稳定表达EGFR胞外区的NIH3T3细胞株的建立及鉴定

目的构建稳定表达表皮生长因子受体(EGFR)胞外区(EGFRex)的NIH3T3细胞株。方法构建带有EGFRex基因的重组真核表达质粒PLNCX2-EGFRex,经脂质体法转染NIH3T3细胞后,用G418筛选阳性克隆,用免疫组化和蛋白质印迹(Western blot)检测EGFRex蛋白的表达,用EGF-EGFP蛋白检测其活性。结果成功构建了真核表达载体PLNCX2-EGFRex。以其转染NIH3T3细胞后,经免疫组化和Western blot检测到EGFRex的表达。在荧光显微镜下见细胞膜上有绿色荧光。结论人EGFRex在NIH3T3细胞内以其天然活性形式稳定表达,为抗体制备奠定了基础。     

叶黄素抑制人前列腺癌PC-3M细胞黏附和转移

目的:探究叶黄素(lutein)对人前列腺癌PC-3M细胞黏附和转移的作用及机制。方法:实验分为对照组和叶黄素低、中、高剂量组。细胞黏附实验观察细胞与基质黏附能力;鬼笔环肽染色法观察细胞伪足的变化;Western印迹法检测桩蛋白(Paxillin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)、 E-钙粘蛋白(E-cadherin)、 N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)的蛋白表达水平;划痕实验和Transwell实验检测细胞侵袭迁移能力;高内涵成像技术观察细胞动态运动情况。结果:与对照组比较,叶黄素组细胞与基质的细胞黏附数量明显减少,细胞伪足也明显减少,同时,与对照组比较,Paxillin、 MMP-2和MMP-9的蛋白水平下降,TIMP-1蛋白水平增加;与对照组比较,叶黄素组细胞迁移率降低,侵袭迁移细胞明显减少;动态检测结果发现,与对照组比较,叶黄素组细胞的位移和运动距离缩短;上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin的蛋白水平上升,N-cadherin和Vimentin的蛋白水平降...     

钬激光辅以尿道扩张治疗尿道狭窄31例

尿道狭窄为泌尿外科常见病,治疗方法很多。各种开放尿道重建手术疗效确切,但操作复杂、技术要求高、手术创伤大,且并发症多;冷刀切开术治疗尿道狭窄虽然损伤小、恢复快,但尿道再次狭窄的发生率较高[1]。笔者2008-12至2011-06采用腔镜下钬激光内切开配合尿道扩张治疗尿道狭窄31例,疗效显著。1临床资料1.1一般情况31例均为男性,27~71岁,平均（42.7±8.8）岁。     

miR-21对食管癌细胞增殖、凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响

目的:探讨miR-21对食管癌细胞增殖及凋亡影响与分子机制.方法:将食管癌细胞分成miR-21-NC组、miR-21组、LY294002组、LY294002+miR-21组、对照组5组,检测miR-21表达情况及食管癌细胞系中PI3K、Akt与p-Akt表达情况.结果:食管癌细胞系的miR-21相对表达量明显高于正常食...     

抗人EGFRvⅢex单克隆抗体的制备及初步鉴定

目的研制抗人表皮生长因子受体突变体Ⅲ胞外区(EGFRvⅢex)单克隆抗体(mAb),并鉴定其特性。方法采用原核表达的EGFRvⅢex蛋白免疫BALB/c小鼠,以间接ELISA法筛选分泌特异性mAb的杂交瘤细胞,采用蛋白印迹、间接免疫荧光和免疫组化染色鉴定mAb的特异性。结果获得1株可稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株。mAb的Ig亚类为IgM,效价为10-6。mAb可识别U87细胞膜上稳定转染的人EGFRvⅢex和SPC-A1细胞膜上高表达的EGFR。结论成功制备1株抗EGFRvⅢex的mAb,经蛋白印迹、免疫荧光和免疫组化染色检测,mAb的特异性良好,能够检测细胞上的EGFR和EGFRvⅢex,为肿瘤的治疗提供了良好的手段。     

浅谈如何提高护理专业学生自主学习人体解剖学的能力

人体解剖学是一门重要的医学基础课程,教学内容多、课时少,在人体解剖教学中培养学生的自主学习能力至关重要,作者从教学条件、教学方法和考核评价体系几个方面入手进行改革,充分调动了学生学习的积极性和主动性,达到了提高教学质量的效果.     

胆道探查术后一期缝合232例

我院自1986年1月~2006年12月共施行胆道探查手术2 234例,其中228例行一期胆道缝合手术,4例行腹腔镜下胆道探查一期缝合手术,共232例,占同期胆道探查手术的10.3%,取得了良好疗效。1临床资料1.1一般资料本组男102例,女130例。年龄16~86岁,平均44岁。单纯胆总管结石12例,胆总管合并胆囊结石220例。全部患者术前均经B超、CT、MRCP、ERCP及PTC检查证实胆管结石。62例作术中胆道造影,16例行术中胆道镜取石检查。急诊手术14例,其余均为择期手术。1.2手术方法取右上腹经腹直肌或肋缘下斜切口,探查胆囊、肝外胆道及肝脏、胰腺。所有患者均行胆…     

手术联合复方玄驹胶囊治疗亚临床型精索静脉曲张不育患者的疗效

精索静脉曲张(VC)系精索静脉血液淤积导致精索静脉蔓状静脉丛扩张、伸长、迂曲改变,是引起男性不育症的重要原因之一。随着诊疗手段的增多及先进仪器的应用,部分临床体检时未被发现的精索静脉曲张患者,也存在精索静脉内径增宽和血液反流,称之为亚临床精索静脉曲张(SVC),与VC一样,其在男性不育症中的发病率达20%~80%[1-2]。而刘永杰等[3]研究表明复方玄驹胶囊可以提高少、弱精子患者的精子密度