异种肝移植模型-转人CD59蛋白基因小鼠的建立

目的　通过显微注射法产生用于异种移植研究的表达人CD5 9蛋白的转基因小鼠模型。方法　实验中利用OMT作为目的基因hCD5 9cDNA的启动子 ,CMV作为报告基因GFP的启动子 ,构建重组质粒 pGOC。通过显微注射法 ,把CMV GFP OMT CD5 9基因片断注射入昆明白小鼠受精卵。结果　产生出 86只F0 代转基因小鼠。鼠尾基因组DNA经PCR法检测 ,12只阳性 ,进一步用Southernblot法检测 1只阳性。结论　通过显微注射法 ,外源基因hCD5 9cDNA在小鼠基因组中得到整合 ,产生出了阳性转人CD5 9蛋白基因小鼠 ,可用于进一步异种移植研究     

严重腹部钝性伤致肠道损伤35例

肠破裂和肠系膜血管断裂是肠道钝性伤中的严重类型 ,如得不到及时诊断和手术治疗 ,常造成严重后果。笔者对35例此类病例的诊治经过进行了回顾分析 ,现报告如下。临　床　资　料本组男 33例 ,女 2例 ;年龄多为 2 0～ 40岁 (2 9例 ,占 82 .9% )。致伤原因 :斗殴伤 2 3例 ,交通伤 8例 ,摔伤 4例。合并脑损伤 2例 ,胸部损伤 3例 ,腹部实质脏器损伤 7例及四肢损伤 9例 ,合并伤发生率为 6 0 .0 % (2 1 35 )。肠管损伤部位主要为小肠 85 .7% (30 35 )。主要症状和体征有 :腹痛 ,腹部压痛、反跳痛及肌紧张 (35例 ) ;腹部移动性浊音 (13例 ) ;肝浊音…     

肝硬化门静脉高压症合并胆石症34例外科治疗体会

回顾性分析肝硬化门静脉高压症合并胆石症34例临床资料。同时手术处理门静脉高压症及胆石症32例，因上消化道大出血行急诊断流而未处理胆石症1例，因肝功能失代偿行肝移植术1例。围手术期死亡3例均与肝功能失代偿及术中大出血密切相关，出血原因为胆囊床撕裂渗血及探查时引起肝短静脉破裂出血。结果提示：胆石症和门静脉高压症手术同时进行不会增加感染的发生率，可减少二次手术机会，但增加了术中大出血的危险性。预防出血的关键是术前纠正凝血机制、术中减少不必要的探查、必要时行胆囊部分切除术、术后加强保肝对症治疗。     

鼠血管平滑肌细胞转人CD59基因的实验研究

目的 :在培养的鼠主动脉平滑肌细胞膜上表达人CD5 9蛋白 ,研究通过转基因方法抑制异种移植超急性排斥反应。方法 :分别从新鲜的鼠主动脉和人脐静脉分离培养鼠主动脉平滑肌细胞、人脐静脉内皮细胞 ,并用免疫荧光和免疫组化的方法鉴定。构建含人CD5 9cDNA的真核细胞表达载体LXSN CD5 9,用脂质体转染法将LXSN和LXSN CD5 9转化进鼠主动脉平滑肌细胞 ,40 0～ 80 0mg·L-1G418筛选得到稳定转化子。流式细胞仪筛选得到表达人CD5 9蛋白最强细胞株。与含有异种活性抗体和补体的人血清和猴血清共孵育 ,分析乳酸脱氢酶 (lacticde hydrogenase ,LDH)释放率测定人CD5 9蛋白功能活性。结果 :与未转基因的对照组细胞比较 ,表达人CD5 9蛋白组细胞与不同浓度人血清和猴血清共孵育时 ,人血清和猴血清中补体及抗体对这些细胞的杀伤作用被显著抑制 ,统计学检验差异有显著性。结论 :通过转基因方法在鼠血管平滑肌细胞膜上表达人补体调节蛋白 ,能使异种移植超急性排斥反应得到抑制     

异种肝移植模型-转入CD59蛋白基因小鼠的建立

目的 通过显微注射法产生用于异种移植研究的表达人CD59蛋白的转基因小鼠模型。方法 实验中利用OMT作为目的基因hCD59 cDNA的启动子．CMV作为报告基因GFP的启动子．构建重组质粒pGOC。通过显微注射法，把CMV-GFP-OMT-CD59基因片断注射入昆明白小鼠受精卵。结果 产生出86只F0代转基因小鼠。鼠尾基因组DNA经PCR法检测，12只阳性．进一步用Southern blot法检测1只阳性。结论 通过显微注射法，外源基因hCD59 cDNA在小鼠基因组中得到整合，产生出了阳性转人CD59蛋白基因小鼠。可用于进一步异种移植研究。