丹酚酸B及欧芹素乙对溶血磷脂酰胆碱刺激牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究溶血磷脂酰胆碱 (L PC)对牛主动脉平滑肌细胞 (BASMC)增殖的影响及丹酚酸 B和欧芹素乙的抑制作用。方法　体外培养 BASMC,用 MTT法测定细胞增殖。结果　 L PC在 2 .5× 10 - 9～ 2 .5× 10 - 6 g/ L 剂量依赖性地促进 BASMC增殖 ;丹酚酸 B(1× 10 - 9～ 1× 10 - 6 mol/ L)和欧芹素乙 (1× 10 - 7～ 1× 10 - 3m ol/ L)浓度依赖性地抑制 L PC的作用。结论　 L PC可促进 BASMC增殖 ,丹酚酸 B和欧芹素乙可抑制 L PC的作用     

我院2009-2011年中药注射剂应用分析

目的:了解我院中药注射剂的使用情况,分析其临床应用的合理性,指导临床合理用药。方法:采集我院药库2009-2011年中药注射剂相关信息,采用金额排序法、用药频度(DDDs)排序法、日均费用(DDC)和排序比进行统计分析。结果:我院2009-2011年中药注射剂的年销售金额分别是1160.40、1526.93、1692.73万元,2010年增幅31.59%,2011年增幅10.86%。3年内,中药注射剂年销售金额占当年全部中成药总销售金额的份额维持在30%左右,抗肿瘤药年销售金额增幅最大,接近8%。消癌平注射液年销售金额3年均排名第1,分别是212.34、296.33、369.34万元。DDDs较大的主要是活血类中药注射剂;而抗肿瘤药则相反。结论:我院中药注射剂临床应用总体较合理,但抗肿瘤类需要适当控制使用。     

HPLC测定左金丸中吴茱萸次碱含量

目的:建立高效液相色谱法测定左金丸中吴茱萸次碱含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。IntersilC_(18)分析色谱柱(4.6mm ID×250mm,粒径5μm),流动相为乙腈—10％乙腈(50:50),流速1ml·min~(-1),检测波长345nm。结果:吴茱萸次碱的理论板数为2100。回归方程Y=-0.2197+0.0000003484X(r=0.9999),线性范围12～60μm·ml~(-1)。平均回收率为96.9％(n=5),RSD 3.7％,最低检出浓度为0.lμg·ml~(-1)。结论:方法简便,结果准确。     

测定β环糊精丹参酮滴耳液中隐丹参酮含量方法的建立

目的建立高效液相色谱测定β环糊精丹参酮滴耳液中隐丹参酮含量的方法。方法采用高效液相色谱法,Intersil C18分析色谱柱(4.6 mm ID×250 mm,粒径5μm),流动相为乙腈和10%乙腈(55∶45),流速1.0 ml/min,检测波长263 nm。结果隐丹参酮保留时间为23.9 min,与相邻峰的分离度大于1.5,理论板数分别为8000。回归方程Y=-0.6242 0.0000007859X,r=0.9998,线性范围12.93~64.64μg/ml,平均回收率为98.8%,RSD1.9%。最低检出浓度为0.1μg/ml。结论该方法操作简便,测定结果准确可靠,可用于β环糊精丹参酮滴耳液中隐丹参酮含量测定。     

高效液相色谱法测定固经丸中黄芩苷含量

目的建立高效液相色谱法测定固经丸中黄芩苷含量的方法。方法采用高效液相色谱法。YWG-NH2分析色谱柱(4.6mmID×250mm,粒径5μm)。流动相乙腈-水(26∶74,含5ml三乙胺,磷酸调pH2.6),流速1.0ml/min,检测波长276nm。结果黄芩苷的理论板数为2950,黄芩苷回归方程y=796121.5x 621926.0,r=0.9999,线性范围20.20~202.0μg/ml。其回收率为100.5%(n=6),RSD2.1%。结论该方法操作简便,结果准确。     

丹酚酸B及欧芹素乙对溶血磷脂酰胆碱刺激牛主动脉平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究溶血磷脂酰胆碱 (L PC)对牛主动脉平滑肌细胞 (BASMC)增殖的影响及丹酚酸 B和欧芹素乙的抑制作用。方法　体外培养 BASMC,用 MTT法测定细胞增殖。结果　 L PC在 2 .5× 10 - 9～ 2 .5× 10 - 6 g/ L 剂量依赖性地促进 BASMC增殖 ;丹酚酸 B(1× 10 - 9～ 1× 10 - 6 mol/ L)和欧芹素乙 (1× 10 - 7～ 1× 10 - 3m ol/ L)浓度依赖性地抑制 L PC的作用。结论　 L PC可促进 BASMC增殖 ,丹酚酸 B和欧芹素乙可抑制 L PC的作用     

携带SEA和CD80双基因的重组腺病毒转染B16细胞体外诱导T淋巴细胞活化的研究

目的:观察恶性黑色素瘤B16细胞经重组腺病毒感染后,表达在B16细胞膜上的SEA和CD80体外能否诱导免疫学反应。方法:B16细胞分别经空载体腺病毒Ad(空)和重组腺病毒Ad-MMRE-mTERT-B7、Ad-MMRE-mTERT-SEA、Ad-MMRE-mTERT-BIS感染后,和小鼠脾淋巴细胞共培养,然后,采用Brdu 酶联免疫法（ELISA）检测淋巴细胞增殖;流式细胞术检测T淋巴细胞亚群增殖;ELISA法检测细胞因子IL-2、TNF-α和IFN-γ的产生。结果:与感染空载体腺病毒Ad(空)和未感染B16细胞相比,经重组腺病毒感染的B16细胞体外能够显著诱导脾淋巴细胞的增殖,其中CD3⁺CD4⁺和CD3⁺CD8⁺T淋巴细胞增殖显著;细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2的产生显著升高;CTLs对肿瘤细胞的杀伤活性显著增强;表达双基因的B16细胞体外诱导免疫应答的能力高于单基因过表达B16细胞。结论:B16细胞经重组腺病毒感染后,表达在细胞膜上的SEA和CD80具有免疫学活性,本研究为今后进一步采用所构建重组腺病毒进行恶性黑色素瘤的免疫基因治疗提供了实验依据。     

mTERT启动子调控SEA/CD80基因治疗小鼠肝癌

目的观察我们以前构建的端粒酶反转录酶启动子调控的葡萄球菌肠毒素A(SEA)/CD80基因重组腺病毒载体对肝癌的疗效和诱导的免疫学效应。方法重组腺病毒采用瘤体内直接注射的方式对小鼠皮下移植性肝癌进行治疗,采用RT-PCR和Western blot方法检测腺病毒注射部位的SEA和CD80 mRNA和蛋白的表达情况;采用ELISpot方法和LDH释放实验分别检测脾脏淋巴细胞中肝癌特异性IFN-γ分泌细胞的频数和细胞毒性T细胞(CTLs)对Hepa1-6细胞的特异杀伤活性;通过观察荷瘤小鼠经治疗后肿瘤体积的变化及生存时间,评价重组腺病毒对肝癌的治疗作用。结果我们构建的腺病毒能够使SEA和/或CD80mRNA和蛋白靶向地在肝癌组织中表达;与空载体组和PBS对照组相比,双基因组和单基因组分泌IFN-γ的T细胞数量均明显增多,CTL对Hepa1-6细胞的特异性杀伤作用均明显增强,荷瘤小鼠肿瘤体积明显减小,生存期明显延长;双基因组的疗效和对免疫系统的激活作用明显高于单基因组。结论我们制备的肿瘤靶向性重组腺病毒对肝癌有良好的治疗作用,联合基因治疗优于单个基因治疗。     

高效液相色谱法测定固经丸中黄芩苷含量

目的建立测定固经丸中黄芩苷含量的高效液相色谱（HPLC）法。方法色谱柱为YWG-NH2分析色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为乙腈-水（26∶74,含5mL三乙胺,磷酸调pH=2.6）,流速1.0mL/min,检测波长276nm。结果黄芩苷的理论塔板数为2950,回归方程为Y=796121.5X＋621926.0,r=0.9999,进样质量浓度线性范围是20.20～202.00μg/mL。平均加样回收率为100.46%,RSD=2.05%（n=6）。结论该方法操作简便、结果准确,可用于固经丸的质量控制。     

两种制粒方法制备口腔速溶片的工艺比较

目的制备盐酸羟考酮口腔速溶片,并初步探讨其速溶机理。方法分别采用流化床一步制粒法和手工湿法制粒两种工艺制备颗粒,比铰颗粒外观、流动性、粒径分布、孔隙结构的差异;颗粒压片后,比较所得片剂在崩解时间上的差异。结果以流动性指数为考察标准,发现采用流化床制得的颗粒均一性、可压缩性、流动性明显好于手工湿法颗粒,前者所得片剂的崩解时间明显快于后者。结论用流化床制粒可获得较为理想的盐酸羟考酮口腔速溶片,其高孔隙颗粒结构与其速溶机理密切相关。