健脾养血汤对特异性皮炎小鼠模型中Toll样受体的表达影响及意义

目的:观察健脾养血汤剂对特异性皮炎小鼠模型皮肤炎症症状和Toll样受体表达的影响。方法:通过外用2,4-二硝基氟苯(DNFB)丙酮制备特异性皮炎小鼠模型,小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=10)和健脾养血汤剂治疗组(n=10)。造模后10d各组皮炎症状打分,使用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组皮肤组织中TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达。结果:与正常组比较,模型组和健脾养血汤治疗组皮炎症状显著,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA均明显上升,表达显著增高(P<0.05)。与模型组比较,健脾养血汤治疗组皮炎症状显著减轻,TLR2、TLR3、TLR4、TLR9m RNA表达均降低(P<0.05)。结论:健脾养血汤剂可通过抑制TLR2、TLR3、TLR4、TLR9表达,改善特异性皮炎临床症状。     

NB-UVB辐射对HUVEC分泌sE-selectin及sICAM-1的影响

目的研究NB-UVB辐射对TNF-α刺激人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)表达可溶性E选择素(sE-se-lectin)及可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)的影响。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞(HU-VEC),将HUVEC接种于96孔塑料培养板,分为对照组,TNF-α组,TNF-α+NB-UVB60mJ/cm2剂量组,TNF-α+NB-UVB40mJ/cm2剂量组,TNF-α+NB-UVB20mJ/cm2剂量组。TNF-α刺激浓度为10ng/mL;NB-UVB高,中,低剂量组剂量分别为20,40,60mJ/cm2。采集上清,ELISA法检测可溶性E选择素(sE-selectin)和可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)含量。结果 NB-UVB能剂量依赖性地抑制TNF-α刺激后HUVEC分泌sE-selectin和sICAM-1。结论 NB-UVB可能通过抑制血管内皮细胞表达黏附分子在治疗炎症性皮肤病中发挥免疫调节作用。     

赤芍丹皮方治疗慢性湿疹的疗效观察

湿疹是多种内外因素引起的皮肤炎症,属于中医湿疮范畴[1],本病易于反复而转化为慢性湿疹,临床治疗有一定难度.本科采用湖北中医药大学附属医院皮肤科协定处方赤芍丹皮方免煎颗粒联合卤米松乳膏外用,治疗慢性湿疹取得了较好疗效,现报告如下.     

阴茎鳞状细胞癌1例

1.临床资料 患者男,65岁.阴茎体部乳头样肿块3年.3年前因脑血栓形成合并肺部感染在当地医院治疗,系统应用抗生素(头孢类和喹诺酮类)及对症支持治疗.数天后阴茎体部出现一钱币大红斑,后破溃,伴痒痛不适,皮肤科医师会诊考虑因用药复杂,但抗生素可能性大,系固定型药疹,嘱停用抗生素,外用紫药水,预防感染.出院后阴茎体部破溃面积逐渐扩大,表面呈乳头样突起,偶有少量分泌物.外院以"尖锐湿疣"多次予高频电灼治疗,同时干扰素皮损内注射,无效,且皮损上出现菜花样或结节样外观.患者否认非婚性生活史.系统检查未见明显异常,双侧腹股沟未扪及肿大淋巴结.     

重楼皂苷Ⅰ对人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19增殖的影响

目的 探讨重楼皂苷Ⅰ对人视网膜色素上皮细胞系(ARPE-19)的增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度(1.5 mg·L-1、3.0 mg·L-1、6.0 mg·L-1)重楼皂苷Ⅰ作用下的ARPE细胞,CCK-8法检测重楼皂苷Ⅰ对ARPE-19细胞增殖的影响;流式细胞仪检测ARPE-19细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot检测ARPE-19细胞内Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Cyclin D1、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达.结果 1.5 mg· L-1、3.0 mg·L-1、6.0 mg·L-1重楼皂苷Ⅰ处理后细胞存活率分别为(68.945±5.647)％、(58.637±5.266)％、(47.338±6.493)％,均低于空白对照组的(98.600±7.803)％;凋亡率分别为(9.622±0.315)％、(26.123±0.331)％、(34.345±0.621)％,均高于空白对照组的(4.512±0.213)％;G0/G1期比例分别为(68.520±2.630)％、(75.222±2.627)％、(81.792±3.931)％,均高于空白对照组的(54.632±2.506)％.重楼皂苷Ⅰ处理对ARPE-19细胞ERK1/2蛋白表达无明显影响,但下调Cyclin D1、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白的表达,上调Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达.结论 重楼皂苷Ⅰ通过下调Cyclin D1的表达将ARPE-19细胞阻滞于G1期,抑制细胞增殖.通过抑制ERK信号通路,活化线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡.本研究为中药重楼治疗增生性玻璃体视网膜病变提供了依据.     

蛇葡萄素通过核转录因子-κB通路调控黑色素瘤A375细胞周期和凋亡

目的 研究蛇葡萄素对A375黑色素瘤细胞增殖,细胞周期和凋亡作用,并探讨其潜在机制。方法 利用八肽胆囊收缩素(CCK-8)实验测定细胞活性;用Hoechst33258染色、流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;相关蛋白的表达利用蛋白质印迹法(WB)检测。结果 经不同浓度蛇葡萄素(0μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)处理48 h后,人黑色素瘤A375细胞增殖明显减弱;蛇葡萄素能显著抑制黑色素瘤A375细胞核转录因子-κB(NF-κB)通路的活化;蛇葡萄素以浓度依赖的方式通过下调B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白的表达,下调Bax蛋白和Cleavedcaspase-3蛋白的表达,促进人黑素瘤A375细胞凋亡;Hoechst33258染色法显示蛇葡萄素诱导的A375细胞凋亡的形态学变化;蛇葡萄素能下调细胞周期调控蛋白Cyclin D1和CDK4的表达,将A375细胞周期阻滞于G₀/G₁期;但NF-κB通路活化剂佛波醇脂(PMA)处理A375细胞后抑制了蛇葡萄素对A375细胞NF-κB信号通路,细胞增殖与凋亡,细胞周期...     

重楼总皂苷对HaCaT细胞增殖和分泌IL-8的影响

目的研究重楼总皂苷对人永生化角质形成细胞株(HaCaT细胞)增殖和分泌白介素8(IL-8)的影响。方法采用MTT法进行细胞增殖实验,采用ELISA法测定重楼总皂苷对HaCaT细胞分泌IL-8的情况。结果在所选浓度范围内(60μg/mL,90μg/mL,120μg/mL和150μg/mL),重楼总皂苷对HaCaT细胞的增殖有抑制作用;其中120μg/mL和150μg/mL浓度组重楼总皂苷可抑制HaCaT细胞自分泌IL-8,90μg/mL,120μg/mL和150μg/mL浓度组重楼总皂苷能抑制TNF-α(浓度为100U/mL),刺激HaCaT细胞分泌IL-8。结论重楼总皂苷能抑制HaCaT细胞增殖和IL-8的分泌。     

皮先明治疗湿疹临床经验

皮先明教授是国家中医药管理局、湖北省卫生厅中医药师承指导老师。刻苦研习古典医籍,擅长治疗各种皮肤科疑难杂证,尤以湿疹最为应手,积累了丰富的临床经验。笔者跟随皮老学习多年,多蒙指点教诲,受益良多,得其治病经验一二,介绍如下。     

重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的 研究重楼皂苷Ⅰ对人黑素瘤A375细胞增殖和凋亡的影响及相关机制。方法 采用CCK8法测定0（对照组）、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞和A375细胞增殖的影响;Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡形态;流式细胞仪检测A375细胞周期变化及细胞凋亡水平;荧光染料（DCFH？DA）测定A375细胞内活性氧的变化;罗丹明123染色测定线粒体膜电位变化;利用分光光度法检测重楼皂苷Ⅰ处理后的A375细胞内ATP和上清液中乳酸、葡萄糖含量;Western印迹法检测A375细胞内Bcl？2、Bcl？2相关X蛋白（Bax）、活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3、细胞周期蛋白D1、丙酮酸激酶同工酶2（PKM2）表达。多组均数比较采用单因素方差分析,组间多重比较采用SNK？q检验。结果 在工作浓度内重楼皂苷Ⅰ对正常人黑素细胞增殖无明显影响,但能明显抑制 A375 细胞的增殖（P 〈 0.01）;荧光显微镜下发现,重楼皂苷Ⅰ处理后的 A375 细胞出现明显的凋亡形态。0（对照组）、1.5、3.0、6.0 mg/L重楼皂苷Ⅰ分别处理A375细胞后,随重楼皂苷Ⅰ浓度增加,细胞凋亡率（分别为4.25% ± 1.27%、10.03% ± 1.49%、36.62% ± 1.97%、44.11% ± 2.47%）逐渐升高（F = 665.7,P 〈 0.01）,G0/G1期细胞比例（分别为54.13% ± 2.57%、67.35% ± 3.79%、74.39% ± 3.29%、82.29% ± 3.99%）亦渐增多（F = 71.81,P 〈 0.01）;细胞内活性氧呈明显上升趋势,细胞线粒体膜电位呈明显下降趋势（P 〈 0.01）;细胞内ATP含量下降（P 〈 0.01）,培养液中乳酸含量下降,葡萄糖含量上升（P 〈 0.01）;细胞Bax、cleaved？caspase？3蛋白表达增多,但Cyclin D1、Bcl？2和PKM2蛋白表达下降（P 〈 0.01）。结论 重楼皂苷Ⅰ可能通过激活细胞内活性氧的产生,引起线粒体膜电位下降,诱导A375细胞凋亡,并通过抑制PKM2、细胞周期蛋白D1表达,使细胞阻滞于G0/G1期。