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利用重组的丙型肝炎病毒非结构区(HCVNS5)抗原建立了酶免疫试验(EIA),对25例输血后丙型肝炎进行了不同区抗体及丙氨酸转氨酶(ALT)的动态研究,同时对156例慢性丙型肝炎患者血清进行HCVRNA和抗-NS5平行检测,两者符合率为64.1%。抗-NS5抗体首次检出时间为30~575天(182.9±168.5),晚于ALT异常和其他区抗体的出现时间。在感染后1,3,6,12和24个月后抗-NS5的阳性率分别为28%,40%,52%,68%和76%。抗-NS5的动态变化类型为四种:一过性阳性、间歇性阳性、持续性阳性和2年内持续阴性 相似文献
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目的 制备人红细胞表面血型糖蛋白A单链抗体。方法 从可分泌抗人红细胞表面血型糖蛋白A单克隆抗体的杂交瘤细胞中 ,分别扩增出编码其轻、重链可变区基因的cDNA ,通过连接序列组建单链抗体基因 ,将该基因导入毕赤酵母中 ,筛选工程菌株。结果 构建了抗GPA单链抗体基因 ,获得了分泌型表达单链抗体的毕赤酵母菌株 ,工程菌株可表达 30kD蛋白 ,ELASA证明其具有与GPA特异结合活性。结论 该单链抗体保留了亲本抗体的活性 ,为研制红细胞抗体快速诊断试剂奠定了基础 相似文献
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本文采用~(35)S标记的脱氧三磷酸核苷酸,以双脱氧核苷酸链终止法,分析了克隆于M13噬菌体的白介素-Ⅱ(以下简称IL-Ⅱ)DNA AluI片段的序列。其中包括XbaⅠ、HaeⅢ、B_(st)NI、HinfI限制性核酸内切酶位点。对于研究IL-Ⅱ基因重组、探针制备以及基因表达具有一定的意义。 相似文献
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研究慢性肝炎病人血清,肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒5‘非编码区变异情况。方法:收集10例慢性肝炎病人及4例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织,检测抗HCV抗体阳性,进行HCV5’非编码区RNA的逆转录PCR扩增,PCR产物进行单链构象多态性分析,并对部分病例序列进行测定。 相似文献
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目的:研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒(HCV)5'非编码区变异情况.方法:收集10例慢性肝炎病人及4例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织,检测抗HCV抗体阳性,进行HCV5'非编码区RNA的逆转录PCR扩增,PCR产物进行单链构象多态性分析,并对部分病例序列进行测定.结果:6例慢性肝炎病人血清及3例肝细胞肝癌组织中检测到HCVRNA,单链构象多态性分析显示各例条带之间无明显差异,对1例肝细胞肝癌组织中HCV5'非编码区cDNAPCR产物的序列测定表明它与HCV-1的同源性为97.3%,与HCV-BK的同源性为97.7%.结论:我们的结果提示在西安地区HCV5'非编码区几乎是一样的,并进一步证实不同地区HCV5'非编码区的高度保守性. 相似文献
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采用基因工程技术,使克隆到大肠杆菌质粒上的 HBV 基因,经过体外切割重组,使其中的 HBcAg基因能在大肠杆菌中表达。以这种工程菌裂解液作为抗原,建立了检测血清中抗-HBc 和抗-HBcIgM的 ELISA方法。在与用美国Abbott厂的同类试剂盒进行的对比测定中,38份标本的抗 HBc检测结果,除 1份外,22份阳性和 15份阴性全部符合。40价标本抗HBcIgM检测结果,20份阳性和20份阴性亦完全相符。 相似文献
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输血后丙型肝炎病毒血症,抗体及转氨酶动态研究 总被引:8,自引:1,他引:8
对10例输血后丙型肝炎进行了病毒血症、抗体及丙氨酸转氨酶(ALT)动态研究。用套式PCR法检测丙型肝炎病毒(HCV)RNA,首次检出时间为输血后15~87天,平均40.3±20.1天,持续或间歇阳性超过1年者7例。抗HCVC100.N14、P22和ScNS3/4和5抗体首次阳转时间分别为输血后33~437(119.7±119.5)天、52~166(77.9±35.6)天、33~103(55.0±23.8)天和33~66(40.1±13.5)天,该4种抗体阳转后都持续1年以上。ALT首次异常时间为输血后15~60天,平均37.9±13.9天,异常超过1年者6例。 相似文献
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登革病毒E蛋白区段基因克隆及高效表达 总被引:2,自引:0,他引:2
目的进行登革病毒E蛋白区段的高效表达,制备抗原,为分析T、B细胞表位及免疫功能的研究奠定基础。方法以含有D2VE区的质粒p30.VD2为模板,PCR扩增了编码D2VE蛋白308~468aa区段的基因片段,以pMY为表达载体,构建了表达质粒pDE1,并用酶切法使之缺失跨膜区疏水aa较多的编码序列,又构建了表达质粒pDE2,分别转化大肠杆菌,获得了不同的工程菌株。经诱导培养,SDS-PAGE,免疫印迹及酶联检测分析表达产物。结果含pDE1质粒工程株只能表达微量的特异性蛋白;而含pDE2质粒的工程菌株则能高效表达D2V特异性E蛋白,重组表达产物占菌体蛋白的25.31%。用4mol/L尿素溶解包涵体,上清中E蛋白纯度可达80%。以粗提物包板进行酶联检测,结果表明,该重组E蛋白具有DV4个型交叉抗原的特性。结论缺失C末端疏水区编码序列的D2VE基因片段,可在E.coli中获得高效表达,其表达产物具有DV属特异性。 相似文献