脂肪来源间充质干细胞对大鼠肝移植的免疫调节作用

目的探讨大鼠脂肪来源间充质干细胞(MSC)对大鼠肝移植术后急性排斥反应的作用。方法分离、培养SD大鼠MSC,体外混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,研究MSC对Wistar大鼠T细胞增殖的抑制作用。以SD与Wistar大鼠为供受体建立肝移植模型。随机分为MSC处理组与空白对照组,术后第7天检测肝功能、血清白细胞介素(IL)-2和白细胞介素(IL)-10水平、肝组织病理形态及肝细胞凋亡。结果体外MLC中,Wistar大鼠T细胞增殖明显受抑,抑制率为48.44%。实验组血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、IL-2、IL-10分别为(134.2±45.0)、(162.5±30.5)U/L、(30.6±5.4)μmol/L、(187.35±18.26)、(193.95±37.62)μg/L;对照组上述指标分别为(355.6±54.3)、(296.4±71.2)U/L、(145.7±28.6)μmoL/L、(295.73±57.15)、(75.12±11.23)μg/L,两组差异有统计学意义(P<0.05);病检提示实验组排斥反应较对照组明显减轻;脱氧脲核苷酸缺口末端标记(TUNEL)检测提示实验组肝细胞凋亡程度明显低于对照组(P<0.05)。结论供体来源MSC能明显抑制MLC体系中受体源T细胞的增殖,并能显著减轻大鼠肝移植术后急性排斥反应。     

小鼠原位脂肪肝移植模型的建立

目的　建立了ob/ob小鼠脂肪肝移植模型 ,探讨保证建模成功的关键因素。方法　采用小鼠非动脉化肝移植技术 ,5～ 7周肥胖小鼠为供体 ,正常小鼠为受体 ,双袖套法行原位肝移植。受体肝组织行HE染色和油红O染色 ,血清ALT、AST水平检测采用常规生化分析法。结果非脂肪肝移植组 (lean to lean)受体长期存活率 (n =10 )为 70 % ,脂肪肝移植组 (ob/obtoagematchedlean)受体存活率为 0 (n =10 ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。脂肪肝移植给体积相当的正常小鼠 ,其短期存活率为 3 0 % (n =10 ) ,所有小鼠术后存活并苏醒 ,但均未超过 2 4h。脂肪肝移植受体ALT水平为 (62 85± 2 93 7)U /L ,AST为 (5 812± 2 942 )U /L ;而正常小鼠移植组ALT与AST水平分别为 (5 96± 114 )U /L ,(1796± 870 )U/L ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,组织学检测显示大量胆管中央凝固性坏死伴出血。结论　该模型的成功建立为我们提供了一种新的肝原发性肝无功能移植模型 ,为脂肪肝移植后脂肪肝细胞受损的机制研究奠定了基础。     

间歇性肝门阻断是原发性肝癌术后早期肝内复发的一项危险因素

目的 探讨间歇性肝门阻断对原发性肝癌术后肝内转移的影响.方法 回顾性分析335例原发性肝癌患者临床资料.所有患者均行肝叶切除术,以阻断入肝血流的方法分为两组:(1)间歇性肝门阻断组:97例,Pringle方法间歇性阻断肝门,每个循环阻断15 min,开放5 min.可重复2～3个循环.(2)其他阻断方法(对照)组:238例,包括预处理阻断法、单纯Pringle法、选择性入肝血流阻断法等.术后每4周,定期复查肝脏功能各项指标及甲胎蛋白,肝脏彩色多普勒超声和(或)CT、MRI,平均随访26.5个月.结果 围手术期死亡6例(1.8％).间歇性肝门阻断组1、2年复发率分别为31.6％(30/95)和48.4％(46/95),明显高于对照组的21.4％(50/234)和38.0％(89/234)(P＜0.05).间歇性肝门阻断组1、2年的生存率分别为70.5％(67/95)和53.7％(51/95),与对照组的68.8％(161/234)和55.6％(130/234)比较,无统计学差异(P＞0.05).为排除其他肝内复发相关因素的影响,我们调整了观察病例标准:肿瘤≥5 cm;术后4周AFP降至正常;术中B超阴性.间歇性肝门阻断组与对照组纳入病例分别为79例和155例.结果两组1、2年复发率分别为29.1％比18.7和46.8％比35.5％,间歇性肝门阻断组仍明显高于对照组(P＜0.05),但1、2年生存率无明显差别.结论 间歇性肝门阻断是导致原发性肝癌术后早期肝内复发的一项危险因素,临床应慎用.     

荧光显像技术在胆道外科中的应用

有效识别胆道解剖结构是保证胆道手术安全的关键因素。应用荧光染料吲哚菁绿进行术中荧光胆道显像,有助于辅助胆道解剖结构的识别,实现实时手术导航。通过对荧光胆道显像技术的有效应用,可以提高胆道手术安全性和手术效率,降低胆道手术的风险。合理的给药方案及规范的手术流程是提高荧光胆道显像应用效果的关键。     

大鼠急性胰腺炎细胞凋亡与Notch-1表达关系的研究

目的探讨大鼠急性胰腺炎时Notch-1的表达及其与胰腺细胞凋亡的关系。方法用不同浓度的牛磺胆酸钠逆行胆胰管注射分别建立急性轻型胰腺炎（MAP）及急性重型胰腺炎模型（SAP），采用TUNEL、Westernblot以及实时定量PCR的方法分别检测不同类型急性胰腺炎在不同时相的细胞凋亡指数、Notch-1蛋白以及Notch-lmRNA的表达水平变化。结果MAP组在建模后4～24h内细胞凋亡指数均明显升高，但各时点之间细胞凋亡指数相差不大；SAP组在建模4h后细胞凋亡指数最高，其后逐渐下降，两组之间细胞凋亡指数有显著性差异。建模后4h开始，各时点SAP组和MAP组的Notch1表达均有上升，但在SAP组的Notch-l表达明显高于MAP组，两组之间相比有显著差异；MAP组Notch-l表达的峰值时问是建模后12h，而SAP组Notch-1表达的峰值时间是建模后8h。结论不同类型急性胰腺炎细胞凋亡指数及Notch1的表达均有明显差异，Notch-1的过度表达可能通过抑制细胞凋亡而加重急性胰腺炎的病情。     

近端胃切除术治疗断流术后再次上消化道出血的临床疗效分析

目的探讨近端胃切除术（Phemister术）对门静脉高压症行脾切除加贲门周围血管离断术术后再次出血的临床疗效。方法对我院肝胆外科2009年6月至2014年1月收治的26例断流术后再次上消化道出血的患者行近端胃切除术的临床资料及术后随访资料进行分析。结果26例均取得满意的止血效果,其中5例急诊手术,1例行术中胃镜下食管中上段曲张静脉套扎术（EVL）并空肠造瘘留置肠内营养管。2例术后吻合口出血,经输血、药物止血、抑酸及护胃等治疗止血;1例吻合口瘘,经肠外营养及通畅引流等治愈;5例出现大量腹水,经营养、补充白蛋白、利尿等治疗好转。随访中4例发现食管静脉曲张并行EVL,1例于术后13个月因上消化道出血死亡。结论对于门静脉高压症断流术后再出血患者经药物、内镜或介入（TIPS）等非手术治疗效果不满意者,近端胃切除术治疗效果确切。     

腹腔镜肝切除手术技巧

目的探讨腹腔镜复杂肝切除手术技巧并评价其临床疗效。方法本研究利用腹腔镜下易于建立隧道的特点,通过在肝实质内重要管道附近建立隧道,快速安全地离断肝实质,从而提高手术安全性,回顾性分析自2014年9月至2016年6月在华中科技大学同济医学院附属协和医院肝胆外科实施52例腹腔镜规则性肝切除病人的临床资料,分析平均手术时间、术中出血量、术后住院时间和并发症发生率等指标。结果所有病人均顺利完成手术,无中转开腹及围手术期死亡,右半肝切除平均手术时间为(220±45)min,术中出血量为(210±92)ml;肝段切除手术时间为(100±35)min,术中出血量为(300±130)ml;术后平均住院时间为(11±2)d,1例病人术后发生胆漏,并发症发生率为1.9%。结论通过在肝实质内重要管道附近建立隧道可以安全快速地完成腹腔镜下复杂肝切除术,降低术中出血风险,是一种简便易行且安全可行的手术方式,值得临床推广。     

腹腔镜门静脉高压症外科治疗发展与新断流术

在当前微创外科时代,门奇静脉断流术取得一系列大的进展,例如,选择性贲门周围血管离断术的提出和应用、断流术时行脾切除术的适应证与禁忌证,以及新一代外科手术器械和腹腔镜技术在断流术和脾切除术中的应用等。实践表明,腹腔镜脾切除术贲门周围血管离断术是安全、简单和有效的手术术式,肝硬化门静脉高压症患者也适用。为了进一步证实这种新门奇静脉断流术的疗效,今后有待开展前瞻性、随机性、大样本的研究。     

胰液端粒酶活性与K-ras检测对胰腺癌的诊断价值

目的　检测胰腺癌和慢性胰腺炎患者胰液中K ras基因突变和端粒酶活性 ,探讨端粒酶活性与K ras基因突变联合检测对胰腺癌患者诊断价值。方法　收集 2 4例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎患者胰液 ,K ras基因突变采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性 ( polymerasechianreaction -restrictionfragmentlengthpolymorphism ,PCR -RFLP)检测 ,端粒酶活性检测采用端粒末端重复序列扩增技术 (telomericrepeatamplificationprotocol ,TRAP)。 结果　胰腺癌中K ras基因突变率为 87.5 % ( 2 1/2 4) ,慢性胰腺炎中K ras基因突变率仅为 2 1.3 % ( 3 /14 ) ,差异有显著性 (P<0 .0 1) ;在 2 4例胰腺癌中端粒酶阳性检出率为 83 .3 % ( 2 0 /2 4) ;而 14例慢性胰腺炎胰液中端粒酶阳性检出率为 2 8.6% ( 4 /2 4) ,差异同样具有显著性 (P <0 .0 1)。K ras基因突变与端粒酶活性检测诊断胰腺癌的特敏感性分别为 87.5 % ,83 .3 % ;两者联合检测诊断胰腺癌的敏感性为 85 .5 % ,特异性达到 85 .7%。结论　联合检测胰液中K ras基因与端粒酶活性可提高胰腺癌诊断的敏感性和特异性 ,对胰腺癌筛查、诊断与鉴别诊断有一定临床意义     

间断短时血滤对重症急性胰腺炎患者免疫功能的影响及意义

目的　探讨间断短时血滤 (ISVVH )对重症急性胰腺炎 (SAP)患者免疫功能的影响及意义。方法　将APACHEII评分≥ 14分和出现液体负平衡分别作为血滤 (HF)重要的适应证和最终停滤指征之一 ,对符合指征的 61例患者 ,行ISVVH治疗 3 1例 (IS组 ) ,未行HF的 3 0例作对比(N组 )。观察APACHEII评分 ,血浆降钙素原 (PCT)水平 ,外周血CD3 、CD3 CD4 、CD3 CD8 淋巴细胞计数、CD4 /CD8 比值 ,HLA -DR CD14 细胞占CD14 细胞的比例和相关预后指标。结果　入组后第 4和第 10天 ,IS组APACHEⅡ评分明显低于N组 ,P <0 .0 5。入组后第 7和第 14天 ,反映免疫功能的指标外周血CD3 淋巴细胞计数、CD4 /CD8 比值 ,HLA -DR CD14 /CD14 比例均高于N组 ,P <0 .0 5。同时 ,细菌感染标志物PCT半定量低于N组 ,P <0 .0 5 ;感染所致严重并发症率亦有下降趋势。结论　SAP早期ISVVH治疗有利于改善机体免疫功能 ,控制病情 ,提高疗效