大鼠近交系间原位肝移植急性排斥模型的建立与评价

背景：目前国内常用的封闭群品系大鼠(SD与Wistar大鼠)所建立肝移植急性排斥模型并不理想,易产生肝移植耐受。 目的：通过二袖套法建立稳定的DA-Lewis大鼠原位肝移植急性排斥模型。 方法：实验分为两组：同基因组：Lewis-Lewis 24例;异基因组：DA-Lewis 24例。观察移植后一般情况及移植后存活时间,两组受体分别于移植后3,5,7,10 d随机取3只处死取标本,观察肝脏组织病理变化,测定天冬氨酸转氨酶、总胆红素、细胞因子水平变化。 结果与结论：同基因组大鼠无急性排斥反应表现,中位生存时间超过100 d,肝脏组织发生轻度形态学改变。异基因组大鼠移植后黄疸明显,中位生存时间为11 d,移植后第7天肝脏组织病理表现典型急性排斥反应(Banff国际标准)。同期相比异基因组天冬氨酸转氨酶、总胆红素、细胞因子水平均高于同基因组(P < 0.001)。提示,DA-Lewis是稳定的大鼠肝移植急性排斥模型,是研究肝移植排斥反应及免疫耐受的理想动物模型。     

犬活体肝移植术中的管道处理技巧

目的 总结非转流条件下犬活体肝移植中各种管道处理技巧,探索建立成熟、稳定的移植模型.方法 通过预实验组5例次和实验组11例次非转流条件下犬活体肝移植术,结合其解剖特点,观察手术技术改进对存活率的影响.结果 预实验中5例手术均在术中及术后24 h内死亡.实验组手术中死亡2例,术后48 h存活率77.8%.受体犬手术时间平均(281.3±29.7)min,无肝期0 min;失血量为(262.1±27.5)ml,输血量(261.7±41.6)ml.术后第2 d正常进食.结论 术中各管道的合理处理对非转流条件下犬活体肝移植成功有重要意义.     

对比分析胆道术后胆管狭窄内镜与开腹手术治疗的临床疗效

目的研究治疗胆道术后胆管狭窄内镜与开腹手术的临床效果。方法 100例肠道内科手术后胆管狭窄患者,接受开腹手术治疗(对照组)及内镜手术治疗(探究组)患者各50例,比较两组临床治疗效果。结果对照组治疗总有效率72.00%,探究组治疗总有效率98.00%,两组总有效率比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论经过内镜手术治疗效果更优,可以降低手术创伤,改善手术效果,有利于患者的恢复,具有创伤小、恢复快、预后佳等优点。     

草苁蓉多糖对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及机制

目的 探讨草苁蓉多糖(BRPS)对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及其可能机制.方法 使用不同浓度的BRPS(12.5、25、50、100、200μg/L)干预肝癌HepG2细胞,筛选合适作用浓度.取对数生长期细胞,随机分为对照组(不作处理)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)组(转染LV-HIF-1α)、HIF-1α-NC组...     

lncRNA MALAT1在结直肠癌中的表达、生物学功能及其与患者预后的关系

目的:探讨lncRNA MALAT1在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）中的表达、生物学功能及其与患者预后的关系。方法:采用生物信息方法在TCGA数据库和Oncomine数据库中分析比较MALAT1在CRC患者癌组织和癌旁组织中的差异表达情况,并比较高低表达组患者总生存期（OS）和无病生存期（DFS）是否存在差异。采用cBioPortal在线分析TCGA数据库中MALAT1突变种类及频率。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)技术检测我院收治并手术治疗的30例CRC患者手术切除标本的癌组织、癌旁组织、肠癌细胞系(SW620、LOVO、HCT116)及正常人肠上皮细胞(NCM460)中MALAT1的相对表达水平。小干扰RNA敲低SW620细胞中MALAT1表达后观察MALAT1细胞迁移和侵袭能力改变情况。siRNA下调SW620细胞MALAT1,利用免疫印迹实验检测上皮间质化标志物E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达水平。结果:Oncomine数据库中,CRC患者癌组织中高表达MALAT1的研究有6项;30对人配对CRC组织标本中,相比癌旁组织,MALAT1 在46.7%（14/30）的CRC患者组织中表达增高（P＜0.05）;Real-time PCR结果显示,肠癌细胞系(SW620、LOVO、HCT116)中MALAT1的相对表达量显著高于正常人肠上皮细胞(NCM460),差异有统计学意义（P＜0.05）。MALAT1基因突变类型主要为融合突变、扩增突变及深度缺失突变,其在各种肿瘤中的总体突变率为1.1%,在CRC组织中的突变率为0.34%。小干扰RNA抑制MALAT1表达可明显抑制SW620细胞的划痕迁移与小室侵袭能力。抑制MALAT1表达后,SW620细胞中E-cadherin的表达水平升高,同时N-cadherin和Vimentin的表达水平明显降低,表明上皮间质化过程受到明显抑制。MALAT1表达水平与结肠癌患者DFS存在明显的关系,高表达患者DFS显著低于低表达患者（HR=1.6,P=0.044）。结论:lncRNA MALAT1在肠癌中表达上调,并通过抑制上皮间质化抑制细胞迁移和侵袭能力。MALAT1高表达结肠癌患者预后不良,可能成为结肠癌预后分子标志物。     

异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型的建立

背景：在大动物肝移植的研究领域，在肝脏解剖结构及生理代谢方面，猪是更接近于人类的哺乳动物。 目的：建立异基因中国小型猪原位肝移植急性排斥反应模型，并在此基础上开展免疫学实验，验证建立成熟稳定的异基因原位肝移植急性排斥反应模型的可行性。 设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2006-06／2007-02在南方医科大学南方医院实验动物中心完成。 材料：选用健康西藏小型猪30只，健康版纳小型猪10只。 方法：分别进行西藏猪一西藏猪原位肝移植、版纳猪一西藏猪原位肝移植10对次，非转流条件下行原位肝移植。 主要观察指标：移植后观察两组受体的存活时间，移植后1，3．7d检测受体血清中天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量，并观察肝组织的病理变化。 结果：①同基因肝移植组受体生存时间明显长于异基因肝移植组（P〈0．01）。②异基因肝移植组受体移植后血清天冬氨酸转氨酶活性及总胆红素含量显著高于同基因肝移植组（P〈0．01）；移植前两组差异无显著性意义（P〉0．05）。③异基因肝移植组受体于移植后7d出现严重的排斥反应；肝组织内见大量的片状坏死，汇管区有大量的炎症细胞浸润。 结论：建立了稳定的异基因小型猪原位肝移植急性排斥反应模型。     

犬活体肝移植模型的建立及评价

目的:犬活体肝移植接近于临床实际,能模拟临床活体肝移植的全部过程.应用非体外转流和分流方法建立犬活体肝脏移植模型,以期为开展临床活体肝移植提供实验数据.方法:①实验材料:实验于2006-05/2007-04在南方医科大学南方医院动物研究所完成,选用健康本地杂种犬36只,动物实验方法符合动物伦理学要求.②实验方法:将36只犬按随机数字表法分为供体组和受体组,共行非转流条件下犬活体肝脏移植手术18对次.活体供肝组行标准Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ叶左半肝切取术.受体组先行左侧Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ叶肝脏组织切除,在新肝植入后,再切除原肝残留Ⅵ,Ⅶ叶肝组织.③实验评估:检测动物手术时间、术中失血量、输血量及存活期;犬死后当天行尸体解剖明确死亡原因.结果:成功建立非转流犬活体肝移植模型14只.①活体供肝组手术结果:供体术中死亡1只,术后第1天因出血死亡1只,术后5 d存活率为88.2%.手术时间(183.7±32.4)min,失血量为(78.5±12.8)mL,输血量0 mL,供肝的热缺血时间几乎为零,冷缺血时间(146.7±24.4)min.②受体组手术结果:术中死亡4只,其中创面出血2只,左肝静脉吻合口出血1只,1只死于急性肺水肿.术后存活14只,术后5 h存活率为85.7%;受体犬手术时间(276.7±34.1)min,无肝期0 min;失血量为(242.5±25.6)mL,输血量(230.6±47.3)mL.结论:犬是理想的活体肝移植动物模型,受体肝脏分两步切除,新肝植入期,可有效维持受体血循环稳定,免除了体外转流或门腔分流的操作,为临床开展活体肝移植提供了技术和经验的参考.     

原纤维蛋白1基因在胃癌组织中的表达、功能富集及信号通路生物信息学分析

目的 探讨原纤维蛋白1(FBN1)基因在胃癌组织中的表达、相关生物学功能和信号通路以及FBN1表达与胃癌患者生存期的关系。方法 应用生物信息大数据挖掘技术分析癌症基因组图谱数据库(TCGA)中人胃癌癌组织和癌旁正常组织中FBN1 mRNA表达水平。应用蛋白相互作用数据库STRING构建FBN1基因相关蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络并对蛋白网络中的编码基因进行功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析。根据胃癌组织中FBN1 mRNA表达水平的中位数将胃癌患者分为高表达组(n=126)和低表达组(n=118),采用Cox回归模型比较FBN1高表达组与低表达组患者总生存期(OS)和无疾病进展生存期(DFS)。结果 FBN1 mRNA在胃癌癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。FBN1基因PPI网络中共有21个蛋白和143个相互作用关系,各蛋白平均相互作用指数为0.816,网络中各个蛋白功能富集明显(P<0.05)。FBN1基因生物学过程主要富集于翻译后蛋白质修饰、解剖结构发育等;细胞组分主要富集于内质网内腔、细胞外基质和内质网等;分子功能主要富集...