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1.
5氮杂胞苷诱导NB细胞Caspase 8表达及对TRAIL敏感性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨5氮杂胞苷(5-Azacytidine)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y凋亡的影响及其发生机制.方法应用RT-PCR方法检测5氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞Caspase 8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测TRAIL、5氮杂胞苷+TRAIL、5氮杂胞苷+Caspase 8抑制剂+TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响.结果SY5Y细胞不表达Caspase 8,5氮杂胞苷作用1、3和5d的SY5Y细胞Caspase 8表达逐渐增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经5氮杂胞苷诱导表达Caspase 8的 SY5Y 细胞对TRAIL敏感,并呈现一定的时间和剂量依赖性.联合用药组细胞凋亡率分别为(28.6±4.0)%、(38.5±4.2)%和(42.3±6.2)%,与单独用TRAIL组[(9.5±2.0)%、(10.7±1.8)%和(11.2±1.5)%]比较,差异有统计学意义,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000;Caspase 8抑制剂组细胞凋亡率分别为(11.8±2.0)%、(13.5±2.9)%和(15.1±3.4)%,与相应浓度的5氮杂胞苷+TRAIL组相比,细胞凋亡率明显降低,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000,说明Caspase 8抑制剂可明显降低TRAIL对表达Caspase 8的SY5Y细胞的杀伤作用.结论5氮杂胞苷能增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性,其发生机制可能与Caspase 8表达上调有关. 相似文献
2.
目的探讨IENγ(γ干扰素)对TRAIL(肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体)诱导神经母细胞瘤细胞株SMS-KCNR(KCNR)细胞凋亡的影响及其发生机制。方法应用RT-PCR方法检测IFNγ作用前后KCNR细胞Caspase8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测IFNγ、TRAIL、IFNγ+TRAIL及IFNγ+Caspase8抑制剂(zIETD-FMK)+TRAIL对KCNR细胞生长及凋亡的影响;应用比色法测定Caspase8相对活性。结果KCNR细胞不表达Caspase8,IFNγ作用48h后的KCNR细胞Caspase8表达明显增加;KCNR细胞对TRAIL不敏感,IFNγ诱导表达Caspase8的KCNR细胞对TRAIL敏感;IFNγ+TRAIL组Caspase8相对活性明显高于TRAIL组及抑制剂组;zIETD-FMK能阻断Caspase8的活化而抑制TRAIL对KCNR细胞的诱导凋亡作用。结论IFNγ通过诱导Caspase8表达而逆转KCNR细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受。 相似文献
3.
本研究对192例急性髓系白血病(AML)患者进行免疫表型检测,并探讨其与细胞遗传学改变和临床特征的关系。应用流式细胞术及一组系列相关单克隆抗体对192例AML患者骨髓进行免疫表型分析,用染色体G显带技术对其中的125例进行核型分析。结果显示,髓系抗原CD13、CD33、MPO、CD117表达最常见于AML。CD117表达于84.6%AML—M3病例中;较强的自发荧光、CD34与HLA—DR双阴性、表达相关髓系抗原CD13、CD33和MPO对于AML—M3诊断具有一定参考价值。CD14仅在AML—M4和AML—M5中表达;CD64和CD15同时强阳性伴HLA—DR高表达提示AML—M5可能性大。192例AML中,有47.9%伴淋系抗原表达,其中以CD7(20.8%)和CD56(26.0%)最常见,其次为CD19(9.9%)和CD2(7.3%)。125例AML中核型异常者76例(60.8%)。17例伴t(8;21)的AML—M2患者CD19、CD56、CD15表达均明显增加。另外28例t(15;17)均见于M3;2例inv(16)见于M4E0。LymAg^+组CD34阳性患者比例(77.2%)明显高于LymAg-组(48.0%)。结论:免疫表型对AML的诊断与分型至关重要,免疫表型与患者的异常核型改变及临床特征关系密切。本研究结果提示综合细胞形态学、遗传学及免疫表型分析,对AML患者诊断、分型及预后评估有重要意义。 相似文献
4.
目的探讨γ-干扰素(Interferon,IFNγ)、肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecrosisfactorre-latedapoptosisinducingligand,TRAIL)及化疗药联合诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y(SY5Y)凋亡的作用及其发生机制。方法应用Western-blot方法检测IFNγ作用前后SY5Y细胞Caspase8蛋白的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测IFNγ、TRAIL、IFNγ TRAIL、IFNγ Caspase8抑制剂(zIETD-FMK) TRAIL及IFNγ 化疗药 TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响。结果SY5Y细胞不表达Caspase8,IFNγ作用48h后的SY5Y细胞Caspase8蛋白表达明显增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经IFNγ诱导表达Caspase8的SY5Y细胞对TRAIL敏感;zIETD-FMK可明显抑制TRAIL对表达Caspase8的SY5Y细胞的杀伤作用;化疗药可增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性。结论IFNγ可通过上调SY5Y细胞Caspase8表达而逆转SY5Y细胞对TRAIL诱导凋亡的耐受,化疗药可增强TRAIL对SY5Y细胞的诱导凋亡作用。 相似文献
5.
目的探讨Caspase8和Caspase3在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导CHP212神经母细胞瘤细胞凋亡中的作用。方法应用流式细胞仪检测TRAIL、Caspase8/Caspase3抑制剂+TRAIL对CHP212细胞的诱导凋亡作用。应用比色法测定Caspase8、Caspase3的相对活性。应用透射电镜对凋亡细胞进行形态学的观察。结果TRAIL可诱导CHP212细胞的凋亡,并存在剂量依赖性;Caspase8/Caspase3抑制剂能抑制TRAIL对CHP212细胞的诱导凋亡作用。随TRAIL作用时间的延长,Caspase8、Caspase3的活性逐步升高,分别于作用16h、8h后达高峰。透射电镜可见到典型的细胞凋亡特征。结论TRAIL通过Caspase信号传导通路诱导CHP212细胞凋亡并伴随Caspase8和Caspase3活性的增高。 相似文献
6.
阻断TrkB-BDNF信号传导通路对神经母细胞瘤细胞生长及凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:脑源性神经生长因子(BDNF)和其酪氨酸激酶受体B(TrkB)与神经母细胞瘤(NB) 细胞的化疗耐药及恶性预后密切相关。该研究探讨阻断TrkB-BDNF信号传导通路后,NB细胞对化疗药物敏感性的变化。方法:常规培养SH-SY5Y NB细胞,用nM浓度全反式维甲酸(ATRA)诱导TrkB高表达,加入BDNF、化疗药顺铂(CDDP)和特异性酪氨酸酶抑制剂K252a处理。MTT实验方法检测应用K252a前后细胞的存活率的变化;同时应用Western-blot方法检测应用K252a前后TrkB的磷酸化水平的变化;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率;透射电镜(TEM)观察凋亡细胞的形态与结构。结果:ATRA+BDNF+CDDP组细胞的存活率及凋亡率与对照组相比,差异无显著性(P>0.05)。而经K252a处理后,细胞对顺铂的敏感性增加,细胞的存活率明显降低,凋亡率明显升高,差异有显著意义。Western-blot分析显示K252a能够阻断TrkB的磷酸化。结论:阻断TrkB-BDNF信号传导通路可提高NB的化疗敏感性,逆转耐药。 相似文献
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8.
β-榄香烯对多发性骨髓瘤细胞的白细胞介素-6表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨β-榄香烯对多发性骨髓瘤(MM)的白细胞介素-6(IL-6)表达的影响,以期了解β-榄香烯抗MM的分子机制。方法人MM细胞系RPMI 8226与不同浓度的β-榄香烯作用,以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测MM细胞培养上清中IL-6的浓度,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测IL-6基因表达。结果不同浓度的β-榄香烯作用RPMI 8226细胞48h后,培养上清中IL-6浓度与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR检测结果表明,不同浓度的β-榄香烯作用于RPMI 8226细胞48h,RPMI 8226细胞的IL-6基因mRNA表达强度与对照相比均明显降低。结论β-榄香烯能明显减少MM细胞IL-6的自分泌,抑制RPMI 8226细胞的IL-6基因表达。提示β-榄香烯降低IL-6表达可能是其抗MM的机制之一。 相似文献
9.
目的:分析成人急性双表型白血病(BAL)的临床和生物学特征.方法:采用流式细胞术检测22例成人BAL患者治疗前骨髓细胞的免疫表型,染色体R显带技术对其中的16例进行核型分析.结果:在同期急性白血病496例患者中BAL发生率为4.4%(22/496),16例(72.7%)为髓系和B系抗原共表达,5例(22.7%)为T系和髓系 抗原共表达,T系、B系和髓系均表达者1例 (4.5%).BAL患者CD34阳性率为86.4%,高于同期ALL(60.3%)和AML(62.9%)(P<0.05).BAL患者中位年龄大于ALL患者(P<0.05).BAL组肝、脾、淋巴结肿大例数明显高于AML组(P<0.01).BAL组异常核型占56.3%,Ph染色体阳性率(25%)明显高于AML组(0%)(P<0.01).结论:成人BAL发病率低,以髓系和B淋巴系抗原共表达为主.BAL患者发病中位年龄高,高表达CD34,Ph染色体阳性者多见,肝、脾、淋巴结浸润发生率高. 相似文献
10.
Objective To study the changes and clinical significance of lymphocyte subsets and regulatory T cells in peripheral blood of patients with idiopathic thrombocytopenic purpura (PITP). Methods Peripheral blood lymphocyte subsets and regulatory T cells of 40 ITP patients and 40 normal controls were measured with flow cytometry. Results Compared with the normal group,the percentage of CD3+ T lymphocyte,CD4+T lymphocyte and CD16+ /56+ NK cell and ratio of CD4+ /CD8+ decreased markedly in ITP group (P < 0.01),while the percentage of CD8+T lymphocyte increased slightly(P > 0.05)and CD19+B lymphocyte increased significantly(P < 0.01). In ITP patients,the proportion of CD4+ CD25+ T cells in CD4+T cells was higher than that of the control group (P < 0.05)and the proportion of CD4+CD25high T cells was slightly higher(P > 0.05),while the proportion of CD4+ CD25+ Foxp3+ regulatory T cells was lower(P < 0.05). Con-clusion Cellular immune function in patients with ITP is obviously abnormal and the decreased proportion of CD4+CD25+ Foxp3+ regulatory T cells may be related to the immune pathogenesis of ITP. Detection of lymphocyte subsets and regulatory T cells is of some clinical value in evaluation of therapeutic effect and prognosis of ITP. 相似文献