人抗HBsAg噬菌体抗体Fab段基因的序列分析及表达

对已建的噬菌体抗体库分离出来的人抗－ＨＢｓ克隆进行了序列分析和表达研究，发现４个克隆中３个克隆的重链和轻链完全相同，ＤＮＡ序列分析表明ＶＨ分别属于ＶＨ１亚群和Ⅱ亚群，其轻链ＶＬ分别属于ＶλⅡ亚群和ＶλⅠ亚群。构建了可溶性Ｆａｂ段表达载体，显示出在细菌中表达的Ｆａｂ段抗体与ＨＢｓＡｇ特异性结合，这说明所筛选出来的噬菌体抗体具有ＨＢdisplay status     

慢性乙型肝炎表面抗原携带者前S1基因的高度异质性

应用半巢式聚合酶链式反应（ＰＣＲ）从一例慢性ＨＢｓＡｇ携带者血清中扩增出ＨＢＶ前Ｓ１基因，将其克隆于噬菌体Ｍ１３ｍｐ１９中进行序列分析。结果发现：与同源性最好的ＨＢＶａｄｒ野生林相比，所测的１０个克隆均有替代和插入突变，９个克隆有缺失突变，１０个克隆的核苷酸变异率为５．０％－１７．０％，氨基酸的变异率为１３．０－６０．０％；１０个克隆之间的核苷酸变异率为２．３％－２４．３％，氨基酸的变异率为１４．     

学龄前儿童困难型气质影响因素的回归分析

目的 了解学龄前儿童困难型气质的影响因素。方法 对1150名学龄前儿童的气质类型进行评定，以筛选出的85例困难型气质儿童为研究对象，平易型气质儿童为对照，进行1：2病例对照研究，采用单因素和多因素条件logistic回归进行统计分析。结果 回归分析发现学龄前儿童困难型气质的影响因素主要有出生窒息（OR=8．93）、高热史（3岁前）（OR=2．85）、母亲打骂儿童情况（OR=5．266）、父母带儿童参加社会交往活动频率（OR=0．648）和长辈对儿童教育方式的一致性（OR=2．435）等。结论 学龄前儿童困难型气质受多种因素的影响，重视困难型气质儿童的早期发现，对其采取恰当的教养方式，做好围产期和儿童保健工作，有助于促进儿童健康成长。     

选择性5-HT1A受体拮抗剂WAY-100635抑制帕金森病模型大鼠腹内侧前额叶皮质的神经活动

目的腹内侧前额叶皮质在随意运动的起始和控制、情感以及认知中具有重要作用。然而,黑质-纹状体通路变性后腹内侧前额叶皮质的神经活动和5-HT_(1A)受体的作用仍不清楚。本研究观察了6-羟基多巴胺(6- hydroxydopamine,6-OHDA)损毁黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNc)后大鼠腹内侧前额叶皮质神经活动的变化和体循环给予选择性5-HT_(1A)受体拮抗剂WAY-100635后神经元活动的改变。方法采用在体玻璃微电极细胞外记录方法,记录正常大鼠和SNc单侧损毁大鼠的腹内侧前额叶皮质神经元的活动。结果6-OHDA损毁SNc大鼠的腹内侧前额叶皮质神经元放电频率显著增加,放电形式没有明显改变。体循环给予WAY-100635 (0.1 mg/kg,i.v.)不改变正常大鼠腹内侧前额叶皮质神经元的平均放电频率和放电形式,而显著降低了SNc损毁大鼠前额叶皮质神经元的平均放电频率。结论黑质-纹状体通路的变性可导致腹内侧前额叶皮质神经活动增强,5-HT_(1A)受体拮抗剂WAY-100635可以抑制这种活动增强,提示可能存在腹内侧前额叶皮质5-HT_(1A)受体功能失调。     

幽门弯曲菌感染快速诊断试剂盒的研制及临床应用

介绍两种幽门弯曲菌(CP)感染快速诊断试剂盒的制备,用其检测244例胃粘膜标本,同时与细菌培养及组织学检查结果比较。试剂盒1号、3号对诊断CP感染的敏感性分别为97％和91％,均无假阳性。CP数量、试剂盒中尿素浓度与试剂盒的反应时间呈负相关。用试剂盒3号检测在10min之内即可出结果。具有敏感性强,特异性高及简便、快速的优点,尤其适于在内镜室内使用。     

改良Indiana膀胱术的远期疗效观察

目的:评价改良Indiana膀胱术的远期疗效.方法:对26例改良Indiana膀胱术术后患者的膀胱可控性、尿动力学、肾盂输尿管扩张、上尿路感染情况、血清电解质和肾功能进行随访.结果:26例随访1～7年,平均3年.白天可控率96.2%;贮尿囊容量为380～640 ml,平均542 ml;贮尿囊内压力为1.215～3.224 kPa,平均1.921 kPa.B超、IVP造影示3 例输尿管扩张,经随访无加重.血清电解质及肾功能正常.结论:改良Indiana膀胱术远期疗效可靠,并发症少,是一种较理想的尿路分流术式.     

一种直接高效克隆PCR产物的载体制备

Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ经ＥｃｏＲ Ｖ酶切后，在Ｔａｑ酶作用下加入ｄＴＴＰ使其３’端加上碱基“Ｔ”而成为３’端突出的粘性末端载体。用此载体直接与ＰＣＲ产物连接进行克隆。克隆效率比采用平端载体克隆的效率提高约５０倍。     

综合医院精神科会诊患者失眠的临床研究

目的：探讨综合医院精神科会诊患者失眠的临床特征及与其它精神障碍的关系。方法：对168例精神科会诊患者进行分析。结果：128例(76、2％)会诊患者有失眠．其中61．7％(79／128)为慢性失眠。原发性失眠仅占5．5％(7／128)，85．1％(109／128)是与其它精神障碍有关的失眠。常见的精神障碍诊断为焦虑障碍、心境障碍和谵妄。60．9％的失眠患者在会诊前得到了处理。结论：应对临床医师进行精神卫生教育，提高他们对失眠等常见精神障碍的识别和处理能力。     

Functional interaction of auxiliary subunits and synaptic proteins with Ca(v)1.3 may impart hair cell Ca2+ current properties

We assessed the functional determinants of the properties of L-type Ca(2+) currents in hair cells by co-expressing the pore-forming Ca(V)1.3alpha(1) subunit with the auxiliary subunits beta(1A) and/or alpha(2delta). Because Ca(2+) channels in hair cells are poised to interact with synaptic proteins, we also co-expressed the Ca(V)1.3alpha(1) subunit with syntaxin, vesicle-associated membrane protein (VAMP), and synaptosome associated protein of 25 kDa (SNAP25). Expression of the Ca(V)1.3alpha(1) subunit in human embryonic kidney cells (HEK 293) produced a dihydropyridine (DHP)-sensitive Ca(2+) current (peak current density -2.0 +/- 0.2 pA/pF; n = 11). Co-expression with beta(1A) and alpha(2delta) subunits enhanced the magnitude of the current (peak current density: Ca(V)1.3alpha(1) + beta(1A) = -4.3 +/- 0.8 pA/pF, n = 10; Ca(V)1.3alpha(1) + beta(1A) + alpha(2delta) = -4.1 +/- 0.6 pA/pF, n = 9) and produced a leftward shift of approximately 9 mV in the voltage-dependent activation of the currents. Furthermore, co-expression of Ca(V)1.3alpha(1) with syntaxin/VAMP/SNAP resulted in at least a twofold increase in the peak current density (-4.7 +/- 0.2 pA/pF; n = 11) and reduced the extent of inactivation of the Ca(2+) currents. Botulinum toxin, an inhibitor of syntaxin, accelerated the inactivation profile of Ca(2+) currents in hair cells. Immunocytochemical data also indicated that the Ca(2+) channels and syntaxin are co-localized in hair cells, suggesting there is functional interaction of the Ca(V)1.3alpha(1) with auxiliary subunits and synaptic proteins, that may contribute to the distinct properties of the DHP-sensitive channels in hair cells.     

恒河猴tPA基因的克隆、测序与真核表达

本试验采用高浓度乙二醇（EG-8）作为胚胎冷冻保护剂,以高浓度的半乳糖作为解冻稀释液,对MMTV-Wnt-1转基因小鼠的早期囊胚进行玻璃化冷冻保存。结果在EG-2中平衡4-6min和解冻时间为3-5min时获得了最佳冷冻效果。此条件下冷冻胚胎的总回收率为88.61%（109/123）;回收胚胎在体外发育率达88.99%（97/109）;孵化率达81.65%（89/109）;发育胚胎的移植出生率为38.36%（69/181）;冷漠胚胎移植出生后经PCR检测一半小鼠整合阳性。结果表明使用高浓度的乙二醇作为冷冻保护剂和以高浓度的半乳糖作为冻稀释液能有效地保存转基因小鼠胚胎。