赖型钩端螺旋体Loa22重组质粒的蛋白表达和对巨噬细胞的毒性作用

目的对赖型钩端螺旋体Loa22基因进行表达和功能研究。方法构建赖型钩端螺旋体Loa22成熟肽重组质粒,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Western Blotting检测目标蛋白表达情况。经亲和层析获得目标蛋白并作用于小鼠巨噬细胞ANA-1,检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活力、四氮唑复合物(XTT)吸光度值和细胞凋亡率以评价其细胞毒性。结果成功构建Loa22成熟肽原核表达质粒,通过鉴定并纯化得到Loa22成熟肽,该蛋白使培养ANA-1细胞上清液中LDH活力升高,XTT吸光度值下降,细胞凋亡率增加。结论Loa22对ANA-1具有明显的毒性效性,该基因可能是致病钩体的一个重要毒力相关基因。     

1例复发重症心肌炎治疗体会

1临床资料 患者女性,21岁。2＋年前在＂感冒＂后4天反复出现意识丧失,入院时体温36.0℃,血压80/50mmHg,心率55次/分,呼吸18次/分,人院后查心肌酶学CK873U/L,CK-MB103U/L,     

原发性高血压患者单核细胞趋化蛋白-1基因多态性对尼索地平疗效的影响

目的探究并分析原发性高血压(高血压)患者单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)基因多态性与尼索地平疗效及血清整合素β3、血清细胞间黏附分子(serum intercellular adhesion molecule,sICAM)-1浓度的相关性。方法选取2017年3月至2018年3月成都市温江区人民医院收治的高血压患者100例(基因型为-2076A/T或者-2518G/A),根据患者基因检测结果分为观察组(基因型-2076A/T)及对照组(基因型-2518G/A)。两组患者均给予尼索地平治疗,观察并记录两组患者治疗前,治疗后1个月,治疗后3个月血压控制情况以及血清整合素β3、sICAM-1浓度。结果两组患者性别、年龄、体质量、病程、用药等比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后两组患者血压、整合素β3浓度、sICAM-1浓度均较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),但观察组患者血压、整合素β3浓度、sICAM-1浓度降低程度显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者总有效率显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用尼索地平治疗后,MCP-1基因型为-2076A/T的高血压患者的疗效及血清整合素β3、sICAM-1浓度降低程度显著高于MCP-1基因型为-2518G/A的高血压患者。     

赖型钩体毒力相关基因OmpL17表达纯化及其产物的趋化作用

目的研究钩体017株外膜蛋白新基因ompl17与钩体肺大出血的相关性。方法提取钩端螺旋体017株基因组DNA，扩增出ompL17基因，与表达载体pGEX-4T-1重组，诱导表达OMPL17蛋白，然后纯化得到活性表达产物，并建血管基底膜，分析该产物的趋化活性。结果SDS-PAGE和Western-blot分析证实诱导表达并纯化得到OMPL17蛋白，趋化作用分析证明该基因表达产物具有趋化活性。结论成功表达纯化出ompL17基因的蛋白，观察到该基因表达产物具有趋化活性，为赖型钩体的分子机制的进一步阐明奠定了基础。     

主动脉夹层分子机制的研究进展

主动脉夹层是致死性很高的大血管疾病,其典型的组织学特征是主动脉中层退行性变。由于对主动脉壁退行性变的分子机制尚未阐明,目前尚缺乏有效预防主动脉夹层形成、进展和破裂的措施。近年来由于分子生物学和基因敲除动物的广泛应用,使主动脉夹层的分子机制取得较大进展。本文就近年来主动脉夹层分子机制的进展作简要综述。     

结核杆菌Rv0901基因真核表达质粒的构建及在细胞内的表达与鉴定

目的构建结核杆菌Rv0901基因的真核表达质粒并进行表达,为研究Rv0901基因的功能提供材料。方法以结核杆菌基因组DNA为模板PCR扩增Rv0901基因序列,将Rv0901基因定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1（＋）获得重组表达质粒,体外转染Cos7细胞,RT-PCR检测转染的情况,并提取转染细胞总蛋白和收集细胞培养液上清检测蛋白的表达,Western-blotting检测蛋白表达的特异性。结果成功扩增出Rv0901基因序列,成功构建重组真核表达质粒pcDNA3.1-Rv0901,重组质粒转染细胞后的RT-PCR能扩增出Rv0901基因序列,转染细胞总蛋白和细胞培养液上清均能特异表达Rv0901基因蛋白。结论成功构建Rv0901基因真核表达质粒并在真核细胞内进行了良好表达,为研究该基因功能打下了坚实基础。     

赖型钩体毒力相关基因ompL17的克隆表达及产物的体内分布

[目的] 观察ompL17基因表达产物的免疫原性以及该表达蛋白在动物模型中的分布情况.[方法] 提取钩端螺旋体017株基因组DNA,扩增出ompL17基因,与表达载体pGEX-4T-1重组,诱导表达OMPL17蛋白,免疫动物获得相应抗体,通过免疫组织化学技术观察该蛋白在动物模型组织当中的分布.[结果] PCR和酶切分析证实构建成功了表达载体,SDS-PAGE和Western-blot分析证实诱导表达出OMPL17蛋白,通过免疫组织化学技术观察到了该蛋白在动物模型中的分布情况. [结论] 成功表达出ompL17基因的蛋白,观察到豚鼠动物模型中该蛋白的分布情况,为赖型钩体的分子机制的阐明奠定了基础.     

转甲状腺素蛋白心脏淀粉样变心肌病及其合并症的药物治疗进展

转甲状腺素蛋白心脏淀粉样变心肌病（ATTR-CM）是由于不稳定的转甲状腺素蛋白（TTR）四聚体解离成单体后错误折叠为淀粉样物质沉积于心肌间质所致的一种浸润性心肌病。既往针对ATTR-CM无特异性的治疗药物,主要针对心力衰竭和心律失常对症治疗。近年来针对ATTR-CM的发病机制,学者们研发了两大类药物：一类是稳定TTR四聚体结构的药物（如氯苯唑酸和acoramidis）,另一类是干扰TTR合成的药物（如patisiran）。其中氯苯唑酸已被研究证实是目前唯一能治疗ATTR-CM的药物,其他药物均尚处于临床试验阶段,临床证据有限。在ATTR-CM合并症的药物治疗方面,主要是针对最常见的心脏合并症（如心力衰竭和心律失常）的治疗;传统用于改善心力衰竭预后的药物（如β受体阻滞剂、肾素-血管紧张素受体拮抗剂）在ATTR-CM患者中未证实可改善预后,相反可能带来不良反应。对于合并房颤的ATTR-CM患者,推荐进行抗凝治疗以预防血栓形成,并可使用胺碘酮进行节律控制。尽管ATTR-CM在药物治疗方面取得了显著进展,但整体预后仍较差,需要在发病机制和靶点开发方面进一步研究,以进一步改善ATTR-CM患者的...     

他汀联合依折麦布对STEMI合并非透析依赖的CKD患者调脂治疗的有效性和安全性

目的 探讨他汀联合依折麦布对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)合并非透析依赖的慢性肾脏病(CKD)患者调脂治疗的有效性和安全性.方法 选取2017年2月至2019年4月在该院住院的29例使用阿托伐他汀联合依折麦布调脂治疗的STEMI合并非透析依赖的CKD患者作为观察组,以同期性别、年龄和临床资料匹配的38例单用阿托伐他汀的STEMI合并非透析依赖的CKD患者作为对照组,观察治疗3～6个月后两组血脂的达标率及安全性.结果 两组患者年龄、性别、既往病史、冠状动脉病变特征、心功能和主要药物治疗无明显差异(P>0.05).两组患者治疗后低密度脂蛋白(LDL)水平较治疗前均明显降低(P<0.05),且观察组低于对照组[(2.0±0.6)mmol/L vs.(2.3±0.4)mmol/L,P<0.05].观察组LDL达标率明显高于对照组(58.6％v s.18.4％,P=0.001).两组各有1例转氨酶升高,肌酐水平在治疗前后无明显差异(P>0.05).两组患者随访6个月主要心血管不良事件发生率无明显差异(P>0.05).结论 STEMI合并非透析依赖的CKD患者他汀联合依折麦布调脂治疗较单用他汀能显著降低LDL水平,提高LDL达标率,且相对安全,对心血管事件的影响需进一步随访评估.     

混合式教学在心血管内科临床见习示教中的应用

目的:评估案例教学(case-based learning,CBL)、以问题为基础的学习(problem-based learning,PBL)和混合式教学(CBL+PBL)3种不同教学方法在医学生心血管内科临床见习示教中的应用效果。方法:纳入大学三年级学生共175名,分成3个教学组(CBL、PBL和CBL+PBL),...