一种新的肿瘤干细胞球囊研究技术——蛋清包埋技术

目的 探索一种新的能长期、高效保存并研究肿瘤干细胞球囊的技术.方法 从恶性胶质瘤原代肿瘤细胞中培养出肿瘤干细胞.将第5代肿瘤干细胞球囊经蛋清石蜡两次包埋、切片后,行HE染色、免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色,并与传统的肿瘤干细胞球囊包埋技术及球囊免疫组织荧光染色实验进行比较.结果 应用蛋清石蜡两次包埋处理的球囊切片经HE染色后,球囊分布均匀、结构完整,胞核、胞浆颜色鲜艳、对比度高.球囊切片的免疫组织化学染色和免疫组织荧光染色能准确定位球囊中阳性细胞和阳性蛋白表达位点,可进行阳性细胞及蛋白的半定量分析.结论 肿瘤干细胞球囊蛋清石蜡两次包埋切片技术能提高实验效率,减少实验误差,节省成本,优于传统球囊包埋技术及传统球囊免疫荧光技术.     

储存血细胞中非编码RNA研究进展

非编码RNA(Non-coding RNA,ncRNA)是一类不编码蛋白质的RNA.在红细胞及血小板储存损伤发生发展中起调控作用的非编码RNA主要集中在microRNA、lncRNA及circRNA,本文将围绕此3种非编码RNA在红细胞及血小板储存损伤中的作用展开探讨.     

储存红细胞中circRNA变化对泛素介导蛋白水解通路调控的预测分析

目的 探讨储存红细胞中circRNA对泛素蛋白水解通路调节的可能机制及其在红细胞储存损伤中可能发挥的作用的预测分析.方法 健康无偿献血者3(人)份血液制备的悬浮红细胞,过滤白细胞后平均分为新鲜组(0 d组),4℃储存20 d红细胞组(20 d组),4℃储存40 d红细胞组(40 d组);对3组标本用高通量测序检测,然后...     

槲皮素调节葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期基因的表达

目的 研究槲皮素对葡萄糖氧剥夺损伤星形胶质细胞基因表达的影响及作用机制.方法 将原代培养成熟的星形胶质细胞分为单纯葡萄糖氧剥夺组和葡萄糖氧剥夺联合槲皮素处理组(槲皮素处理组),用基因芯片筛查缺血缺氧4h后的槲皮素处理对星形胶质细胞基因表达变化的影响,并用实时定量PCR(qRT-PCR)对差异表达基因进行了验证.结果 与单纯葡萄糖氧剥夺组相比,槲皮素处理组基因表达谱芯片筛查出的31个基因与细胞周期及其相关调控密切相关,其中上调基因为5个,下调基因26个.用qRT-PCR对其中6个基因进行了验证,检测结果和基因芯片分析结果一致.结论 槲皮素能调控葡萄糖氧剥夺损伤的星形胶质细胞细胞周期相关基因的表达.     

miRNA作为血小板储存损伤标志物研究初探

目的 探讨血小板(PLT)储存过程中microRNA(miRNA)的表达变化,PLT功能相关蛋白表达情况,以及与PLT聚集功能的关系.方法 采集机采PLT于(22±2)℃下震荡保存,使用miRNA表达谱芯片检测PLT内miRNA表达及变化.实时荧光定量PCR(qPCR)检测机采PLT储存过程中与聚集功能相关的miRNA...     

槲皮素对胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响

目的探讨黄酮类化合物槲皮素对人胶质瘤U87细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将U87细胞分成Q0、
Q50、Q100和Q150 4个组,Q0组加适量二甲亚砜（槲皮素溶剂）处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100、150 μmol/L。分别
通过transwell体外侵袭实验、transwell体外迁移实验、Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移能力,增殖
能力及其细胞周期的影响。结果槲皮素处理36 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为：52.08%、24.63%
和13.13%,P均<0.05。槲皮素处理12 h后,与对照组相比,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为：49.46%、26.78%和14.56%,P
均<0.05。槲皮素处理24 h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为25.21%、18.38%、16.74%和15.24%。G0/Gl期C6细
胞所占比例分别为71.14%、72.71%、69.29%、66.47%,S 期分别为25.32%、22.48%、21.96%、23.32%,G2/M 期分别为3.53%、
4.80%、8.75%、10.25%;Q100、Q150组的G2/M期细胞比例与Q0组比较,P均<0.05。结论槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移
能力;并可通过阻断U87细胞的细胞周期进程来抑制其增殖。
     

储存红细胞中表达降低的circRNA以及其靶基因预测的研究

目的 探讨储存红细胞中表达降低的circRNA靶基因预测及其与储存损伤的关系.方法 3(人)份血样来自健康无偿献血者血液制备的悬浮红细胞,滤除白细胞后均分为新鲜组(0 d),4℃储存20 d红细胞组(储存组);对2组标本用高通量测序检测,选取下降明显的10个circRNA做PCR验证,用circBase和mirTarB...     

VISTA信号阻断对DC-CIK杀伤恶性肿瘤细胞的影响

目的探讨阻断树突状细胞联合细胞因子诱导的杀伤细胞(DC-CIK)表面T细胞激活抑制物免疫球蛋白可变区结构域(VISTA)抗原,抑制由VISTA信号活化引起的免疫负调节,对其杀伤恶性肿瘤细胞的活性的影响。方法采用流式细胞术分析DC-CIK与抗VISTA抗体的结合情况,用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测DC-CIK对人慢性髓系白血病细胞株K562的杀伤效应。通过细胞计数及流式细胞术分析VISTA抗体对DC-CIK增殖和分化的影响。结果培养成熟的DC-CIK与抗VISTA抗体温育后,其抗体结合率可达(10.26±0.57)%。随着效应细胞(DC-CIK)与靶细胞(K562细胞)比例的增高,实验组(经抗VISTA抗体处理的DC-CIK)和对照组(未经处理的DC-CIK)的杀伤活性均显著增高;当效应细胞∶靶细胞为10∶1和20∶1时,实验组的杀伤活性分别为(77.3±6.8)%和(92.8±5.9)%,均明显高于对照组[(64.8±4.0)%、(81.8±5.4)%](P0.01)。温育54 h后,实验组的细胞数明显高于对照组(P0.01),为对照组的1.35倍。实验组CD3~+CD56~+自然杀伤性T细胞(NKT)比例为(35.12±2.13)%,明显高于对照组[(21.35±1.32)%](P0.01)。结论阻断DC-CIK VISTA信号可促进DC-CIK的增殖和分化,增强其对肿瘤细胞的杀伤效应。