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人ＴＰＯ成熟肽Ｎ端１９６个氨基酸的表达、纯化及生物学活性研究刘丽田生礼赵建增谢宝树冷爱军血小板生成素（Ｔｈｒｏｍｂｏｐｏｉｅｔｉｎ，ＴＰＯ），ＴＰＯ基因工程方面的工作目前开展的较多，但因对其结构与功能，如糖基化与生物学活性及半衰期的关系了解不够，在设... 相似文献
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重组人肿瘤坏死因子α衍生物11a与原型肿瘤坏死因子α对小鼠的急性毒性比较 总被引：1，自引：0，他引：1
重组人肿瘤坏死因子α衍生物１１ａ与原型肿瘤坏死因子α对小鼠的急性毒性比较刘丽赵建增李景泰谢宝树冷爱军杜孝元（中国人民解放军空军总医院分子生物学研究中心，北京１０００３６）原型肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ，ＴＮＦ）具有良好的抗肿... 相似文献
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目的：比较人正常,增生和癌变前列腺组织中ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达情况。方法：提取事故死亡的正常成年人前列腺组织及手术得到的增生和前列腺癌组织总ＲＮＡ,进行ＲＴ－ＰＣＲ,其产物分别以ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７共有的外显子及ＰＳＰ９４外显子Ⅲ作探针进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析;ＲＴ－ＰＣＲ产物经克隆后进行序列测定。结果：三种前列腺组织中均有ＰＳＰ９４和ＰＳＰ５７ｍＲＮＡ的表达;人 相似文献
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目的：探讨NF－k与TNF抗前列腺癌作用的关系。方法：合成全硫代修饰的双链寡核苷酸BNF－kB抑制剂;培养人前列腺癌细胞PC－3和成纤维细胞L929,休外分析,NF－kB抑制剂对TNF细胞毒作用的影响。制作PC－3细胞裸鼠动物模型,瘤块直径达4mm时,肌注含有94个氨基酸的前列腺分泌蛋白（PSP94）和肿瘤坏死因子衍生物11a融合基因的pcDNA-PSP94-TNFαD11a真核表达质粒DNA,50μg/只,给药一次;肌注NF－kB抑制剂5μmol／只,连续给药10d。设生理盐水和环磷酰胺对照组、pcDNA-PSP94和pcDNA-PSP94-TNF αD11a质粒DNA组、NF－kB抑制剂组。结果以PC－3及L929为靶细胞、NF－kB抑制剂TNF的细胞毒作用无明显影响。动物实验结果显示,pcDNA-PSP94-TNF αD11a和NF－kB抑制剂联合 组抑瘤率为36％,是pcDNA-PSP94-TNFαD11a组的1．8倍,pcDNA-PSP94组与pcDNA－PSP94NF－kB抑制剂组、NF－kB抑制剂组与生理盐水组肿瘤大小均无明显差别。结论NF－kB抑制剂在体内可明显增强TNF的抗前列腺癌作用。 相似文献
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肿瘤坏死因子受体(ＴＮＦｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＴＮＦＲ)分为ＴＮＦＲⅠ和ＴＮＦＲⅡ两类,也称ＴＮＦＲ55和ＴＮＦＲ75,两者均为跨膜糖蛋白。两种跨膜蛋白经蛋白酶作用,其胞外区可从细胞膜表面脱落形成可溶性ＴＮＦ受体(ｓＴＮＦＲ)。近年来,有实验证明ｓＴＮＦＲ在体内、体外能中和ＴＮＦ诱导的细胞毒性和免疫反应〔1〕,具有临床应用潜力。本文报道毕赤酵母系统分泌表达ｓｈＴＮＦＲ75及其表达产物的活性分析。材料和方法菌株、质粒及试剂:大肠杆菌ＤＨ5α、鼠成纤维细胞Ｌ929、酵母整合载体ｐＰＩＣＺαＡ、毕赤酵母细胞ＧＳ115(Ｈｉｓ4-)为… 相似文献
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PSP94—TNFαD11a质粒DNA注射体内表达规律 总被引：1，自引：1，他引：0
将带有目的基因PSP94－TNFαD11a的pcDNA3.0质粒DNA，以50μg／只剂量注射到39只雄性昆明小鼠的股四头肌内，第2、3、4、5、10、15、20、25天分别摘眼球取血收集血清，每组3只动物血清混合。同时取注射部位骨骼肌，研磨后离心取上清。用ELSIA方法检测血甭和骨骼骨上清中融合蛋白的表达，观察不同时间的蛋白表达水平。提取14天骨骼肌组织的总RNA，进行RT－PCR分析目的的基因mRNA的表达水平。结果，在裸质粒注射后9天可检出目的蛋白的表达，第14天出现表达高峰，观察至25天仍可检察到蛋白表达。 相似文献
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为探讨血小板生成素（ＴＰＯ）糖基化与其体内生物学活性的关系，给血小板缺乏症小鼠模型腹腔分别注射相同活性单位酵母系统表达的人ＴＰＯ成熟肽或大肠杆菌表达的人ＴＰＯＮ－端结构域蛋白，连续给药５ｄ，每天一次，末次给药后３ｄ，比较两种ＴＰＯ组动物外周血血小板数量、骨髓巨核细胞培养单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）、骨髓有核细胞ＤＮＡ含量。结果高、中、低剂量的ＴＰＯ成熟肽组动物的血小板数、巨核细胞集落数和骨髓ＤＮＡ含量均明显高于ＴＰＯＮ－端结构域蛋白的相应组（Ｐ＜０．０１）。显示酵母系统表达的ＴＰＯ成熟肽比大肠杆菌表达的ＴＰＯＮ－端结构域有明显的生物学活性，这可能与它们的糖基化程度及半衰期有关。 相似文献
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