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1.
p21WAF1与p27KIP1真核双表达载体的构建鉴定及在胃癌细胞中的表达 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 构建p21WAF1与p27KIP1真核双表达载体,体外转染胃癌7901细胞,观察其在胃癌细胞中的表达及相关特性.方法 提取人全血总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增p21WAF1和p27WAF1基因并将其分别克隆到真核双表达载体pIRES中构建重组质粒pIPES-p27KIP1-p21WAF1,经酶切和测序鉴定重组质粒.脂质体介导重组质粒plRES-p27KIP1.p21WAF1"转染胃癌7901细胞,收集并提取转染后12、24、48、72 h和5 d各细胞的总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测各细胞中p21WAF1和p27KIP1在RNA水平的表达.带有绿色荧光蛋白的pIRES-EGFP作为对照.结果 RT-PCR扩增分别获得约500和600 bp大小的产物,重组质粒pIRES-p27KIP1.p21WAF1经酶切和测序鉴定证实为p21WAF1和p27KIP1基因.转染胃癌7901细胞48 h时转染率为68%.与空质粒对照组比较,重组质粒转染胃癌7901细胞12、24、48、72 h和5 d后FQ-PCR证实p27KIP1的Ct值(cycle threshold,Ct)分别减少8.2、10、10、7.4和6.7,p21WAF1的Ct值分别减少7.4、8.2、8.2、6.3和5.70其中24 h和48 h的Ct值减少最大.结论 真核双表达载体pIRES-p27KIP1.p21WAF1构建成功并能在胃癌7901细胞内高效表达. 相似文献
2.
TNF-β+252单核苷酸多态性与胃癌恶液质的关系 总被引:3,自引:0,他引:3
目的探讨肿瘤坏死因子-β(TNF-β)+252基因单核苷酸多态性与胃癌病人癌性恶液质的关系.方法 105例营养不良胃癌病人,按照近6个月体质量的减轻率分成3组:A组,0~5%;B组,6%~10%;C组,〉10%.用PCR结合限制性内切酶检测胃癌病人及110例正常志愿者TNF-β+252单核苷酸多态性.结果 TNF-β+252A(TNFB2)出现的频率在胃癌组和对照组差异无显著性(P〉0.05).在胃癌病人中,TNFB2出现的频率在A、B、C各组差异亦无显著性(P〉0.05);恶液质病人TNFB2出现的频率与对照组比较差异无显著性(P〉0.05).结论 TNF-β+252基因单核苷酸多态性与胃癌恶液质的发生无相关性. 相似文献
3.
患者女,34岁。因右腹疼痛1 d入院。查体:右上腹压痛,未触及包块。CT示右侧腹腔内类圆形低密度影,大小约6 cm×6 cm×7 cm(图1)。患者曾于9个月前行“经腹腔镜右侧卵巢囊肿、阔韧带囊肿切除术”。病理示:(右侧阔韧带、卵巢)单纯性囊肿。全麻下行腹腔镜探查术。术中见右上腹有一约6 cm×6 cm×7 cm大小囊性肿物,表面光滑,部分被大网膜包裹。 相似文献
4.
髂骨取骨术致盆、侧腹壁疝四例 总被引:1,自引:0,他引:1
髂骨取骨致盆、侧腹壁疝临床罕见。我们自1990~2 0 0 2年收治4例,现报告如下。临床资料1.一般资料:本组4例,疝位于左侧1例,右侧3例。患者均为女性,其中3例为多产妇。年龄5 8~75岁,平均6 6 5岁。1例有吸烟嗜好及便秘史,1例有慢性支气管炎病史,1例为外院修补术后复发患者。全部手术治疗,3例分别在发病后4、6、6个月手术,1例发病后1年在外院行疝囊颈结扎、局部肌肉腱膜缝合修补术后复发,3个月后再次手术。2 .临床表现:髂骨取骨、植骨术后2~4个月下床活动时,感取骨切口及下腹侧腹壁隐痛或胀痛不适,局部逐渐凸出,站立时明显,卧位消失。无嵌顿… 相似文献
5.
目的观察大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中内皮素A受体mRNA在胃黏膜微循环血管上的表达 ,探讨内皮素及其受体对肝硬化门静脉高压大鼠胃黏膜微循环的调节机制。方法应用mRNA原位杂交确定内皮素A受体的部位 ,并进行半定量分析。结果大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中门静脉及外周血浆内皮素水平随门静脉压力升高而降低。胃黏膜内皮素A受体mR NA主要在黏膜基底部的微循环前微动脉和后微静脉血管壁表达 ,其中动脉表达明显强于静脉。其表达与门静脉压力呈正相关 (r =0 86 9,P <0 0 5 ) ,与门静脉及外周血内皮素水平呈负相关 (r =-0 797、- 0 74 1,P <0 0 5 )。结论大鼠肝硬化门静脉高压形成过程中外周及门静脉血浆内皮素水平进行性降低 ;胃黏膜微循环内皮素A受体mRNA表达量增加 ,呈现上调趋势 ;内皮素及其受体mR NA表达变化可能与胃黏膜微循环功能障碍有关。 相似文献
6.
7.
8.
高血压为我国常见病与多发病,以体循环动脉压增高为主。临床观察所见高血压绝大多数属于原发性高血压。心电图分析表明后期左心室肥厚及劳损较多见,高血压早期心电图没有很多的变化。为此,我们对200例高血压患者的心电图资料进行分析、探讨。 相似文献
9.
10.
目的探讨围手术期不同处理因素对SD大鼠肠道菌群数量及比例的影响。方法根据围手术期不同处理因素,将SD大鼠48只分成对照组、抗生素组、肠道准备组、禁食组、抗生素-肠道准备组、抗生素-肠道准备一禁食组、肠道准备-手术处理-抗生素.术后早期进食组(术后早期进食组)及肠道准备-手术处理.抗生素一术后禁食组(术后禁食组)8组。每组6只.处死后取回盲部粪便.采用倍比稀释法分别涂在选择性培养基上,37℃恒温培育48h,对大肠杆菌、类杆菌、双歧杆菌和肠球菌计数。结果与对照组相比,抗生素组大鼠细菌总数、类杆菌、肠球菌和双歧杆菌计数均明显下降(P〈0.05),而大肠杆菌水平上升(P〈0.05),杆菌与球菌的比例(杆球比)升高(P〈O.05):肠道准备组大鼠细菌总数、类杆菌、双歧杆菌和肠球菌计数均明显下降(P〈0.05),而大肠杆菌无明显变化(P〉O.05)。杆球比下降(P〈0.05);禁食组细菌总数、类杆菌、肠球菌和双歧杆菌计数均明显降低(P〈0.05),大肠杆菌计数无明显改变(P〉0.05),杆球比下降(P〈0.05)。术后早期进食组与术后禁食组相比,大肠杆菌、肠球菌及细菌总数明显升高(P〈0.05),杆球比下降(P〈0.05)。结论抗生素、肠道准备及禁食均可影响SD大鼠肠道菌群数量和比例的改变,导致肠道菌群失调:术后早期进食对菌群失调有改善作用。 相似文献