限制性显示技术在制备丙型肝炎病毒分型芯片探针的应用性研究

目的探讨限制性显示(restriction display,RD)技术在制备丙型肝炎病毒(HCV)分型芯片探针的可行性.方法用限制性内切酶Sau3A I消化HCV1a、1b、2a亚型全长cDNA,所得的限制性内切酶片段与通用接头相连,通过10个选择性引物进行分组PCR,使得各片段得以扩增并分布于10个亚组中,经聚丙烯酰胺电泳(PAGE)结合银染法进行分离.切胶回收后作3次PCR,得到较纯净的HCV cDNA限制性片段.对这些片段做分子克隆,并测序鉴定.结果由HCV 3个亚型1a、2a、1b的全长cDNA得到66个大小相对均一(200～900bp)的限制性片段,平均每个亚型约22个.测序结果表明,属于HCV基因,可以作为HCV分型芯片的探针.结论RD技术能快速收集大量长度适宜、大小均一的病毒基因片段,适合于分型诊断基因芯片探针的收集.     

碱性成纤维细胞生长因子对牛晶状体上皮细胞增殖的影响及其在牛晶 …

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（bＦＧＦ）在体外对牛晶状体上皮细胞（ＢＬＥＣ） 增殖的影响及确定ＢＬＥＣ是否表达bＦＧＦ蛋白。方法 ＢＬＥＣ原代培养。用不同浓度的bＦＧＦ及＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴＤＲ）处理ＢＬＥＣ３６h后,液闪测定bＦＧＦ对ＢＬＥＣ＾３Ｈ－ＴＤＲ掺入率的。Ｗｅｓｔｅｎ印迹（Ｗｅｓｔｅｎ ｂｌｏｔ）法确 定ＢＬＥＣ是否表达bＦＧＦ蛋白。结果 bＦＧＦ在体外有促进ＢＬＥＣ增殖作用,Ｗｅｓ     

联合手术治疗增生型糖尿病视网膜病变合并白内障的临床观察

目的观察玻璃体手术联合白内障超声乳化术治疗增生型糖尿病视网膜病变(PDR)合并白内障的临床疗效。方法 2006年1月～2009年1月,对我科收治的48例(54眼)PDR合并不同程度白内障患者行白内障超声乳化联合玻璃体手术,观察术后视力改善程度及并发症。结果 51眼(94.44%)视力有不同程度提高,视力下降3眼(5.56%)。联合手术本身引起的最常见并发症包括虹膜新生血管(2眼)和后发性白内障(7眼)。结论玻璃体手术联合白内障超声乳化术治疗PDR合并白内障安全、有效。     

血浆游离DNA中TGR5、RIZ1异常甲基化在肝癌诊断中的价值

目的 研究外周血浆游离DNA中TGR5、RIZ1异常甲基化在肝细胞癌(HCC)诊断中的价值.方法 收集48例HCC和40例健康体检者的血浆,提取血浆游离DNA,运用甲基化特异性PCR(MSP)检测血浆游离DNA中TGR5、RIZ 1甲基化状态,结合其病理资料进行分析.结果 HCC组血浆游离DNATGR5、RIZ1甲基化率分别为68.8％和60.4％;两者联合检测时HCC组甲基化率为72.9％.正常对照组甲基化率分别5.0％和2.5％.TGR5、RIZ1甲基化状态与HCC患者的性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤数目、HBeAg阳性及TNM分期等病理参数无关(P＞0.05).结论TGR5、RIA1甲基化水平在早期HCC血浆中升高,通过联合检测患者TGR5、RIZ1甲基化可作为HCC的诊断指标.     

替奈替普酶对增值型糖尿病视网膜病变玻璃体手术的辅助作用

目的评价替奈替普酶（tenecteplase,TNK-TPA）玻璃体腔注射对增殖性糖尿病视网膜病变（proliferative diabetic retinopathy,PDR）患者增殖膜的溶解、分离作用和对视网膜组织的毒副作用。方法将PDR患者54例55只眼随机分成研究组29例30只眼,对照组25例25只眼。研究组于常规玻璃体切除术前3d,玻璃体腔内纤维增殖膜与视网膜的交界面区注射TNK-TPA50μg/0.1ml;对照组为空白对照。注药前后和玻璃体切除手术后均检查视力、裂隙灯显微镜、双目间接检眼镜、B型超声和标准视网膜电流图（ERG）,随访6个月。结果研究组5只眼在注药后发生了完全性玻璃体后分离,增殖膜-视网膜粘连点松解率、术后6个月视力增长幅度、一次手术视网膜复位率均较对照组高（P〈0.05）;医源性视网膜裂孔发生率较对照组低（P〈0.05）;注药前后b波波幅未见明显变化。结论 50μg/0.1ml TNK-TPA可有效的溶解、分离PDR中的纤维增殖粘连,提高手术成功率,减少医源性视网膜裂孔发生率,有利于保护视功能,ERG显示未见视网膜毒性。     

相干光断层扫描在屈光与白内障手术相关检查中的应用

眼前节相干光断层扫描(OCT)可检测眼前节组织的解剖结构及其变化,获得前房直径、前房深度、角膜厚度、透明晶状体厚度及曲率半径、虹膜角膜角开放情况、晶状体穹窿和人工晶状体(IOL)间距、白-白角膜直径等眼前节生物测量参数,对进行LASIK、有晶状体眼IOL植入等屈光手术和白内障手术来说不可或缺。     

局部环孢霉素A对去势雄兔干眼模型疗效观察

目的观察去势雄兔泪液分泌、泪膜稳定性改变和结膜、泪腺病理组织学变化以及局部应用环孢霉素A的治疗效果。方法健康成年雄兔18只,随机分为正常组、干眼组和治疗组,每组6只。后两组行双侧睾丸及附睾切除制作干眼模型。治疗组去势后4周给予1%环孢霉素A点双眼,分别于去势前和去势后1、2、3、4、6、8、12周检测各组Shirmer试验、泪膜破裂时间、虎红染色;同时应用光镜进行结膜、泪腺的病理组织学观察。结果实验6周后治疗组泪液分泌增加,泪膜破裂时间延长,与干眼组相比有显著性差异(t=9.08,P<0.01;t=6.93,P<0.01)。治疗组泪腺及结膜组织中淋巴细胞浸润明显减少。结论去势后雄兔睾酮水平明显低下是造成干眼的原因之一,局部环孢霉素A治疗对该型干眼有效。     

儿童痉挛发作的手术策略分析

背景 癫痫性痉挛(ES)是儿童最常见的发作类型之一.关于ES患儿手术疗效的数据却很少,ES既往被认为术后疗效不佳,此外,关于ES的电临床特征及其对术后疗效的影响尚不清楚.由于痉挛发作症状表现的对称性和癫痫发作起始放电的广泛性,致痫区定位困难,癫痫手术难度大.但最新研究表明,若选择适合手术条件的痉挛发作类型,可以达到和其...     

小鼠气性坏疽动物模型的建立

目的建立产气荚膜梭菌感染小鼠的后肢的气性坏疽动物模型,为早期诊断、了解气性坏疽的致病机理及治疗方法提供依据。方法小鼠随机分成4组,每组10只。三个实验组分别肌肉注射3.5×109、3.5×108和3.5×107cfu/ml浓度的产气荚膜梭菌(ATCC13124)菌液0.1ml,空白对照组肌肉注射生理盐水0.1ml,72h后观察小鼠感染情况,取伤口分泌物作革兰氏染色涂片,细菌血平板厌氧培养和荧光定量PCR方法定量检测。结果 3.5×109、3.5×108、3.5×107cfu/ml实验组和对照组在肌肉注射72h内的死亡率为90%、70%、10%和0%。各组平均存活时间依次为(20:43±11:12)h、(37:24±25:39)h、(68:36±10:45)h和(72:00±0:00)h,死亡小鼠出现了气性坏疽的症状,分泌物培养和镜检出产气荚膜梭菌;未死亡小鼠康复;空白对照组无任何症状。各组Ct值均值为21.21±2.69、28.45±2.74、32.49±2.87和0.00±0.00,组间P值均<0.05。结论成功建立了不同浓度的产气荚膜梭菌在不同时间段内感染小鼠的后肢气性坏疽的动物模型,为了解气性坏疽的致病机理及治疗方法奠定基础。     

类风湿性关节炎患者血清RA-CP，抗CCP 抗体及RF 检测对RA 的实验诊断意义

目的　分析不同血清类型的类风湿性关节炎（RA）患者血清中的类风湿性关节炎特异性抗原瓜氨酸化蛋白（RACP） 的水平，比较RA-CP 与抗环瓜氨酸多肽（CCP）抗体、类风湿因子（RF）在RA 诊断中的价值。方法　用酶联免疫 吸附法（ELISA）检测103 例RA 患者、71 例其他风湿病患者、105 例健康体检者血清中RA-CP，抗CCP 抗体和RF 的 水平。根据抗CCP 抗体和RF 测定结果将RA 患者分为4 种血清类型:抗CCP 抗体阳性/RF 阳性的RA、抗CCP 抗体 阳性/RF 阴性的RA、抗CCP 抗体阴性/RF 阳性的RA、抗CCP 抗体阴性/RF 阴性的RA，分析各种血清类型RA 患者 血清中RA-CP 的水平。结果　RA 组的血清中RA-CP 浓度水平中位数为4.51（1.80~7.49）单位，高于其他疾病组的0.53 （0.40~0.76）单位和健康对照组的0.52（0.35~0.69）单位。RA-CP，抗CCP 抗体和RF 对RA 的敏感度分别为77.7%， 65.0% 和69.9%，RA-CP 对RA 的敏感度高于抗CCP 抗体和RF（P ＜ 0.05）；特异度分别为95.5%，97.2% 和89.2%。在 4 种血清型的RA 中RA-CP 的检出率分别为100.0%（57/57），40.0%（4/10），100.0%（15/15）和19.0%（4/21）。在抗 CCP 抗体阴性的RA 中RA-CP 的检出率为52.8%（19/36）。结论　血清中RA-CP 对RA 的诊断比抗CCP 抗体和RF 具有 更高的敏感度，可提高类风湿性关节炎的检出率。因此RA-CP 可作为RA 临床诊断的新辅助指标。