小肝综合征研究进展

<正>在活体肝移植(living donor liver transplantation,LDLT)过程中,为充分保障供体安全,移植科医师不得不实行小体积肝移植。由于供肝功能性体积过小无法满足成人受体需求而出现的小肝综合征(small-for-size liver syndrome,SFSS),其特征性表现为小体积肝移植术后持续高胆红素血症、持续凝血功能障碍、大量腹腔积液、肝性脑病等,预后极差。随着移植外科技术和免疫排斥药物的不断成熟     

蚊期和红内期持续表达绿色荧光蛋白的重组约氏疟原虫

目的 构建蚊期、红内期持续表达绿色荧光蛋白（GFP）的约氏疟原虫BY265株。 方法 用SacⅡ酶酶切含有伯氏疟原虫ssu-rrna基因和GFP基因的重组质粒pl0017使之线性化,用电转化的方法将该重组质粒转化入红内期约氏疟原虫BY265株,获BY265-EGFP重组疟原虫,尾静脉注射感染昆明小鼠,24～30 h后用乙胺嘧啶饲喂小鼠5～6 d,鼠尾静脉采血涂片观察原虫感染率。以疟原虫基因组DNA为模板,PCR鉴定转染重组质粒pl0017的约氏疟原虫。斯氏按蚊叮咬感染BY265-EGFP重组疟原虫的小鼠,按蚊血餐后第7天和第16天解剖蚊胃和唾液腺,观察疟原虫能否在蚊体内正常发育。 结果 荧光显微镜观察到呈绿色荧光的红内期各期形态正常的约氏疟原虫。PCR检测结果表明,GFP和ssu-rrna基因已成功整合到约氏疟原虫基因组中。按蚊感染实验证实重组BY265株能在蚊体内正常发育。 结论 构建了蚊期、红内期持续表达绿色荧光蛋白的约氏疟原虫。     

不同种鼠对实验脑型疟发生的影响研究

目的比较昆明小鼠和C57BL/6小鼠作为种鼠对实验脑型疟模型的影响。方法分别以伯氏疟原虫ANKA株感染C57BL/6小鼠和昆明小鼠作为传代用种鼠,当种鼠原虫率为5%～15%时接种子代C57BL/6小鼠,观察两组小鼠原虫率、脑型疟发生率以及死亡率。同时,通过脑组织切片和脑部淋巴细胞的流式检测,观察两组发生脑型疟小鼠的脑部微血管中感染疟原虫红细胞和CD8＋T细胞的粘附情况,另外,通过感染CD8＋TKO小鼠,证实CD8＋T细胞在两组小鼠发生脑型疟中的作用。结果用昆明小鼠作为种鼠的实验组的原虫率和脑型疟发生率均明显高于用C57BL/6小鼠作为种鼠的实验组,发生脑型疟小鼠的脑部组织切片发现,脑部微血管可见明显的感染疟原虫红细胞的粘附和CD8＋T淋巴细胞浸润;而用昆明小鼠作为种鼠感染CD8＋T细胞缺失的C57BL/6小鼠并不能诱导实验脑型疟的发生。结论与C57BL/6小鼠相比,昆明小鼠作为种鼠的实验组的脑型疟发病率更高,而且感染疟原虫红细胞和CD8＋T细胞在脑部微血管内的粘附也是该脑型疟发生的主要因素,因此,更适合用于实验脑型疟模型的建立及其机制的探讨。     

生长抑素对猪小体积肝移植术后门静脉压力梯度及供肝功能的影响

目的探讨生长抑素(SST-14)对猪小体积肝移植术后早期门静脉压力梯度(PPG)的影响及其对供肝功能的保护作用。方法 18对巴马小型猪,体重25~30 kg,随机分为全肝移植对照组4例、30%小体积肝移植组(小肝NS组)7例和30%小体积肝移植+SST干预组(小肝SST组)7例,各组均在非静脉转流条件下行肝移植术;SST-14干预方案:受体门静脉开放前3 min团注125μg,然后以5μg.kg-1.h-1持续给药24 h,小肝NS组以等量生理盐水作为对照。观察比较各组受体7 d累积存活率,再灌注后2 h及术后第1、2、3、5、7天肝肾及凝血功能变化,水柱法经门静脉和下腔静脉测压并计算术中及术后7 d内PPG值的变化,并比较再灌注后2 h各组移植肝病理学改变。结果小肝SST组供肝7 d累积存活率较小肝NS组明显增加(85.7%vs.42.9%),但由于例数较少,差异尚无统计学意义(P=0.0747);与全肝对照组比较,小肝NS组术后总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)水平均显著升高,凝血酶原时间(PT)明显延长,至术后第5天,TBIL和PT值差异仍有统计学意义(P<0.05)。与小肝NS组比较,小肝SST组TBIL、ALT、AST和PT水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.05),术后第5天各指标与全肝对照组比较差异已无统计学意义。再灌注后2 h,小肝SST组移植肝病理损伤较小肝NS组明显减轻,术后7 d内PPG水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 SST-14可显著降低猪小体积肝移植术后早期持续增高的PPG,减轻移植肝病理损伤,从而改善小体积供肝功能,延长受体存活时间。     

术后经导管动脉化疗栓塞对肝内胆管细胞癌患者远期预后的影响

目的 评估术后经导管动脉化疗栓塞(pTACE)对肝内胆管细胞癌(ICC)患者远期预后的影响,并鉴别适合进行术后pTACE辅助治疗的ICC患者.方法 纳入2010年1月至2011年1 2月在第二军医大学东方肝胆外科医院接受根治性切除术治疗的114例ICC患者,通过单因素和多因素分析确定总生存期(()S)和无复发生存期(RFS)的独立危险因素.有l项及以上复发危险因素的患者被定义为高风险组(n=73),没有复发危险因素的被定义为低风险组(n=41),比较pTACE对这两组患者预后的影响.结果 多因素分析结果显示多发肿瘤(HR=3.515,95％CI:2.083～5.932,P＜0.00l)、肿瘤最大径＞5 cm(HR=2.050,95％CI:1.309～3.210,P=0.002)、微血管侵犯(HR=2.287,95％CI:1.104～4.736,P=0.026)、手术切缘阳性(HR=5.089,95％ CI.2.055～12.600,P＜0.001)和淋巴结转移(HR=2.880,95％CI:1.579～5.251,P=0.00l)是()S的独立危险因素;多发肿瘤(HR=2.752,95％CI:1.619～4.678,P＜0.001)、肿瘤最大径＞5 cm(HR=2.010,95％CI:1.298～3.113,P=0.002)和微血管侵犯(HR=3.857,95％CI:1.856～8.013,P＜0.001)是RFS的独立危险因素.虽然pTACE不是OS或RFS的独立预后因素,但pTACE可以改善高风险组患者的OS和RFS(P＜0.05).结论 具有术后复发危险因素的ICC患者可从pTACE中获益,应该建议接受pTACE治疗.     

约氏疟原虫环子孢子蛋白对TNF-α刺激人肝癌细胞株核转录因子活化的抑制作用

目的 观察约氏疟原虫环子孢子蛋白（CSP）对肿瘤坏死因子α（TNF-α）刺激人肝癌细胞株HepG2核转录因子-κB （NF-κB）活化的影响。 方法 以约氏疟原虫BY265株子孢子总RNA为模板,用RT-PCR扩增CSP基因的编码区序列并克隆至pFLAG-CMV8载体,构建重组质粒pFLAG-CMV8-CSP。以兔抗CSP多克隆抗体间接免疫荧光法观察pFLAG-CMV8-CSP能否在HepG2细胞中正确表达,及其在细胞中的分布。实验分为3组,A组（阴性对照组）为转染质粒pFLAG-CMV8的HepG2细胞,B组以100 ng/ml TNF-α刺激转染质粒pFLAG-CMV8的HepG2细胞,C组以100 ng/ml TNF-α刺激转染质粒pFLAG-CMV8-CSP的HepG2细胞。采用双荧光素酶试验和凝胶迁移试验（EMSA）检测NF-κB 的核转位及其活化,观察pFLAG-CMV8?鄄CSP对于TNF-α刺激HepG2细胞活化NF-κB是否具有抑制作用。 结果 　质粒pFLAG-CMV8-CSP主要在HepG2细胞胞浆中表达。 检测HepG2细胞浆中NF-κB活性,C组萤火虫荧光素酶活性与海肾荧光素酶活性比值为0.228±0.029,明显低于B组（0.571±0.030）和A组（0.438±0.085）（P＜0.05）。EMSA结果显示,C组的条带明显弱于B组。　结论 位于细胞浆中的疟原虫CSP蛋白通过抑制NF-κB核转位, 从而抑制TNF-α刺激HepG2细胞活化NF-κB。     

正交设计研究多贝斯和硒的抗血小板血栓作用

目的　研究多贝斯与硒 2种药物联合应用抗血小板血栓形成的作用 ,寻求合用的最佳组方剂量。方法　采用 2因素 3水平 [L9(34 ) ]的正交设计 ,观察药物对大鼠动 -静脉旁路血小板血栓形成的影响 ,用 SPSS软件统计实验结果。结果　在抑制血栓形成方面 ,多贝斯的作用强于亚硒酸钠 ;多贝斯的低剂量 (6 3mg.kg-1)作用最强 ;亚硒酸钠的中剂量 (0 .1mg.kg-1)作用最强。最佳搭配应为多贝斯低剂量加亚硒酸钠中剂量。结论　多贝斯与亚硒酸钠的交互作用有统计学意义 ,两药合用在抗血栓形成中为拮抗作用 ,故不宜合用     

约氏疟原虫17XL和17XNL感染小鼠组织病理学差异研究

目的 观察感染约氏疟原虫17XL(P.y 17XL)和17XNL(P.y 17XNL)小鼠的组织病理学差异.方法 常规腹腔注射感染P.y 17XL和P.y 17XNL,观察感染小鼠原虫率和存活率,以及感染对小鼠贫血、体重的影响;感染后第6天处死小鼠,灌注固定后解剖小鼠取出大脑和脾脏,石蜡包埋切片,HE染色进行组织形态学...     

抗生素对重组约氏疟原虫BY265株感染斯氏按蚊的影响

目的 探讨抗生素对斯氏按蚊感染重组约氏疟原虫BY265-GFP株的影响.方法 在疟原虫感染斯氏按蚊前后分别饲含抗生素的糖水,分别于7 d、16 d观察蚊胃卵囊和唾液腺子孢子情况.结果 饲加入抗生素糖水组蚊胃感染度和感染率、唾液腺子孢子数量明显高于对照组.结论 抗生素可提高重组约氏疟原虫对斯氏按蚊的感染能力.     

10例区域性肝切除联合脾切除及门奇静脉断流术后急性门静脉栓塞患者的护理

总结10例原发性肝癌伴肝硬化门脉高压症伴脾功能亢进患者行区域性肝切除联合脾切除+门奇静脉断流术后并发急性门静脉栓塞的护理经验。护理要点是做好正确及早的抗凝、溶栓、扩血管、增加血容量、抗感染治疗的综合护理,监测中心静脉压变化,严格控制出入量,做好血栓性肠梗阻、肠坏死,感染性休克,肝、肾功能衰竭等并发症的护理,以及发热、疼痛的护理。本组10例患者中,治疗成功8例,死亡2例。