垂体腺瘤细胞VEGF表达与细胞因子分泌的关系

目的:探讨垂体腺瘤细胞株HP75 VEGF表达与细胞因子IL-1α和IL-6分泌的关系。方法:HP75细胞常规培养,经各种因素处理后,取培养上清液,采用ELISA方法分别检测VEGF、IL-1α和IL-6的分泌水平。结果:①HP75细胞时间依赖性分泌VEGF、IL-1α和IL-6;②较大剂量的IL-1α剂量依赖性的刺激VEGF表达;③所用各种剂量的IL-6对VEGF的分泌均无显著影响;④IL-1α和IL-6中和抗体对VEGF基础分泌无显著影响。结论:VEGF的表达与IL-1α和IL-6的分泌密切相关,提示细胞因子在垂体腺瘤的生长过程中发挥重要作用。     

雌二醇对骨髓基质细胞核结合因子α1基因表达的影响

目的: 研究骨髓基质细胞(MSCs)在向成骨细胞(OB)分化的条件培养体系中,17β-雌二醇(E2)对其核结合因子α1(core binding factor α1, Cbf α1)基因表达的影响,探讨E2对OB生成的作用及绝经后高转换骨代谢的可能机制. 方法: 取自3 mo龄雌性SD大鼠MSCs在生长培养基中传代后,用1,25(OH)2D3和地塞米松(DEX)诱导MSCs向OB分化. 应用半定量RT-PCR技术,观察不同浓度E2对MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA表达的影响;以α-磷酸奈酚为底物,测定细胞碱性磷酸酶(ALP)的活性;Van Gieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量. 结果: E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA的表达,从(23.4±1.8)%降至(15.8±1.5)%和(5.8±0.8)%(P<0.05);细胞ALP活性随E2浓度增加而降低,从 (706±37) nkat@g-1(protein)降至(63±5)nkat@g-1(P<0.05). E2降低细胞Ⅰ型胶原的合成,用Van Gieson染色细胞,随着E2浓度的增加,胞质染色由鲜红、淡红到黄色. 结论: E2能明显抑制MSCs分化过程中Cbf α1 mRNA的表达,减少OB的生成.     

雌二醇对大鼠骨髓基质细胞过氧化物酶增殖活化受体γ2基因表达的影响

背景:雌二醇能否改变骨髓基质细胞分化过程中过氧化物酶增殖活化受体γ2-mRNA的表达进而影响其向成骨细胞分化有待研究。目的:观察骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇对其过氧化物酶增殖活化受体γ2mRNA及蛋白表达的影响。设计:对比观察实验。单位:成都军区总医院中心实验室,德阳市人民医院检验科,成都百奥生物技术有限公司。材料:选用1只雌性SD大鼠,3月龄,清洁级,体质量(200±20)g,由成都中医药大学实验动物研究中心提供(动物许可证号码11)。DMEM培养液购自Hyclone,1,25一双羟维生素D3、地塞米松和雌二醇购自Sigma公司,引物用Jellyfish软件设计,由大连宝生物技术有限公司合成。RT-PCR试剂盒和RNA提取试剂盒均由大连宝生物提供。兔抗山羊多抗(北京中山生物技术有限公司),山羊抗鼠PPARγ2抗体和Western Blotting增强化学发光试剂均购自Santa Cruz公司。方法:实验于2001-04/2002-07在成都军区总医院中心实验室和成都百奥生物技术有限公司完成。①无菌条件下分离大鼠骨髓基质细胞,1,25一双羟维生素D3和地塞米松诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,观察细胞生长情况。②用0,0.1,10和1000nmol/L不同浓度雌二醇对细胞分化过程进行干预3d。培养细胞用Tris-Triton X-100缓冲液加超声粉碎裂解细胞,在Beckman CX-7生化分析仪上测定碱性磷酸酶的活性,观察不同浓度雌二醇条件下细胞产生碱性磷酸酶的情况。③100g/L中性甲醛固定培养于24孔板的骨髓基质细胞,Weigert苏木素染液染色10min,自来水冲洗,5g/L盐酸乙醇分化,Van Gieson染色,体积分数为0.95乙醇分化脱水,二甲苯透明,显微镜下观察并照相,观察细胞胶原合成情况。④应用半定量RT-PCR及Northern blot、Western blot技术,观察不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中PPAR-γ2mRNA及蛋白表达的影响。主要观察指标:①骨髓基质细胞生长情况、细胞胶原合成情况。②不同浓度雌二醇条件下细胞产生碱性磷酸酶的情况。③不同浓度雌二醇对骨髓基质细胞分化过程中PPAR-γ2mRNA及蛋白表达的影响。结果:①骨髓基质细胞接种后4h开始贴壁,24～72h可见贴壁细胞明显增大且分裂增殖,细胞呈三角形,多角形或梭形。3d后首次换液,贴壁细胞体积增大,呈集落生长,10d左右融合成遍。多次传代的骨髓基质细胞呈有序的成纤维细胞样分布。②随着雌二醇浓度的增加,胞浆染色越淡,由鲜红、淡红到黄色。胞浆呈红色说明有胶原合成,红色越深,表明胶原越多。③不同浓度雌二醇条件下细胞均能产生碱性磷酸酶,其活性随雌二醇浓度增加而降低,雌二醇浓度从0nmol/L增加到1000nmol/L时,碱性磷酸酶从(710.1±41.7)nkat/g降至(60.0±11.7)nkat/g(t=29.0,P<0.01)。④雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时,PPAR-γ2mRNA的表达量均明显高于雌二醇0mol/L组(t=6.1,7.2,11.5,P<0.01),Northern blot结果显示雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时PPAR-γ2mRNA表达量分别为(4.0±0.4)%,(1.7±0.2)%,(2.8±0.2)%,明显高于雌二醇0mol/L组[(1.5±0.1)%,t=5.4,105.0,14.2,P<0.01]。⑤Western Blot检测结果显示雌二醇能明显增加骨髓基质细胞PPAR-γ2蛋白的表达。雌二醇浓度为0.1,10和1000nmol/L时,PPAR-γ2蛋白的表达量分别为(2.2±0.2)%,(2.6±0.2)%,(4.1±0.2)%,明显高于雌二醇0mol/L组[(1.2±0.10)%,t=6.6,8.5,13.2,P<0.01]。结论:雌二醇能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞碱性磷酸酶的表达,同时促进骨髓基质细胞内过氧化物酶增殖活化受体γ2mRNA和蛋白的表达。     

130株阴沟肠杆菌的分布及耐药性趋势分析

目的分析德阳市人民医院2009～2012年住院患者细菌培养标本中阴沟肠杆菌的分布及临床常见抗生素的药物敏感性，为临床合理使用抗菌药物提供参考。方法采用Phionx-100全自动细菌分析仪鉴定到种，纸片扩散法进行药敏试验。结果2009～2012年共检出阳性标本130株，下呼吸道、泌尿生殖道、手术部位感染居前3位，分别占感染总数的39．2％、27．7％和22．3％；药敏试验结果显示头孢菌素类抗生素明显耐药，其中阿莫西林/克拉维酸和头孢西丁耐药率较高，分别为81．5％和93．8％。氟喹诺酮类、氨基糖苷类、碳青霉烯类药物体外试验敏感性较强，不易产生耐药。结论阴沟肠杆菌对β-内酰胺类药物的耐药性较高，治疗上应慎用，避免诱导β内酰胺酶。氨基糖苷类和氟喹诺酮类药物敏感性较高，可作为治疗之首选。     

微量法快速培养计数尿液中的细菌

微量法快速培养计数尿液中的细菌沈一民，袁成良（成都军区总医院检验科６１００８３）裴晓方（华西医科大学公共卫生学院）尿液中培养出病原菌是尿路感染，肾盂肾炎等泌尿感染性疾病的主要诊断依据，而目的的尿培养所需时间较长，对临床诊治不能提供即时的报告依据，我们...     

血、胆汁淀粉酶及同工酶活性在胆道疾病中变化的意义

目的 :探讨血清、胆汁中淀粉酶和淀粉酶同工酶活性在胆道疾患中改变机理及其临床意义。方法 :采用Beck manCX7生化分析仪分别检测胆管结石、急性胆囊炎、胆囊结石、胆管囊肿、胆管癌患者血淀粉酶、同工酶和部分患者胆汁中淀粉酶活性。结果 :各组病例的血、胆汁淀粉酶及同工酶活性水平均高于正常对照组 ,有非常显著意义 ,P<0 0 1。结论 :通过对胆道疾患血淀粉酶改变的观察 ,显示胆道疾病患者在症状发作期 48%患者血中淀粉酶及同工酶活性增高。胆汁淀粉酶活性增高明显 ,尤其胆管囊肿。揭示血清淀粉酶增高并非诊断急性胰腺炎特异指标 ,在胰胆管异常合流存在和胆道梗阻时亦可出现高血淀粉酶。但急性胰腺炎组P -AMY/T -AMY比值明显高于胆道疾病组 ,有非常显著性差异 ,P <0 0 1 ,二者比值是诊断急性胰腺炎的较好指标     

环境对待测样品测定结果的影响

目的 探讨环境对待测样品测定结果的影响。方法 用称量法测定不同环境（空调与非空调）中新鲜血浆水份的蒸发量；用电极法测定空调条件下不同时间样品电解质的浓度。结果 空调与非空调环境中，血浆的蒸发量相差显；空调环境中不同时间样品测定结果有显性差异。结论 待测样品在空调室内的放置时间对测定结果有明显影响，不能在空调室内放置太久，否则引起结果不可靠。     

吲达帕胺致重度低钾血症伴横纹肌溶解症1例

<正>1临床资料患者,男,60岁,因"双下肢乏力、疼痛4+d,双上肢乏力、疼痛2+d"于2019年8月24日入院。入院4 d前,患者出现双下肢乏力伴疼痛,表现为行走困难,但尚能自行行走,未予重视。入院2 d前,患者开始出现双上肢乏力伴疼痛,但尚能持物上抬,以左上肢为重,并逐渐出现双下肢无力加重,不能自行行走,行走时需人搀扶。患者既往体健,无类似发作。高血压病史1+年,血压最高达180/100 mmHg,口服吲达帕胺控制血压,2.5 mg/次,1次/d,自诉平时血压控制可（具体不详）。无他汀类、喹诺酮类、大环内酯类抗生素、胺碘酮、     

β4GalT1对胶质瘤鼠肿瘤标志物及生存率的影响

目的分析β4GalT1对胶质瘤鼠肿瘤标志物及生存率的影响。方法分别建立小鼠胶质瘤模型(Con)与β4GalT1慢病毒载体干扰的小鼠胶质瘤模型(LEN),分析2组模型鼠IDH1、MGMT、ki-67表达量与生存率。结果LEN组胶质瘤鼠IDH1、MGMT与ki-67表达量均低于Con组,差异有统计学意义(P<0.05);LEN组胶质瘤鼠生存率高于Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论β4GalT1敲低后可明显减少小鼠胶质瘤恶性程度,并能提升小鼠的生存率,具有借鉴意义。