腔引流术;1例肝右前叶裂伤于LC术后2 d开腹行列伤缝合并腹腔引流术;1例胆囊床毛细胆管漏行腹腔引流术;1例胆管裂伤于术后12天行开腹修补并腹腔引流术;腹腔出血2例分别于LC术后7、2小时经开腹结扎、腹腔镜下钛夹钳夹止血术。胃穿孔1例于LC术后第2天行胃穿孔修补及腹腔引流术。小肠梗阻1例于LC术后5天行小肠部分切除端端吻合术。胆管管狭窄1例于LC术后行胆总和端端吻合,术后7个月呈进行性阻塞性黄疸而住院再次开腹行胆总管、空肠Roux-en-y吻合术。结果13例均于LC术后经再次开腹或腹腔镜手术而获得治愈,经随访8~10年,无任何并发症和后遗症发生。结论只要努力,LC术中各种并发症是可以防范的,若出现并发症,只有及时发现并加以正确处理,疗效也相当理想。