丹参注射液促帕金森病移植神经元存活的实验研究

目的　研究丹参注射液对帕金森病移植神经元的促存活作用。方法　用神经毒剂 6羟基多巴胺 ( 6 OHDA)单侧损毁SD大鼠左侧中脑被盖腹侧区 (VTA)和黑质致密部 (SNC)建立动物模型。实验分胚鼠腹侧中脑组织 (VM)移植组、丹参注射液干预组和空白对照组。采用原位末端标记法 (TUNEL)结合流式细胞术及免疫组化方法 ,对 3组移植神经元凋亡和存活情况进行定量分析 ,观察丹参注射液对帕金森病移植神经元的促存活作用。结果　根据TUNEL、酪氨酸羟化酶 (TH)染色和流式细胞仪检测结果 ,丹参注射液干预组较VM移植组移植神经元凋亡率降低 ,凋亡细胞数减少 ,纹状体移植针道和针道周围都可见大量THir阳性细胞 ,而且THir阳性神经元数量明显增多。结论　丹参注射液对帕金森病移植神经元具有促存活作用。     

耳蜗前体细胞体外培养和诱导分化的实验研究

目的通过体外定向诱导耳蜗前体细胞分化，明确耳蜗前体细胞的位置取材，来源及增殖分化特性．建立完善的耳蜗前体细胞的培养体系。方法取耳蜗的Corti器位置，利用无血清培养和单细胞克隆技术，进行细胞培养，在相差显微镜下观察细胞形态及生长状况，并用神经巢蛋白（nestin）、溴脱氧尿嘧啶（Brdu）、MyosinⅦA、P27^KIP1等免疫荧光方法。鉴定耳蜗前体细胞和由耳蜗前体细胞分化而来的内耳毛细胞和内耳支持细胞。同时进行细胞计数。结果从新生大鼠耳蜗分离的组织．经原代和传代培养后，可获得大量未分化，悬浮生长的Nestin阳性细胞团，并具有增殖的能力，诱导分化后的细胞经免疫荧光双标实验可表达Brdu、MyosinⅦA和P27^KIP1阳性。流式细胞仪细胞计数后，发现前体细胞向内耳毛细胞诱导分化的数量较少，向支持细胞分化的较多。结论从新生大鼠耳蜗分离的细胞是具有自我更新和分化潜能的前体细胞，可诱导分化为内耳毛细胞和内耳支持细胞。     

当归补血汤含药血清体外诱导耳蜗干细胞的增殖分化

目的：观察当归补血汤对耳蜗干细胞体外诱导分化的影响,并探讨浓度对其的影响。方法：分离新生大鼠Corti器的耳蜗干细胞进行细胞培养,在相差显微镜下观察细胞形态及生长状况,用Nestin免疫荧光法进行耳蜗干细胞鉴定。采用不同剂量当归补血汤进行诱导分化后,采用MyosinⅦA、P27~(KIP1)免疫荧光方法,鉴定内耳毛细胞和支持细胞,并进行细胞计数。结果：当归补血汤细胞诱导分化的内耳毛细胞和内耳支持细胞数量明显较对照组多,其中剂量为0．5 g/ml组向内耳毛细胞的分化比例最高。结论：当归补血汤可以提高耳蜗干细胞体外分化为内耳毛细胞和支持细胞的数量。其中剂量0．5 g/ml组向内耳毛细胞的分化数量较高。     

蒺藜皂苷诱导SD新生大鼠海马神经干细胞分化的实验研究

目的 探讨蒺藜皂苷对于诱导SD新生大鼠海马神经干细胞(neural stem cells, NSCs)分化的影响作用以及蒺藜皂苷培养液浓度变化对其的影响.方法 采用无血清和单克隆培养方法,将蒺藜皂苷加入离体的海马NSCs的培养液中,应用Nestin、BrdU、NF200、GFAP免疫荧光染色观察NSCs的形态及分化而来的神经元、神经胶质细胞形态,并检测由海马NSCs分化而来的细胞的数量.结果 海马NSCs在无血清培养下,可形成Nestin阳性细胞球.在诱导分化后,免疫荧光染色可见NF阳性细胞、GFAP阳性细胞,而其中20 mg/kg 蒺藜皂苷干预组海马NSCs向神经元的分化比例最高.结论 在蒺藜皂苷的作用下,海马NSCs向神经元分化的数量增多.     

老年糖尿病病人的社区健康教育

对社区32例2型糖尿病老年病人进行评估分析,了解病人对疾病相关知识掌握程度及遵医行为,根据各自特异性进行健康宣教.通过对病人健康指导,病人对糖尿病有了全面的了解和认识,并能较好地控制血糖,降低了并发症的发生,帮助树立正确的健康理念,提高生活质量.     

白藜芦醇抗帕金森病黑质细胞凋亡的实验性研究

目的　研究帕金森病(PD)动物模型黑质细胞的凋亡情况及白藜芦醇对神经的保护作用。方法　成年健康SD大鼠100只,分为5组,每组20只。PD模型组应用脑立体定位仪注入6-羟基多巴胺和0.2 %抗坏血酸生理盐水混合液至中脑黑质,诱发PD模型;白藜芦醇实验组应用脑立体定位仪注入6-羟基多巴胺和白藜芦醇混合液;正常对照组应用脑立体定位仪注入0.2 %抗坏血酸生理盐水混合液,术后观察SD大鼠旋转行为,及应用TH免疫组化和Tunel法观察白藜芦醇对黑质神经元的保护作用。结果　TH染色可见白藜芦醇实验组黑质部位损毁较轻、有较多的残存TH阳性细胞。6-羟基多巴胺模型组TH染色黑质大部毁损,几乎无残存的TH阳性细胞。旋转试验结果,白藜芦醇实验组大鼠旋转次数平均206圈/ 30分;6-羟基多巴胺模型组模型鼠旋转次数平均314圈/ 30分;两者存在统计学差异(P<0.05 )。术后第2天检测黑质细胞凋亡情况,白藜芦醇实验组黑质细胞凋亡较少,细胞棕黑色,可见凋亡小体;6-羟基多巴胺模型组黑质细胞凋亡数量较多。结论　白藜芦醇具有神经保护作用。     

青蒿鞣质抗单纯疱疹病毒机理初探

目的　探讨青蒿鞣质 (CTA)抗单纯疱疹病毒 2型 (HSV- 2 )的作用机理。方法　采用细胞病变效应 (CPE)抑制法和MTT法 ,以阿昔洛韦 (ACV)为阳性对照药物 ,研究青蒿鞣质在体外对HSV -2的直接杀灭、病毒感染阻断、不同时间感染后的CPE抑制效果。结果　CTA对病毒具有明显的直接杀灭作用 ,可以阻断病毒的吸附过程和抑制病毒在细胞内的复制 ,而且CTA对病毒的抑制作用受病毒吸附时间的影响很小 ,具有明显的治疗作用 ,其效果与阳性对照药物无环乌苷 (ACV)相当。结论　CTA体外抗HSV 2作用可以通过多种途径发挥作用。     

影响神经干细胞增殖分化的因素

传统认为哺乳动物和人脑神经细胞一经发育成熟即不再进行增殖、分化 ,不具备再生能力 ,只有细胞的不断退化和死亡 ,因此中枢神经系统损伤后基本上不能恢复。近年来的研究发现 ,胚胎早期脑室和脑室下区、成年脑室区、纹状体、海马齿状回、脊髓等部位神经干细胞分布广泛 ,这些神经干细胞可以分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞。随着对干细胞研究的深入 ,人们已能利用无血清培养、单克隆技术及免疫荧光化学技术对干细胞进行分离、培养和纯化。深入研究脑发育过程中的神经干细胞的增殖分化机制 ,搞清神经干细胞在成年脑内增殖、分化的影…     

丹参注射液促帕金森病移植神经元存活的实验研究

目的 研究丹参注射液对帕金森病移植神经元的促存活作用。方法 用神经毒剂6羟基多巴胺(6-OHDA)单侧损毁SD大鼠左侧中脑被盖腹侧区(VTA)和黑质致密部(SNC)建立动物模型。实验分胚鼠腹侧中脑组织(VM)移植组、丹参注射液干预组和空白对照组。采用原位末端标记法(TUNEL)结合流式细胞术及免疫组化方法，对3组移植神经元凋亡和存活情况进行定量分析，观察丹参注射液对帕金森病移植神经元的促存活作用。结果 根据TUNEL、酪氨酸羟化酶(TH)染色和流式细胞仪检测结果，丹参注射液干预组较VM移植组移植神经元凋亡率降低，凋亡细胞数减少，纹状体移植针道和针道周围都可见大量THir阳性细胞，而且，THir阳性神经元数量明显增多。结论 丹参注射液对帕金森病移植神经元具有促存活作用。