靶向Survivin基因的短发卡RNA在体内对U251细胞移植瘤的影响

Surivin基因属于凋死蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis,IAP）家族，具有抗细胞凋亡、促细胞增殖和促血管形成等多种生物学活性，其在脑胶质瘤发生和发展过程中的作用尚不完全明确，本研究结盟在观察稳定转染靶向Survivin基因的特异性短发卡RNA（shRNA）真核表达载体对人脑胶质母细胞瘤U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响。方法：将U251细胞，稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWHI-SR的U251-SR细胞，以及稳定转染空载体pWHI的U251-P细胞，分别接种于裸鼠背部皮下，建立人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型，定期观察肿瘤生长情况，测定肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线，观察45天后处死动物、称瘤重，采用免疫组化SABC法检测Survivin、增殖细胞核抗原（proliferating cell muclear antigen，PCNA）以及八因子相关抗原（factor Ⅷ related antigen,FⅧRAg）在各组肿瘤标本中的表达，采用TUNEL法检测凋亡细胞，分别计算各组肿瘤标本的增殖指数（proliferative index,PI），凋亡指数（apoptotie index,AI）以及微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：与U251、U251-SR组肿瘤标本，U251-SR组裸鼠肿瘤形成时间延迟，肿瘤生长缓慢，肿瘤体积及瘤重均明显减小（P〈0.01）；U251-P组裸鼠相丝，U251-SR组肿瘤标本Survivin蛋白表达明显下调：PI和MVD明显减少，AI明显升高（P〈0.001）。结论：靶向Survivin基因的sbRNA能够在体内明显抑制U251细胞的肿瘤生长和血管形成，Survivn基因可作为脑胶质瘤基因治疗的一个良好靶点，而RNA干涉（RNA interference,RNAi）技术可为脑胶瘤基因治疗的一个良好靶点，而RNA干涉（RNA interference，RNAi）技术可为脑胶质瘤的基因治疗提供新的重点手段。     

经眶急性开放性颅面伤28例救治体会

急性开放性颅面伤是颅脑损伤的一种特殊类型[1]。自1998年12月至2005年4月我院共救治锐器自眶刺入所致颅面伤28例,疗效满意,现将临床救治体会报告如下。一、对象与方法1.一般资料:本组男19例,女9例。年龄2~56岁,平均(28±3)岁。受伤至入院时间0.5~12h26例,大于12h2例。致伤原因     

Survivin表达与脑胶质瘤增殖、凋亡及血管生成的关系

Survivin是凋亡蛋白抑制因子（IAP）家族的一个新成员，具有强大的抗细胞凋亡、促有丝分裂以及促血管生成作用，并与人类多种肿瘤的形成密切相关。本研究检测了Survivin蛋白在脑胶质瘤中的表达水平，进一步分析了其与脑胶质瘤恶性增殖、凋亡以及血管生成的关系。     

白藜芦醇抑制人脑胶质瘤细胞生长及诱导凋亡比较

 目的 探讨白藜芦醇（Resveratrol，Res）体外抑制U251、U87和SHG-44脑胶质瘤细胞生长及诱导凋亡的不同作用比较，验证Re8确可导致U251细胞凋亡。方法 MTT比色法测量不同剂量的Res作用U251、U87和SHG-44胶质瘤细胞24h后对增殖的影响及不同剂量的Res作用U251、U87和SHG-44细胞6h、24h、48h后的影响。流式细胞仪用Annexin V-FITC和PI双染检测U251、U87和SHG-44细胞凋亡率。HE染色、Hoechst 33342荧光染色、透射电镜（TEM）观察U251细胞形态改变，流式细胞仪测定U251细胞的细胞周期改变。结果 Res明显抑制U251、U87和SHG-44细胞的生长和增殖（P〈0．01）且对U87细胞的抑制作用最强，U251和SHG-44细胞次之；对U251细胞的抑制作用呈浓度及时间依赖性反应；Re8所致的U251、U87和SHG-44胶质瘤细胞凋亡为浓度依赖关系，且对U87细胞的凋亡作用强于U251和SHG-44细胞。U251凋亡细胞的细胞周期主要发生G，期阻滞。结论 Res对U251、U87和SHG-44细胞生长抑制及凋亡作用以U87细胞更明显，对U251细胞的抑制作用呈浓度及时间依赖性反应并引起了其细胞周期改变。     

细胞外钾离子对小鼠神经干细胞凋亡的影响

目的 探讨细胞外钾离子对体外培养神经干细胞增殖活性及凋亡的影响.方法 无血清悬浮培养方法分离培养神经干细胞,取第3～5代培养细胞随机分为对照组,低、中、高浓度氯化钾组,利用MTT法检测不同浓度氯化钾对细胞活性的影响,通过Western Blot检测Caspase-3表达和原位末端标记(TUNEL)技术分析各组细胞凋亡上的差异.结果 干预24 h后,各试验组细胞增殖活性均降低,且与对照组相比有统计学差异(P＜0.01),高浓度氯化钾作用下TUNEL阳性细胞率为27.3%,显著高于对照组7.0%(P＜0.01),而低浓度氯化钾和中等浓度氯化钾作用后TUNEL阳性细胞率分别为4.8%和5.4%,与对照组无显著升高(P＞0.05),且高浓度氯化钾可以上调Caspase-3表达增加.结论 提高细胞外钾离子可以抑制神经干细胞增殖,且高浓度钾离子可以诱导神经干细胞的凋亡.     

人脑肿瘤中SV40大T抗原与pRb形成特异性复合物

目的：探讨ＳＶ４０早期基因编码产物大Ｔ抗原表达及与抑癌蛋白ｐＲｂ的相互作用在人脑肿瘤发生发展中的意义。方法：采用免疫共沉淀ｅｓｔｅｒｎ印迹法检测４３例人脑肿瘤组织及５例正常人脑组织中Ｔａｇ的表达，并对１５例Ｔａｇ阳性瘤组织检测Ｔａｇ－ｐＲｂ复合物的存在。结果：Ｔａｇ在５例室膜瘤及２例脉络丛乳头状瘤中全部表达，垂体腺瘤，星形胶质细胞瘤，脑膜瘤，多形性胶质母细胞瘤及髓母细胞瘤均有Ｔａｇ的表达；     

去骨瓣减压与保留骨瓣治疗高血压脑出血时颅内压变化的比较

高血压脑出血（HICH）手术方式大体可分为传统开颅术和微创治疗两大类，微创手术包括小骨窗清除血肿加引流术、钻孔引流术、锥颅碎吸术等。我们的经验是传统开颅术在缓解颅内压（ICP）方面优于其他治疗方式。为探讨开颅术治疗HICH时如何能更有效地降低ICP，选择我院2002年8月2005年4月收治的187例手术患者资料分析去除骨瓣和保留骨瓣两种方式术后ICP的变化，报告如下。     

14-3-3β在人脑星形细胞瘤中的表达及意义

14-3-3蛋白是一类高度保守的小分子二聚体,研究发现其参与了凋亡、细胞周期调控、细胞信号传导、新生血管形成、细胞骨架构建等多种细胞生理和病理过程[1-5].目前,凋亡抵抗、细胞周期调控以及新生血管的形成被认为是胶质瘤发生的重要机制.本实验拟检测人脑星形细胞瘤中14-3-3蛋白β亚型的表达情况,并分析其表达的意义及其与肿瘤恶性程度的关系.     

白藜芦醇对裸鼠U87细胞移植瘤生长及血管生成的影响

目的 研究白藜芦醇(Res)对人脑胶质瘤系U87细胞的体内抗癌活性及血管生成的影响. 方法 BALB/c裸鼠20只,背部皮下接种胶质瘤细胞U87建立皮下移植瘤模型.随机数字表法分为10、100mg/kgRes治疗组,溶剂对照组,空白对照组,每组5只.观察4组裸鼠移植瘤的生长曲线并应用免疫组织化学法检测瘤组织中微血管密度(MVD)及血管内皮生长因子(VEGF)的表达:采用原位末端标记法(TUNEL)检测瘤组织细胞的凋亡. 结果与空白对照组及溶剂对照组相比,100 mg/kg Res治疗组裸鼠移植瘤的体积、重量降低;100 mg/kg Res治疗组瘤组织中MVD、VEGF的表达明显降低,凋亡细胞数增高,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 Res对U87人脑胶质瘤细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,这可能与Res导致U87移植瘤细胞凋亡及血管生成减少有关.     

Survivin与血管形成

Survivin是凋亡抑制蛋白（inhibitorofapoptosisprotein,IAP）家族的一个重要成员,其不仅具有IAP家族抗细胞凋亡的共同特性,而且具有强大的促细胞增殖和血管形成作用。众所周知,血管生成调节异常与人类许多重大疾病如先天性血管畸形、恶性肿瘤等密切相关。实验表明,survivin在正常和肿瘤组织血管形成中均发挥重要的调控作用。对survivin促进血管形成机制的研究,有助于揭示生理和病理状态下的血管生成机制,对于制定相关疾病抗血管治疗策略也具有重要意义。