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【摘要】目的 探讨HIV Tat 蛋白是否可以在细胞内影响主要节律基因Clock,Cry,Bmal1,Per的表达。方法 用lipofectamineTM2000将HIVat表达质粒转入PC12细胞,使Tat在PC12细胞中表达。转染48h后提取mRNA和蛋白,分别通过实时荧光定量PCR技术和Western blot技术检测节律基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果 研究结果显示,与未处理组和空质粒组相比,转染组Cry1的表达水平显著升高(P<0.05);Clock的表达水平显著降低(P<0.05);Bmal1和Per的表达水平无明显变化(P>0.05)。 结论 HIV Tat影响了近日节律基因Cry1和Clock的表达,表现为Cry1表达水平升高,Clock表达水平下降,提示TAT蛋白可以影响节律基因的表达并且可能通过对近日节律的影响调节细胞生理功能。 相似文献
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目的以时间治疗学的原理为基础对放射治疗进行改良,以获得更佳的疗效。方法首先将肿瘤细胞LLC细胞悬液接种至已接受2周光暗适应的雄性C57BL/6J小鼠皮下。待肿瘤长至直径1.0厘米时,按特定时间点分组(组Ⅰ照射时间11HALO,组Ⅱ照射时间为23HALO)对小鼠行^60Co-γ射线一次性全身照射。之后观察各组肿瘤大小,并对肿瘤组织行HE染色和PCNA免疫组化染色,进而观察肿瘤细胞形态和增值情况。结果组Ⅰ较组Ⅱ而言,肿瘤再生长的速度更加缓慢,且出现更明显的细胞退行性变和区域性坏死,同时PCNA表达量明显降低。结论在11HALO行放射治疗的小鼠肿瘤生长明显比23HALO行放射治疗的小鼠和未经放射治疗的小鼠缓慢,肿瘤组织受损也相对严重。说明在该时间点行放射治疗有助于提高放疗的效果。 相似文献
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节律蛋白mPER1在NIH3T3细胞增殖和迁移中的作用 总被引:1,自引:1,他引:0
目的 研究PER1蛋白对NIH3T3细胞增殖和迁移的影响.方法 将重组表达质粒pcDNA3.1/mPER1转染入NIH3T3细胞中,并以未转染的NIH3T3细胞为对照,利用MTT法检测细胞增殖的改变.利用RT-PCR技术和Western blot检测节律蛋白mPER1对细胞迁移关键性蛋白基质金属蛋白酶2(MMP-2)表达的影响.结果 MITT法显示PER1表达上调可以抑制NIH3T3细胞增殖,RT-PCR技术和Western blot检测显示在NIH3T3细胞中,当节律蛋白mPER1表达上调时,细胞迁移关键性蛋白MMP-2在RNA和蛋白水平的表达较对照组降低.结论 上调NIH3T3细胞内的PER1蛋白表达能抑制细胞增殖以及细胞迁移的关键性MMP-2在RNA和蛋白水平的表达. 相似文献
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目的对比分析手术与保守方式治疗跟骨骨折的临床疗效。方法将88例跟骨骨折患者分为观察组和对照组,各44例,对照组行保守治疗,观察组行手术治疗,比较两组的临床疗效。结果观察组治疗优良率明显高于对照组(P0.05);观察组治疗后Bohler角、Gissane角及跟骨宽度均优于对照组(P0.05)。结论手术方式在跟骨骨折治疗方面价值较高。 相似文献
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目的:通过构建丝氨酸蛋白酶抑制因子SERPINA3K的原核表达载体,并将其转化到Rosetta-g ami2感受态细胞中,表达重组SERPINA3K,从而为对其功能的深入研究奠定了基础.方法:以小鼠MS-1细胞cDNA为模板通过PCR的方法扩增Serpina 3k基因的表达全片段,再将其插入到原核表达载体pET-41a中,酶切并测序鉴定重组体.将构建好的重组质粒转化大肠杆菌Rosetta-gami2感受态细胞,表达产物用Western blot鉴定.结果:原核表达载体pET-4 1a-Serpina 3k成功构建,可在大肠杆菌Rosetta-gami2中高效表达,得到重组蛋白SERPINA3K,经Western blot鉴定正确.结论:成功构建SERPINA3K原核表达载体且获得表达,为研究SERPINA3K生物学活性及产品开发提供了实验基础. 相似文献
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目的:研究shRAKC1对慢性成瘾小鼠脑组织CREB mRNA、蛋白的表达变化。方法:通过条件性位置偏爱(CPP)实验分析shRAKC1对慢性吗啡成瘾小鼠的作用;通过RT-PCR检测RACK1和CREB的mRNA在成瘾小鼠海马中的表达水平,并采用免疫组化观察RACK1和CREB蛋白的表达情况。结果:慢性成瘾组与生盐水组相比,前者海马区RACK1和CREBmRNA表达升高(p〈0.05),且吗啡诱导的CPP效应增强(p〈0.05),而shRAKC1组与空质粒组相比,前者由吗啡诱导的CPP诱导效应减弱(p〈0.05),同时其海马区RACK1和CREBmRNA表达下降(p〈0.05)。结论:干扰慢性吗啡成瘾小鼠RACK1表达,可以使CREB表达水平下调,并有抑锏吗啡成瘾效应的作用。 相似文献
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目的探讨克氏针张力带内固定和锁骨钩钢板内固定治疗肩锁关节脱位的疗效差异。方法将36例新鲜肩锁关节脱位随机分为2组:A组15例用克氏针张力带固定治疗,B组21例用锁骨钩钢板内固定治疗,2组对喙锁韧带、肩锁韧带及关节囊进行修补。结果2组术后优良率及肩关节再脱位等并发症发生率有统计学差异(P〈0.05)。结论锁骨钩钢板内固定治疗肩锁关节脱位是一种操作简单、创伤小、术后并发症少且疗效确切的方法,疗效明显优于克氏针张力带内固定。 相似文献
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目的研究诱导NIH3T3细胞节律基因表达对细胞紫外线损伤的影响。方法用体外节律诱导剂乙酰肉豆蔻佛波酯诱导NIH-3T3细胞节律基因表达。分别选择mPer2基因表达的谷值和峰值时刻对细胞进行紫外线照射,以非诱导节律的单纯照射组为对照,通过流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,平板克隆形成试验检测细胞增殖情况。结果mPer2基因表达峰值时进行紫外线照射的细胞,与mPer2基因表达谷值时和非诱导节律紫外线照射细胞比较,增殖能力强、凋亡率低、G1期阻滞明显。结论节律基因诱导的NIH3T3细胞的紫外线损伤减小,并与mPer2的基因表达相关,其保护作用可能与mPer2基因过表达有关。 相似文献
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目的 研究节律基因mClock在顺铂诱导小鼠Lewis肺癌细胞(LLC)凋亡中的作用.方法 体外采用12-十四酸佛波酯-13-乙酸盐(PMA)诱导LLC细胞近日节律,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测细胞mClock基因的节律性表达.于诱导后不同时间点,顺铂(CDDP)处理细胞,24 h后四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法和流式细胞术检测(FCM)其对细胞的增殖与凋亡的影响.采用脂质体介导方法将mClock基因转染至LLC细胞,顺铂处理细胞,24 h后MTT法和流式细胞术检测其对细胞的增殖与凋亡的影响.结果 PMA作用LLC后,mClock基因呈现节律性表达.PMA诱导LLC节律表达的不同时间点,细胞对顺铂的敏感性不同.mClock过表达使顺铂作用后LLC凋亡率下降,细胞增殖明显.结论 mClock能够抑制顺铂诱导LLC的凋亡. 相似文献