eIF4A1基因沉默对胃癌SGC-7901细胞生物学行为影响机制的探讨

目的探讨沉默eIF4A1基因对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移的细胞生物学行为影响的机制。方法以eIF4A1沉默重组慢病毒颗粒(LV-EIF4A1-RNAi组)感染人胃癌SGC-7901为eIF4A1沉默组(eIF4A1-RNAi组),感染阴性对照慢病毒颗粒(CON077)的胃癌细胞为阴性对照组(CON077组),空白对照组(control组)不作任何处理。以每个副孔初始含4×10~3个细胞,CCK-8检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测各组5×10~6个细胞凋亡和1×10~6个细胞周期分布;Transwell实验检测各组1×10~5个细胞迁移和侵袭能力;实时荧光定量PCR和Western blot检测各组细胞eIF4A1和AKT基因的mRNA和蛋白表达水平。结果 LV-EIF4A1-RNAi(44683-1)组eIF4A1基因的表达量最低为(0.31±0.04),因此选择该组为eIF4A1沉默组(eIF4A1-RNAi)。与CON077组和control组相比,eIF4A1-RNAi组细胞增殖活力明显降低,细胞凋亡率提高,细胞周期阻滞于S期,G1/G2期细胞减少,细胞的迁移、侵袭能力下降,eIF4A1和AKT基因的mRNA和蛋白表达明显降低,差异均有统计学意义(P0.05);CON077组与control组比较,上述指标差异均无统计学意义(P0.05)。结论慢病毒介导eIF4A1基因沉默能抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖和迁移、促进细胞凋亡、阻滞细胞周期于S期,其机制可能与AKT表达下调有关。     

320排容积CT“Target CTA扫描模式”在低心率患者冠状动脉CT血管成像中的应用探究

目的 探讨320排容积CT“Target CTA(Computed Tomography Angiography)扫描模式”在心率低于75次/min的患者行冠脉CT血管成像的可行性。方法 收集拟行冠状动脉CT血管成像且静息状态下心率低于75次/min的患者78例为研究对象,并进行随机分组：A组39例采用传统的前瞻性心电门控采集模式,曝光时间窗（R-R间期的35%～85%）;B组39例采用第二代320排容积CT所自带的Target CTA采集模式,Target Phase设置为R-R间期的75%时间点。主观图像质量采用4分制进行分级和评估。客观图像质量采用主要分支血管CT值、图像噪声、信噪比（Signal-to-Noise Ratio,SNR）、对比噪声比（Contrast to Noise Ratio,CNR）进行评估,并统计有效辐射剂量（Efective Dose,ED）。结果 采用第二代320排容积CT Target CTA采集模式比传统的前瞻性心电门控采集模式减少了66.1%的ED值[（5.9±1.0）mSv vs.(2.0±0.7) mSv],差异有统计学意义（t=-15.17...     

几种少见病理类型脑膜瘤的MRI表现与病理相关性研究

目的分析几种少见病理类型脑膜瘤的MRI表现,探讨其MRI表现与病理相关性。方法回顾性分析病理证实的微囊型脑膜瘤、透明细胞型及血管瘤型脑膜瘤的临床及MRI资料,10例均行MRI平扫及增强。结果肿瘤发生于大脑半球凸面5例,前颅窝嗅沟1例,上矢状窦旁2例,大脑镰旁2例。8例肿瘤轮廓光整,边界清晰,与邻近颅骨呈宽基底改变。2例肿瘤轮廓不光整,边界不清。8例肿瘤周围见轻度水肿带,1例水肿较明显,1例无明显水肿。6例微囊型脑膜瘤MRI平扫呈长T1、长T2信号,增强后呈网格状强化,2例透明细胞型脑膜瘤MRI平扫表现为长T1、长T2信号,与脑脊液信号接近,增强后呈不均匀环状强化,2例血管瘤型脑膜瘤MRI平扫为稍长T1、长T2信号,肿瘤中可见流空的血管信号,增强后呈显著明显强化。结论微囊型、透明细胞型、血管瘤型脑膜瘤MRI表现与病理改变有明显相关性。     

慢病毒介导的E2F-1沉默对人胃癌细胞MGC803中药人参黄芪复方药物敏感性的影响

目的:利用重组慢病毒介导的E2F-1基因沉默载体感染人胃癌MGC-803细胞,观察其对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响.方法:将胃癌MGC-803细胞接种于培养板中分为4组:正常组(正常培养基)、空白对照组(中药培养基)、阴性对照LV-RNAi组(中药培养基+感染空载体慢病毒颗粒2.0×109TU/mL)、E2F-1-RNAi-LV组(中药培养基+感染E2F-1基因重组慢病毒颗粒2.0×109TU/mL),分别采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测E2F-1mRNA及蛋白表达;MTT方法检测细胞的增殖抑制率;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;流式细胞仪检测细胞的凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力.结果:E2F-1基因沉默蛋白及mRNA表达水平均明显下降,差异有统计学意义(0.384±0.036vs0.883±0.051和0.923±0.049,0.220±0.056vs0.729±0.021和0.712±0.037,P<0.05).中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、诱导胃癌细胞凋亡、抑制细胞克隆形成及迁移;与空白对照组及阴性对照组相比较,E2F-1基因沉默组MGC-803细胞增殖抑制率、细胞凋亡率显著提高,其细胞克隆形成、细胞迁移面积显著降低,差异均有统计学意义(0.789±0.013vs0.484±0.060和0.454±0.006,0.383±0.027vs0.114±0.038和0.089±0.051,0.024±0.003vs0.036±0.004和0.052±0.002,0.553±0.038vs0.897±0.020和0.928±0.051,P<0.05).结论:重组慢病毒载体介导的E2F-1基因沉默能有效增强中药人参黄芪复方对人胃癌MGC-803细胞的药物敏感性.     

人胃癌组织定向cDNA文库的构建

目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库。方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有轴IB酶切位点的oligo（dT）引物合成第1链cDNA,以含蛳IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经sGI（IA＆IB）酶切,以CHROMA SPIN＋TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTriplEx2载体连接经体外包装成噬菌体λ文库。结果经检测共获得2．73×10^6个重组子,重组率约为94％,插入片段大小平均为1．2kb。结论用SMART方法构建的胃癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选胃癌相关基因奠定了基础。     

基于上海市金山区院前急救病种下的药品管理现状分析

目的 了解上海市金山区院前急救药品管理工作开展现状,评估院前急救药品管理工作质量及影响因素,为院前急救药品管理、使用提供理论依据。方法 以上海市金山区医疗急救中心2017—2020年药品使用、接诊情况、医务人员药品安全管理素养等为研究对象,通过问卷调查等方式,调查医疗急救中心药品管理现状。结果 医疗急救中心以新进的临床医师为主,鲜有药师配备;急救中心的药品消耗主要集中在急救所需的常见用药,与接诊患者疾病谱相符;院前急救医务人员中本科及以上学历人群药品安全管理水平高于大专及以下人群,差异有统计学意义(P<0.05),不同性别、年龄、工龄人群药品安全管理无明显差异(P>0.05)。结论 上海市金山区医疗急救中心目前药品安全管理素养水平有待提高,其药品管理亟需药师的参与,相应药品管理配套设施需加强,以确保院前急救药品使用的安全、有效。     

人胃癌组织定向cDNA文库的构建

目的快速构建成人胃癌组织cDNA文库。方法从人胃癌组织分离总RNA,以含有Sfi IB酶切位点的oligo(dT)引物合成第1链cDNA,以含Sfi IA酶切位点的SMART寡核苷酸为引物经LD-PCR扩增双链cDNA,双链cDNA经Sfi I(IA & IB)酶切,以CHROMA SPIN+TE-1000柱分级分离cDNA,收集符合需要的cDNA片段并纯化,随后将之与λTripIEx2载体连接经体外包装成噬菌体cDNA文库。结果经检测共获得2.73×10~6个重组子,重组率约为94%,插入片段大小平均为1.2 kb。结论用SMART方法构建的胃癌组织cDNA文库质量较高,为以后筛选胃癌相关基因奠定了基础。     

寰枢侧方关节撑开结合关节重塑技术治疗颅底凹陷合并寰枢椎脱位的临床疗效

目的观察寰枢侧方关节间撑开结合关节重塑技术治疗颅底凹陷合并寰枢椎脱位的临床效果。方法回顾性分析2019年10月至2021年9月首都医科大学三博脑科医院脊髓脊柱中心诊治的12例颅底凹陷合并寰枢椎脱位患者的临床资料。所有患者均合并寰枕融合, 斜坡枢椎角度均减小。术中均行关节间撑开松解侧方关节, 再进行关节重塑, 调整关节面的倾斜角度;然后置入融合器, 使寰椎向上及向后方旋转移动, 并进行固定。所有患者采用日本骨科协会(JOA)评分评估临床症状的改善情况;测量手术前后寰齿间距、齿状突超过钱氏线的距离、斜坡枢椎角度及延髓脊髓角度的变化, 评估寰枢椎复位及齿状突成角移位的矫正情况。结果所有患者均成功重塑关节面并置入螺钉, 均行枕骨-枢椎内固定。手术时长为(191.7±46.9)min, 术中出血量为(182.5±69.3)ml, 无一例患者发生椎动脉及硬脊膜损伤。术后1周内, 颈椎CT显示12例患者的寰枢椎脱位均获得复位, 其中齿状突超过钱氏线的距离由术前的(10.0±3.5)mm减少至术后的(4.2±2.3)mm, 寰齿间距由术前的(6.7±2.1)mm减少至术后的(1.4±0.8)mm;颈椎...