全文获取类型
收费全文 | 195篇 |
免费 | 27篇 |
国内免费 | 7篇 |
专业分类
儿科学 | 1篇 |
基础医学 | 26篇 |
临床医学 | 20篇 |
内科学 | 13篇 |
皮肤病学 | 2篇 |
神经病学 | 9篇 |
特种医学 | 2篇 |
外科学 | 5篇 |
综合类 | 38篇 |
预防医学 | 31篇 |
眼科学 | 1篇 |
药学 | 51篇 |
中国医学 | 25篇 |
肿瘤学 | 5篇 |
出版年
2024年 | 5篇 |
2023年 | 13篇 |
2022年 | 10篇 |
2021年 | 8篇 |
2020年 | 3篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 10篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 8篇 |
2015年 | 6篇 |
2014年 | 10篇 |
2013年 | 4篇 |
2012年 | 20篇 |
2011年 | 6篇 |
2010年 | 8篇 |
2009年 | 10篇 |
2008年 | 12篇 |
2007年 | 8篇 |
2006年 | 15篇 |
2005年 | 13篇 |
2004年 | 8篇 |
2003年 | 6篇 |
2002年 | 11篇 |
2001年 | 5篇 |
2000年 | 3篇 |
1999年 | 6篇 |
1998年 | 1篇 |
1997年 | 7篇 |
1996年 | 1篇 |
1994年 | 1篇 |
1993年 | 1篇 |
1991年 | 1篇 |
排序方式: 共有229条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
氯霉素乙酰基转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立氯霉素乙酰基转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)双抗体夹心ELISA的实验室检测方法。方法 从质粒pBLCAT6经PCR扩增CAT基因序列,插入到原核表达质粒pGEX-2T中,在大肠埃希菌DH5α中诱导表达;以纯化的融合蛋白GST-CAT为抗原免疫实验用兔,得到的CAT抗血清进行生物素标记,并在此基础上利用生物素链和亲和素放大系统建立双抗体夹心ELISA法,构建不同YY1结合位点突变的HPV16LCRCAT报道质粒,体外瞬时转染真核细胞,提取胞质蛋白,以建立的方法进行CAT表达检测。结果 SDS-PAGE显示表达的GST-CAT融合蛋白相对分子质量约为54000;制备的CAT抗血清可有效地识别原核及哺乳动物细胞表达的CAT蛋白;在不同启动子及调节序列的控制下,利用建立的CAT检测技术证明在瞬时转染的细胞中可诱导2-8倍的CAT表达增强。结论 建立的双抗体夹心ELISA方法可敏感地反映上游序列的启动子活性,以及启动子调节序列变化对启动子活性的影响,使CAT作为报道基因的研究更为简单化。 相似文献
2.
目的 研究超声处理对感染羊瘙痒症仓鼠脑组织中PrP^Sc聚集状态的影响,寻找产生PrP^Sc低聚体的条件。方法 裂解液制备脑组织提取物,用各种超声条件处理不同阶段的脑组织提取物;以蛋白酶消化后的Western blot方法和图象分析系统观测PrP^Sc蛋白的分布和聚集状态。结果 适当的超声处理(15s共30次)可增加脑组织匀浆上清中PrP^Sc含量1.29~1.58倍;同样条件下超声处理可明显增加羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量,而对正常对照仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量影响不大;对经常规高速离心获得的PrP^Sc的超声处理显示约90%的PrP^Sc存在于离心上清液中。结论 对感染动物脑组织进行超声处理可增加PrP^Sc的提取量,利于实验室检测。适当的超声处理可破碎大的相对分子质量的PrP^Sc聚集物,产生小的相对分子质量的PrP^Sc产物。 相似文献
3.
内皮素1(endothelin1,ET1)是目前已知最强的内源性血管收缩物质[1],降钙素基因相关肽(calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)是具有强大扩张血管作用的肽类物质[2],二者均在脑循环的调节中起重要作用... 相似文献
4.
奥美拉唑 (omeprazole)是苯并咪唑类质子泵抑制剂 ,治疗消化性溃疡具有疗效高、疗程短、耐受性好和复发率低的特点。为比较市售注射用奥美拉唑钠 (静脉推注型 )产品的质量 ,我们抽取市售的两种品牌产品 ,测定其含量和有关物质 ,并通过加速实验了解其稳定性。1 试药与仪器奥美拉唑对照品 (U .S .PHARMACOPIA公司 ,批号4 785 0 ) ,奥美拉唑有关物质A ,B ,C ,E对照品 (北京大学药学院 ) ,有关物质D(EUROPEANPHARMACOPOEIA公司 ,批号 90 7-F6 70 2 9) ,奥克注射剂 (国内某公司生产 ,含奥美拉唑 4 0mg ,批号为 :2 0 0 10 70 1,2… 相似文献
5.
目的:研究国产与进口非那雄胺片的人体生物等效性。方法:采用高效液相色谱法测定18名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服非那雄胺片10mg后血清中的药物浓度,计算药动学参数和相对生物利用度,并进行生物等效性评价。结果:国产及进口非那雄胺片的AUC0~t 分别为(990 .80±302. 80)、(1007 .46±333. 65) (μg·h)/L ,Cmax 分别为(119. 22±18. 48)、(114. 08±22 .97) μg/L ,tmax 分别为(2. 89±1. 02)h、(2. 64±0. 54)h ,国产制剂相对于进口制剂的人体生物利用度为(103. 35±29 .75) %。结论:国产与进口非那雄胺片具有生物等效性。 相似文献
6.
目的:了解药品不良反应(ADR)在我院(北京天坛医院)的发生情况及相关因素。方法:对404例ADR病例报告进行分类统计和分析评价。结果:涉及ADR的药物共有62个品种,其中抗感染药的发生率居首位,其次为中药制剂、神经系统药物。合并用药占22.5%;给药途径以静脉用药为主。主要的ADR类型为皮肤损害,其次是心血管及消化系统损害。结论:应继续加强对ADR的监测。 相似文献
7.
目的研究敲低Polo样激酶1(PLK1)后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用。方法流式细胞术评测LAH4-L1载体对小干扰绿色荧光蛋白基因(siGFP)的递送效率;反转录PCR检测PLK1 mRNA水平,Western blot法检测PLK1蛋白水平;敲低PLK1水平后,采用CCK-8法检测HeLa细胞活性和生长抑制情况。结果 LAH4-L1-siPLK1纳米复合物可下调HeLa细胞PLK1约70%,并降低PLK1蛋白的表达,敲低PLK1后,可明显抑制HeLa细胞增殖。另外,LAH4-L1载体的基因递送效率能够稳定维持在较高水平。结论敲低HeLa细胞PLK1抑制癌细胞生长,LAH4-L1是一个较好的基因递送载体。 相似文献
8.
目的克隆、表达和纯化人朊蛋白相关Shadoo(SHO)蛋白并制备抗Shadoo的多克隆抗体。方法提取仓鼠各组织的mRNA,分析SHO基因在仓鼠各组织中转录水平的差异;提取人DNA,PCR方法获得人SHO基因,克隆至融合表达载体,在大肠埃希菌中表达人SHO蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫家兔制备抗血清,用Western blot方法分别检测与重组及内源性SHO蛋白的免疫反应性。结果SHO基因在仓鼠各组织中的转录水平差异很大,脑组织转录水平高。在大肠埃希菌中表达了分子质量单位为37 ku的人SHO融合蛋白,制备的SHO蛋白抗体可与重组的SHO蛋白反应,可识别内源性的SHO。结论成功表达纯化人SHO融合蛋白并制备了抗SHO抗体,为研究SHO和正常朊蛋白之间的关系打下初步基础。 相似文献
9.
目的 评价丹珍头痛胶囊治疗偏头痛的疗效及安全性。方法 检索中国生物医学文献数据库(CBM)、中国学术期刊全文数据库(CNKI)、维普中文科技期刊数据库(VIP)、万方数据库和Pubmed数据库有关丹珍头痛胶囊治疗偏头痛的随机对照试验(RCTs),采用Modified Jadad评分量表对纳入文献进行质量评价,应用RevMan 5.3软件进行统计分析。结果 最终纳入9篇RCTs,共891例患者。Meta分析结果显示,丹珍头痛胶囊治疗偏头痛的总有效率高于西药组[RR=1.26,95%CI(1.19,1.35)],差异有统计学意义(P < 0.001)。亚组分析显示,单纯应用丹珍头痛胶囊比单纯使用常规西药总有效率更高[RR=1.28,95%CI(1.19,1.39),P < 0.001],在常规西药基础上加用丹珍头痛胶囊可提高治疗的总有效率[RR=1.22,95%CI(1.10,1.36),P=0.000 3],丹珍头痛胶囊治疗偏头痛总有效率高于盐酸氟桂利嗪[RR=1.26,95%CI(1.17,1.34),P < 0.001]和加巴喷丁[RR=1.32,95%CI(1.10,1.57),P=0.002],差异均有统计学意义(P < 0.05)。丹珍头痛胶囊组未见严重不良反应。结论 丹珍头痛胶囊治疗偏头痛的疗效可能优于常规西药,在常规西药基础上联合丹珍头痛胶囊可提高疗效。为提高结论的可靠性,尚需更多高质量、多中心、大样本的RCTs。 相似文献
10.
目的研究基于单样本基因富集分析(ssGSEA)分型构建肺腺癌的风险预测模型的价值。方法从癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分别获取515例及116例肺腺癌患者的数据。基于TCGA数据库进行ssGSEA分析及聚类分析,将样本分为高免疫评分组和低免疫评分组,并进行免疫相关分析、富集分析及差异分析,进一步获得免疫相关的差异表达基因。将TCGA数据集患者以7∶3随机分为训练集和内部验证集。基于TCGA训练集的免疫相关差异表达基因数据,通过单因素Cox风险回归、套索算法(Lasso)回归以及多元逐步Cox风险回归分析降维,构建肺腺癌患者预后的预测模型,获得相应的风险分数(Riskscore),并用TCGA内部验证集及GEO外部验证集进行验证。将Riskscore与临床特征进行独立预后因素分析,建立列线图。ROC曲线与校正曲线分析分别用来评估模型的效能及拟合度。结果根据患者样本的ssGSEA免疫评分、聚类分析及差异分析的结果,患者被分为高免疫评分组和低免疫评分组以及获得1447个差异表达基因。再通过单因素Cox风险回归、Lasso回归以及多元逐步Cox风险回归分析降维,获得剩余8个预后相关免疫差异表达基因的最优集合和每例患者的Risks-core。该风险预测模型在训练集、内部验证集及外部验证集的AUC分别为0.703、0.713、0.750。根据独立预后分析结果,肺腺癌的分期及预测模型的Riskscore是肺腺癌患者的两个独立预后因子并联合绘制列线图。列线图1、3、5年总生存期的AUC分别为0.789、0.763、0.746。校正曲线分析也显示该模型的拟合度较好。结论基于ssGSEA分型构建并验证的肺腺癌患者预后风险预测模型,具有较高的预后风险预测效能,可为临床医师判断肺腺癌患者总生存期提供辅助工具。 相似文献